Contributions to the knowledge of a new disease caused by an amoeba in ongrowing Senegalese sole, Solea senegalensis (Kaup 1858)

Esta patología se caracteriza por la presencia de protuberancias que se evidencian a través de la piel de los peces afectados. Estas lesiones se corresponden con nódulos en el tejido muscular, que muestran un aspecto de absceso. Lesiones similares a éstas también se han detectado en riñón, corazón, hígado y tracto digestivo, lo que nos permite definir la enfermedad como sistémica. Las secciones histológicas de los nódulos revelaron un extenso núcleo compuesto mayoritariamente por tejido necrótico rodeado por fibroblastos y macrófagos. Además, organismos plasmodiales de morfología esférica se encontraron en la capa externa de estos nódulos, normalmente en el interior de macrófagos o fibroblastos. Estos organismos también se observaron en la mucosa y submucosa intestinal, sin causar lesiones aparentes. En este trabajo se ha podido identificar a estos organismos como una nueva especie de ameba perteneciente a la familia Entamoebidae (Phylum Amebozoa, Infraphylum Archamoeba), y se describe tentativamente como una nueva especie del género Endolimax, Endolimax piscium n. sp. E. piscium presenta trofozoitos redondeados ( 5 μm) con un alto grado de simplificación intracelular, sin mitocondrias en el citoplasma pero con unos orgánulos compatibles con mitosomas. Con el fin de establecer técnicas fiables de diagnóstico para el reconocimiento de este parásito, se han desarrollado y evaluado técnicas específicas de hibridación in situ (ISH) y de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), utilizando el examen histológico (una combinación de técnica histológica convencional en muestras de músculo e ISH en muestras de intestino) como prueba estándar para compararlos. Como resultado, todas las técnicas evaluadas obtuvieron altos indicadores de calidad. La técnica de ISH fue la más específica y sensible y se encontró particularmente útil como método de referencia de confirmación en muestras de intestino, no sólo para confirmar los positivos, sino también para descartar negativos, dia
A previously undescribed pathological condition is affecting the culture of Solea senegalensis in some farms of the Atlantic coast of Spain. This condition is characterised by the presence of external protuberances in the skin of the affected fish. These lesions correspond to nodules in the muscular tissue showing an abscess-like aspect. Similar lesions were found in kidney, heart, liver and the digestive tract, which leads us to define this pathology as a systemic disease. Histological sections of these nodules revealed the presence of a large core formed mainly of necrotic tissue surrounded with fibroblasts and macrophages. Round-shaped plasmodial organisms were found in the external layer of the nodules and usually inside macrophages or fibroblasts. These organisms were also observed in the intestinal mucosa and submucosa, without causing apparent lesions. This organisms are correspond to a new amoeba species, that belongs to the family Entamoebidae (Phylum Amebozoa, Infraphylum Archamoeba), and we tentatively describe it as a new species in the genus Endolimax, Endolimax piscium n. sp. E. piscium presents round to ovoid trophozoites ( 5 μm) with a high degree of intracellular simplification. No mitochondria were observed but mitosome-like organelles were present. In order to establish reliable diagnostic techniques for the recognition of E. piscium, specific in Situ Hybridization (ISH) and Polymerase Chain Reaction (PCR) tests have been developed and evaluated using the histological examination (a combination of conventional histological technique in muscle samples and ISH in intestine samples) as gold standard to compare them. As a result, all evaluated techniques obtain quite high quality indicators. The ISH technique was the most specific and sensitive and it was useful as a reference confirmatory method in intestine samples, not only to confirm positives but also to discard negatives, diagnosed as doubtful by conventional histology. PCR technique is a fast a