Estudio de la expresión génica en Mytilus galloprovincialis tras la exposición a Prorocentrum lima empleando PCR cuantitativa en tiempo real

[Resumen]: Las mareas rojas (Harmful Algal Blooms, HABs) son un problema ecológico y sanitario cada vez más frecuente en las costas gallegas y en todo el mundo. En Galicia las HABs más comunes son las producidas por microalgas productoras de toxinas diarreicas (Diarrhetic Shellfish Poissoning, DSP). El mejillón Mytilus galloprovincialis es uno de los principales vectores de las toxinas DSP. Además, es un organismo centinela de la contaminación, idóneo para el estudio y comprensión de los efectos genotóxicos y citotóxicos que estas toxinas tienen sobre los bivalvos y los ecosistemas. En Galicia, el mejillón es un importante recurso para la economía local a través de su explotación acuícola. Las HABs pueden suponer unas pérdidas económicas cuantiosas para este sector lo que supone un valor añadido para el estudio y comprensión de estos fenómenos y los efectos que causan. En este trabajo se estudian los posibles efectos que pueden tener las toxinas DSP en la expresión de las caspasas 3/7-1, 3/7-3 y 3/7-4 en M. galloprovinicialis, ya que éstas tienen un papel importante en la apoptosis. Para ello, se usaron muestras de branquia de mejillón tomadas bajo dos condiciones experimentales: una control y otra tratamiento (exposición a 100.000 células/L de Prorocentrum lima durante 24 h). De las muestras se extrajo el ARN y éste se utilizó, a través de una qPCR, para detectar las posibles diferencias de expresión. Aunque los resultados finales no muestran una expresión diferencial, estos aportan más información para la comprensión del proceso apoptótico en M. galloprovinicialis y sus mecanismos de defensa ante las toxinas.
[Abstract]: Harmful algal blooms are an ecological and health problem, which is becoming more frequent in the Galician coast and all over the world. In Galicia the more frequent ones are those originated by microalgae producers of DSP toxins (Diarrhetic Shellfish Poissoning). The mediterranean mussel Mytilus galloprovincialis is one of the main vectors of DSP intoxication in humans. Also, it is considered a centinel organism of pollution, perfect for the assessment and understanding of the genotoxic and cytotoxic effects that these phenomena inflict on bivalves and ecosistems. In Galicia, mussel farming is a major economic resource for local economy and HABs are able to produce important losses to this activity. This fact makes the study and understanding of HABs and its effects even more crucial. In this study, the effects that DSP toxins can produce in the expression of caspases 3/7-1, 3/7-3 and 3/7-4 in M. galloprovinicialis are investigated, since these proteins are associated with an important role in the apoptosis. For this aim, gill samples taken under two different experimental conditions were used: control and treated (24 h treatment with Prorocentrum lima, 100,000 cells/L). From the samples the RNA was extracted and used, through a qPCR, to assess a possible differential expression. Even though results do not show a differential gene expression, they contribute to the understanding of the apoptotic process in M. galloprovinicialis and its defense mechanisms against toxins.
[Resumo]: As mareas vermellas ( Harmful Algal Blooms, HABs) son un problema ecolóxico e sanitario cada vez máis frecuente nas costas galegas e en todo o mundo. En Galicia as HABs máis comúns son as producidas por microalgas produtoras de toxinas diarreicas (Diarrhetic Shellfish Poissoning, DSP). O mexillón Mytilus galloprovincialis é un dos principais vectores de intoxicación con toxinas DSP. Ademais, é un organismo sentinela da contaminación, idóneo para o estudo e 2 comprensión dos efectos xenotóxicos e citotóxicos que estes fenómenos teñen sobre os bivalvos e os ecosistemas. En Galicia, o mexillón é un importante recurso para a economía local a través da súa explotación acuícola. As HABs poden supoñer unhas perdas económicas cuantiosas para este sector o que supón un valor engadido para o estudo e comprensión destes fenómenos e os efectos que causan. Neste traballo estúdanse os posibles efectos que poden ter as toxinas DSP na expresión das caspasas 3/7-1, 3/7-3 e 3/7-4 en M. galloprovinicialis, xa que éstas estan asociadas a un papel importante na apoptose. Para iso empregáronse mostras de branquia de mexillón tomadas baixo dúas condicions experimentais: unha control e outra tratamento (exposición a Prorocentrum lima, 100.000 células/ L durante 24 h). Destas mostras extraeuse o ARN, que sería utilizado, a través dunha qPCR, para detectar as posibles diferenzas de expresión. Aínda que os resultados finais non mostran unha expresión diferencial, estes achegan máis información para a comprensión do proceso apoptótico en M. galloprovinicialis e os seus mecanismos de defensa ante as toxinas.