Análisis funcional de factores de actuación en trans y proteínas ribosómicas durante la síntesis de subunidades ribosómicas en Saccharomyces cerevisiae

El estudio de la síntesis de los ribosomas eucariotas es un campo de investigación muy prolífico debido, sin duda, a la enorme complejidad que encierran los aspectos fundamentales de este proceso. Esta Tesis se centra en el análisis funcional, tanto de determinados factores de actuación en trans como de ciertas proteínas ribosómicas, ambos necesarios para el correcto ensamblaje de las partíc ulas prerribosómicas y en comprender cómo estas partículas adquieren su funcionalidad en el citoplasma. Como organismo de estudio se utiliza la levadura Saccharomyces cerevisiae. S. cerevisiae posee alrededor de 300 factores proteicos de actuación en trans que participan en la síntesis de ribosomas. Desconocemos la función precisa de la mayoría de estos factores para los que no existen siquiera motivos o dominios reconocibles en sus secuencias primarias de aminoácidos, más allá de motivos generales de unión a RNA presentes en algunos factores. En los últimos años se ha podido determinar la composición de algunas partículas prerribosómicas en cepas silvestres y cepas mutantes con las que se ha podido inferir al menos la posición y tiempo de acción de algunos de ellos. Otros aspectos casi completamente inexplorados son el análisis de los sustratos y las redes de interacción de los factores de actuación en trans. La mayor parte de las proteínas ribosómicas son esenciales para el procesamiento de los pre-rRNAs, y en general, para la síntesis de ribosomas. Se han llevado a cabo análisis sistemáticos y específicos del papel de numerosas proteínas ribosómicas de ambas subunidades, en la maduración y el transporte de las partículas prerribosómicas (1, 4). Un primer objetivo de este trabajo ha sido el estudio del factor de actuación en trans Nop6. En el Capítulo 1 de esta Tesis se muestran los resultados de la caracterización funcional de Nop6, un componente no esencial de partículas tempranas 90S, que es necesario para la síntesis de subunidades ribosómicas 40S (2). En el Capítulo 2 se