AVALIAÇÃO DO PROCESSO DE DECAIMENTO NÃO CONTROLADO DE TEMPERATURA PARA CRIOPRESERVAÇÃO DE PRODUTOS DE TERAPIA CELULAR EM FREEZER -80°C

Objetivo: O método padrão de criopreservação de produtos de terapia celular utilizado no laboratório é com taxa de decaimento controlado de temperatura em congelador programável (Cryomed). No entanto, dada a importância de se validar um método alternativo de congelamento para uso contingencial, este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia da criopreservação de Produtos de Terapia Celular em freezer -80°C. Materiais e métodos: 10 bolsas de Células Progenitoras Hematopoéticas (HPC) foram coletadas por aférese e processadas de acordo com protocolos institucionais previamente validados. Para fins de comparação, testes de viabilidade por citometria de fluxo, também seguindo os protocolos padronizados da instituição, foram realizados nas amostras imediatamente após a coleta e repetidos pós-processamento e pós-descongelamento. Foram incluídas neste estudo somente coletas com viabilidade de células CD34+ pré-processamento ≥90%. Foi estabelecido como critério de aceitação a viabilidades das células CD34+ pós-descongelamento ≥70% em todas as amostras testadas. Após o processamento e adição da solução crioprotetora, o produto final de cada coleta foi subdividido em no mínimo duas bolsas de congelamento. O sensor de um data logger utilizado para monitorar o decaimento da temperatura foi inserido na canister de uma unidade a ser congelada, que foi alocada diretamente no freezer -80°C. O freezer permaneceu fechado até que a temperatura indicada atingisse -76°C. As demais unidades da mesma coleta foram submetidas ao congelamento controlado em Cryomed. Posteriormente, os dados do Data Logger foram recuperados e gráficos com curvas de decaimento de temperatura foram impressos. No primeiro dia útil seguinte ao congelamento, um segmento do item submetido ao congelamento no freezer -80°C e um segmento de um item congelado no Cryomed, provenientes da mesma coleta, foram encaminhados para teste de viabilidade das células CD34+ por citometria de fluxo. Resultados: A viabilidade média das células CD34+ pós-processamento das coletas incluídas no estudo foi de 99,93%. A viabilidade pós-descongelamento de todas as amostras analisadas estiveram acima de 70%. A viabilidade média das células CD34+ pós-descongelamento submetidas ao congelamento padrão foi de 96,87% (93,1‒99,5), enquanto para as células alocadas em freezer -80°C foi de 98,11% (95,7‒100), não havendo diferença significativa entre os valores (p = 0,11). Discussão: Conforme resultados apresentados, evidenciou-se a integridade das células de interesse antes de serem submetidas aos processos de criopreservação e também após o descongelamento, tanto daquelas submetidas ao congelamento padrão de rotina quanto das submetidas ao congelamento não controlado em freezer -80°C, demonstrando que o método alternativo proposto não impacta na qualidade do produto. Conclusão: O procedimento foi considerado eficaz para a criopreservação de produtos de terapia celular como alternativa ao congelamento em congelador programável, com garantia da segurança do produto para uso terapêutico.