ANÁLISIS DE FRAGMENTOS DE RAMNOGALACTURONANO I COMO INDUCTORES DEL MECANISMO DE DEFENSA DEL TOMATE

El ramnogalacturonano I (RG I) es parte de la pectina de la pared celular vegetal y se ha sugerido que cumple una función importante en la fisiología de la pared celular. Los cambios en ella son catalizados por enzimas como la RG liasa (RGL) dando lugar a la formación de diversos fragmentos. Actualmente, existe poca información sobre el efecto inductor de estos fragmentos en el mecanismo de defensa en frutos, y sobre sus características físico-químicas y estructurales. Por lo anterior, el objetivo fue caracterizar parcialmente el RG I de papa y sus fragmentos obtenidos por degradación enzimática de la RGL; así como determinar el efecto inductor de estos fragmentos en los niveles de actividad de enzimas de defensa en frutos de tomate. Se obtuvieron tres fragmentos mediante la degradación de RG I de papa con la enzima RGL. Se determinaron las bandas de absorción asociados a enlaces químicos mediante espectroscopía de infrarrojo con transformada de Fourier (FT-IR), el peso molecular y viscosidad intrínseca por cromatografía de alta resolución de exclusión por tamaño acoplado a un detector de dispersión de luz, el perfil de azúcares neutros por cromatografía de gases y el ácido galacturónico por espectrofotometría (UV-visible). Se aplicaron dos fragmentos de RG I (F-1 y F- 2) a frutos de tomate, se evaluó la actividad enzimática de quitinasa por fluorometría y de glucanasa y peroxidasa por espectrofotometría (UV-visible) a distintos tiempos: 0, 0.5, 1, 6, 24 y 48 horas. Se observaron cambios en los espectros de FT-IR obtenidos de los fragmentos con respecto al de RG I sin fragmentar. El peso molecular promedio del RG I sin fragmentar fue de 53 kDa y la viscosidad intrínseca de 41 mL/g; mientras que los fragmentos presentaron valores más bajos. El contenido de azúcares neutros aumentó y el de ácido galacturónico disminuyó con respecto al RG I sin fragmentar. En los frutos de tomate, los niveles de la actividad de las enzimas quitinasa y peroxidasa incrementaron a la media hora posterior a la aplicación del fragmento F-2, indicando la respuesta inmediata de estas dos enzimas.