Effect of metabolic programming by caloric restriction in the nucleus of the solitary tract of Wistar rats

Submitted by ISABELLA ZACARIN GUIATI null (isabella_zacarin@hotmail.com) on 2018-03-12T12:11:49Z No. of bitstreams: 1 Título - resumo - palavras chave.pdf: 69861 bytes, checksum: 9bb4b906a2940f449514d91567f56bb2 (MD5) Rejected by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: problema 1: o arquivo submetido deve conter a versão completa do trabalho. As alterações para submissão parcial são feitas pela equipe do repositório. Lembrando que o arquivo deve ser único, estar em formato PDF, conter a ficha catalográfica e estar de acordo com as normas de apresentação de trabalhos acadêmicos do seu programa de pós. Assim que tiver efetuado essa correção submeta o arquivo novamente. Agradecemos a compreensão. on 2018-03-14T13:12:31Z (GMT) Submitted by ISABELLA ZACARIN GUIATI null (isabella_zacarin@hotmail.com) on 2018-03-14T17:41:52Z No. of bitstreams: 1 TEXTO DEFESA-versão final.pdf: 7434094 bytes, checksum: 0446a3fa684d251882c1f8a642f39cac (MD5) Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2018-03-14T19:23:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 guiati_iz_me_bot_par.pdf: 384175 bytes, checksum: 71d06b3eda8ac70b7cc4a63abd879e61 (MD5) Made available in DSpace on 2018-03-14T19:23:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 guiati_iz_me_bot_par.pdf: 384175 bytes, checksum: 71d06b3eda8ac70b7cc4a63abd879e61 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O estado nutricional materno durante períodos críticos de desenvolvimento da prole (fetal e neonatal) é considerado um importante indutor de Programação. No sistema nervoso central, as alterações poderiam ocorrer especialmente em áreas importantes para o controle do comportamento alimentar, como o núcleo do trato solitário (NTS) que se desenvolve durante o período embrionário. A sinalização relacionada à saciedade é mediada pelos aferentes primários glutamatérgicos provenientes do estômago e duodeno, imunorreativos ao transportador vesicular de glutamato – tipo 2 (VGLUT2) e modulada por diversos neuropeptídeos como o hormônio concentrador de melanina (MCH) e o transcrito regulado pela cocaína e anfetamina (CART). Assim, nosso objetivo foi comparar a organização citoarquitetônica e a imunorreatividade ao MCH, ao CART e ao VGLUT2 no NTS de ratos cujas mães foram submetidas à restrição calórica durante a gestação e lactação. Para sua execução, foram realizados acasalamentos de ratos adultos da linhagem Wistar para obtenção das proles, as quais foram objeto de estudo. Após a detecção da prenhez, as fêmeas foram separadas para a formação de dois grupos experimentais: grupo controle (GC), dieta normal ad libitum, e grupo restrição calórica (GR), dieta de 50% de restrição em relação ao grupo controle durante os períodos de gestação e lactação. Os filhotes machos, provenientes dos grupos restrição (GR) e controle (GC), foram divididos em quatro subgrupos etários (n=5) de 21, 28, 50 e 90 dias. Foram avaliados: o número de animais de cada prole, peso no dia pós-natal 1, o peso e comprimento naso-anal, ingestão alimentar após o desmame e glicemia. Todos os animais foram fixados por perfusão transcardíaca e o encéfalo e os tecidos adiposos visceral e retroperitoneal foram pesados. Os encéfalos foram processados para detecção imuno-histoquímica no NTS de MCH, CART, VGLUT2 e estudo citoarquitetônico utilizando como marcadores a imunorreatividade à calbindina D-28K, histoquímica para a enzima NADPH diaforase e a coloração pelo método de Nissl. As análises foram realizadas por meio de reconstrução tridimensional e densitometria óptica nos subnúcleos do NTS relacionados a informação de saciedade: medial, gelatinoso e central. Os parâmetros biométricos (peso corporal, distância naso-anal, gorduras visceral e retroperitonial e peso encefálico) apresentaram redução no GR em relação ao GC. O estudo citoarquitetônico identificou 11 subnúcleos com preservação de sua organização. Não houve alteração morfométrica entre GC e GR. A imunorreatividade ao CART no GC demonstrou um padrão durante o desenvolvimento caracterizado por um pico aos 28 dias, seguido por uma queda aos 50 dias e ascensão aos 90, que não foi observado no GR. Para a imunorreatividade ao MCH, a distribuição ao longo do desenvolvimento foi semelhante a encontrada para o CART, com um pico aos 28 dias, queda aos 50 dias e manutenção aos 90 no GC, contudo, no GR o pico de imunorreatividade não acontece, sendo observado um crescimento lento dos 21 aos 50 dias e manutenção aos 90 dias. A imunorreatividade ao VGLUT2 demonstrou um aumento da imunorreatividade aos 28 dias no GC, assim como para o MCH e o CART, não observado no GR. Maternal nutritional status during critical periods of offspring development (fetal and neonatal) is considered an important Programming inductor. In the central nervous system, alterations could occur especially in areas important for food behavior control, such as the nucleus of the solitary tract (NTS) that develops during the embryonic period. Signs related to satiety are mediated by glutamatergic primary afferents from the stomach and duodenum, immunoreactive to the vesicular glutamate transporter type 2 (VGLUT2) and modulated by various neuropeptides such as melanin concentrating hormone (MCH) and the transcript regulated by cocaine and amphetamine (CART). So, our objective was to compare the cytoarchitectonic organization and immunoreactivity to MCH, CART and VGLUT2 in the NTS of rats whose mothers were subjected to caloric restriction during pregnancy and lactation. For their execution, mating of adult Wistar rats was carried out to obtain proles, which were the object of study. After detection of pregnancy, the females were separated to form two experimental groups: control group (CG), normal ad libitum diet, and caloric restriction group (GR), a 50% restriction diet in relation to the control group during pregnancy and lactation periods. The male offspring from the restriction (GR) and control (CG) groups were divided into four age groups (n = 5) of 21, 28, 50 and 90 days. The number of animals from each offspring, postnatal weight 1, weight and naso-anal length, food intake after weaning and blood glucose levels were evaluated. All animals were fixed by transcardiac perfusion and the brain and visceral and retroperitoneal adipose tissues were weighed. The brains were processed for immunohistochemical detection in the NTS of MCH, CART, VGLUT2 and cytoarchitectural study using immunoreactivity to D-28K calbindin, histochemistry for the enzyme NADPH diaphorase and staining by the Nissl method. The analyzes were performed through three - dimensional reconstruction and optical densitometry in the NTS subnuclei related to satiety information: medial, gelatinous and central. The biometric parameters (body weight, naso-anal distance, visceral and retroperitoneal fat and brain weight) showed a reduction in GR in relation to CG. The cytoarchitectonic study identified 11 subnuclei with preservation of their organization. There was no morphometric change between GC and GR. GC immunoreactivity to CART demonstrated a pattern during development characterized by a peak at 28 days, followed by a fall at 50 days and rise at 90, which was not observed in GR. For the immunoreactivity to MCH, the distribution along the development was similar to that found for CART, with a peak at 28 days, drop at 50 days and maintenance at 90 at GC, however, in the GR the immunoreactivity peak does not occur, being observed a slow growth from 21 to 50 days and maintenance at 90 days. Immunoreactivity to VGLUT2 demonstrated an increase in immunoreactivity at 28 days in GC, as well as for MCH and CART, not observed in GR. FAPESP: 2016\13136-6