The influence of the storage time after cleaning in the microbial load of silicone tubing used in assisting surgical patients

Estudo experimental que analisou tubos de silicone oriundos da assistência ao paciente cirúrgico no período transoperatório, escolhidos aleatoriamente. O estudo foi realizado no período de setembro a novembro de 2015 e os tubos foram oriundos do Centro de Material e Esterilização (CME) de um hospital geral de grande porte da região Centro-Oeste do Brasil. Os objetivos foram validar um método para extração e quantificação da carga microbiana em tubos de silicone, determinar a carga microbiana de tubos de silicone imediatamente após a limpeza e em diferentes intervalos de armazenamento e avaliar a presença de biofilme em tubos de silicone. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética sob os protocolos nº 1.277.077 e 1.000.946. Para a validação do método foram utilizados dois tubos de silicone novos esterilizados, tubo 01 e tubo 02 que foram artificialmente contaminados com 106 esporos bacterianos de Geobacillus stearothermophilus e em seguida. Os tubos contaminados foram preenchidos com água estéril e vedados nas extremidades. O tubo 02 foi submetido a cinco minutos de sonicação, já o tubo 01 não passou por este processo. Posteriormente, os lacres foram removidos e a água coletada em seringa de 60 mL e filtradas em membrana Millipore 0,45 µm em dispositivo holder para seringa. As membranas foram incubadas em estufa a 35ºC por 24 horas em placas de petri contendo ágar nutriente. Após o período de incubação, as membranas foram removidas e dispostas em tubos de ensaio contendo 1mL de solução salina que foram submetidas a agitação em vórtex por cinco minutos e submetidos a técnica de alça calibrada para quantificação das colônias. A sonicação demonstrou-se mais eficaz para a recuperação dos micro-organismos. A metodologia validada foi utilizada para os tubos dos grupos experimental (composto por 10 tubos de silicone utilizados na assistência hospitalar após o processo de limpeza), controle negativo (três tubos de silicone novos) e controle positivo (tubos usados na assistência transoperatória com matéria orgânica visível). Os tubos foram segmentados inicialmente em três fragmentos: extremidade 01, 02 e meio e posteriormente foram novamente segmentados conforme intervalos de tempo pré- estabelecidos zero, 12 e 24 horas em condições semelhantes às oferecidas pela instituição, local do estudo. Além dos grupos submetidos a análise microbiológica pelo método descrito, Novos tubos em condições semelhantes ao do grupo experimental foram coletados tubos semelhantes ao grupo experimental para análise por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Dos tubos submetidos a análise pelo MEV, foram formados grupo experimental (três tubos utilizados na assistência hospitalar após o processo de limpeza), grupos controle positivo (tubos utilizados sem limpeza prévia) e negativo (tubos novos). Não houve diferença estatisticamente significativa quando comparados o meio e as extremidades dos tubos de silicone utilizados na assistência hospitalar (p>0,05) nos períodos zero, 12 e 24 horas. Houve aumento da carga microbiana na ordem de uma grandeza na escala logarítmica a cada 12 horas (p 0.05) in zero periods, 12 and 24 hours. There was an increase of microbial load of the order of a magnitude on the logarithmic scale every 12 hours (p