Efeitos da associação da suplementação de óleo de peixe com recursos fisioterapêuticos no processo de cicatrização tegumentar em ratos

Orientador : Prof. Dr. Luiz Claudio Fernandes Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Educação Física. Defesa: Curitiba, 09/07/2015 Inclui referências : f. 202-235 Área de concentração: Exercício e esporte Resumo: Ultrassom terapêutico de alta frequência, microcorrente, terapia combinada e suplementação de óleo de peixe, têm sido investigados como adjuvantes no processo de cicatrização. Entretanto, pouco se sabe sobre a interação dos diferentes recursos fisioterapêuticos com a suplementação de óleo de peixe na cura de feridas, sobre parâmetros imunitários. Objetivo: avaliar o efeito dos diferentes recursos na redução percentual da área da ferida, no tempo de oclusão, na massa corporal, nos parâmetros funcionais de macrófagos (atividade fagocítica, captação de vermelho neutro, produção de ânion superóxido, peróxido de hidrogênio e óxido nítrico), na população linfocitária (T CD4+ e T CD8+) e na concentração plasmática de interleucinas (IL-1?, TNF-?, IL-6 e IL-10). Materiais e Métodos: foram randomizados em 9 grupos 125 ratos Wistar: controle sem lesão (C), lesado (L), lesado tratado com ultrassom (LU), lesado tratado com microcorrente (LM), lesado tratado com terapia combinada (LUM), lesado suplementado com óleo de peixe (LP), lesado suplementado e tratado com ultrassom (LPU), lesado suplementado e tratado com microcorrente (LPM) e lesado suplementado tratado com terapia combinada (LPUM). Vinte e quatro horas após o procedimento de ferida excisional o tratamento foi iniciado e ocorreu diariamente sob anestesia, sendo cada grupo dividido em três diferentes subgrupos (n=5) para aplicação dos recursos fisioterapêuticos em 3, 7 e 14 dias. Controle de massa corporal e fotoplanimetria foram realizados diariamente e, após ortotanásia dos animais, macrófagos da cavidade peritoneal e o plasma foram coletados para análise da população linfocitária e concentração de interleucinas. Resultados: ultrassom estimulou a produção de óxido nítrico e diminuiu a expressão de CD4+, a razão CD4+/CD8+ e a concentração plasmática de IL-1?. Microcorrente e terapia combinada diminuíram a produção de ânion superóxido, óxido nítrico, T CD4+, a razão CD4+/CD8+ e a expressão de IL-1?. Suplementação com óleo de peixe reduziu a área da ferida e permitiu sua oclusão completa no período experimental, associado ao aumento significativo da capacidade fagocítica, da retenção de vermelho neutro e da produção de peróxido de hidrogênio. Além disso, reduziu a expressão de de IL-1?, IL-6, TNF-? e T CD8+, associada com o aumento da razão CD4+/CD8+. Interação da suplementação de óleo de peixe com os diferentes recursos, na maioria das vezes debelou o efeito imunomodulador do óleo de peixe nos parâmetros macrofágicos, mas possibilitou significativamente a oclusão completa da ferida, quando associado à microcorrente e terapia combinada. Conclusões: os diferentes recursos fisioterapêuticos quando aplicados isoladamente modularam a atividade do sistema imunológico, amenizando o ambiente inflamatório excessivo, porém, não foram capazes de reduzir a área da ferida. Diferentemente, suplementação com óleo de peixe aumentou a funcionalidade dos macrófagos e foi capaz de reduzir a área da ferida, permitindo a sua oclusão completa em 14 dias. Mas, a associação dos diferentes recursos fisioterapêuticos com a suplementação de óleo de peixe, apresentou resultados contraditórios. Estes resultados corroboram a hipótese de que os diferentes recursos fisioterapêuticos e a suplementação com óleo de peixe possuem papéis importantes, porém distintos, na modulação do sistema imunitário durante a cicatrização de feridas. Palavras-chave: cicatrização de feridas; terapia por ultrassom; terapia por estimulação elétrica; óleos de peixe; ácidos graxos ômega-3. Abstract: High-frequency ultrasound therapy, microcurrent, combined therapy and fish oil supplementation have been studied as adjuvants in the process of wound healing. Despite this fact, little is known about how different agents of physical therapy interact with fish oil supplementation on wound healing, particularly, on immune parameters. Objective: To assess the effect of different agents in the percentage reduction in wound area, occlusion time, body mass, functional parameters of macrophages (phagocytic activity, neutral red uptake, production of anion superoxide, hydrogen peroxide and nitric oxide) lymphocyte population (CD4+ and CD8+) and plasma concentration of interleukins (IL-1?, TNF-?, IL-6 and IL-10). Materials and Methods: were randomized into 9 groups 125 Wistar rats: uninjured control (C), injured (L), injured treated with ultrasound (LU), injured treated with microcurrent (LM), injured treated with combined therapy (LUM), supplemented injured fish oil (LP), supplemented injured and treated with ultrasound (LPU), supplemented injured and treated with microcurrent (LPM) supplemented injured and treated with combined therapy (LPUM). Twenty four hours after the wound excision procedure, the treatment was introduced using anesthesia and persisted daily. Each group was divided into three different subgroups (n = 5) according to the physical therapy agents 3, 7 and 14 days. Body weight control and photoplanimetry were performed daily, and after the animal's orthotanasia, macrophages from the peritoneal cavity and plasma were collected for analysis of lymphocyte populations and concentration of interleukins. Results: ultrasound therapy stimulated nitric oxide production and decreased CD4+ expression, CD4+/CD8+ ratio and the plasma concentration of IL-1?. Microcurrent and combined therapy decreased the production of anion superoxide, nitric oxide, CD4+, CD4+/CD8+ ratio and IL-1? expression. Supplementation with fish oil reduced the wound area and allowed its complete occlusion in the trial period, also permitted a significant intensification in phagocytic capacity, neutral red retention and hydrogen peroxide production, additionally reduced expression of IL-1?, IL-6, TNF-? and CD8+ associated with increased CD4+/CD8+ ratio. Interaction of fish oil supplementation with different physical therapy agents, most of all times, decresed the immunomodulatory effect of fish oil on macrophage parameters, although allowed the complete occlusion of the wound, when associated with microcurrent and combined therapy. Conclusions: different physical therapy agents when used individually modulated the activity of the immune system, which in turn reduced the excessive inflammatory environment. However, they were not able to reduce the wound area. In contrast, fish oil supplementation increased the functionality of macrophages and was able to reduce the wound area, which allowed its complete closure in 14 days. But the combination of these physical therapy resources with fish oil supplementation showed contradictory results. These results support the hypothesis that different physical therapy agents and supplementation with fish oil have important roles, but distinct, in modulating the immune system during wound healing. Key-words: wound healing; ultrasonic therapy; electric stimulation therapy; fish oils; fatty acids omega-3.