Identificação da dependência do CCR4 para o recrutamento de células dendríticas produtoras de TNF-α e NOS2 mediando a patogênese da síndrome respiratória aguda associada à malária

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A lesão pulmonar aguda (ALI) e a síndrome respiratória aguda associada à malária (MA-ARDS) são complicações que causam sérios danos ao pulmão e frequentemente levam à morte. A MA-ALI/ARDS, objeto deste estudo, está relacionada a uma resposta imunológica do tipo Th1 mediada por linfócitos T produtores de IFN-γ. A fim de estudarmos estas doenças, utilizamos o modelo de camundongos C57BL/6 infectados com a cepa Plasmodium berghei NK65 (PbN) capaz de induzir patologia semelhante a encontrada em humanos. Confirmamos a presença predominante de células T CD4+ e CD8+ que expressam Tbet e produzem IFN-γ. Inesperadamente, verificamos que o dano tecidual no pulmão associado à malária depende de CCR4, receptor de quimiocina principalmente relacionado com o recrutamento de linfócitos Th2 e células T reguladoras. No entanto, em nosso modelo caracterizado pelo perfil inflamatório Th1, CCR4 não está envolvida com a migração de células Th2, mas é requerido para o recrutamento de células dendríticas produtoras de TNF- α e iNOS, denominadas TipDCs, para os pulmões. Todavia, o recrutamento de Tip-DCs e o desenvolvimento da MA-ALI/ARDS não foram afetados em camundongos deficientes em CCR2, normalmente associada com a migração dessas células em outros modelos. Além disso, camundongos deficientes para a produção de óxido nítrico sintase (NOS2) se mostraram resistentes ao desenvolvimento da síndrome pulmonar causada pelo Plasmodium spp.. Sendo assim, NOS2 produzido por Tip-DCs parece ser um fator essencial para o desenvolvimento da MA-ALI/ARDS. Além disso, nossos experimentos demonstram que a produção de IFN-γ, por células T CD8+ nos pulmões é responsável pela indução de células dendríticas provenientes de monócitos produtoras de NOS2 e TNF-α, e o resultado dessa resposta inflamatória que culmina no desenvolvimento da MA-ALI/ARDS é dependente de CCR4. Malaria-associated acute respiratory distress syndrome (MA-ARDS) and acute lung injury (ALI) are complications that cause lung damage and often leads to death. The MA-ALI/ARDS is associated with a Type 1 inflammatory response mediated by T lymphocytes and IFN-γ. Here, we used the Plasmodium berghei NK65 (PbN)-induced MA-ARDS model that resemble human disease and confirmed that lung CD4+ and CD8+ T cells predominantly expressed T-bet and IFN-γ. Surprisingly, we found that development of MA-ARDS was dependent on functional CCR4, which normally mediates recruitment of Th2 lymphocytes and regulatory T cells. In this Type 1 inflammation-ARDS model, we found that CCR4 was not involved in recruitment of T lymphocytes, but required for the emergence of TNF-α/iNOS producing dendritic cells (TipDCs) in the lungs. In contrast, recruitment of Tip-DCs and development of MA-ARDS was unaffected significantly in CCR2-/- mice infected with PbNK65. Importantly, we showed that NOS2-/- mice are resistant to PbNK65-induced lung damage, indicating that nitric oxide produced by TipDCs is an essential component of MA-ARDS pathology. Lastly, our experiments demonstrate that local production of IFN-γ by CD8+ cells in the lungs is responsible for inducing iNOS and TNF-α producing DCs activity in this MA-ARDS model.