Supervivencia de células fibroblásticas humanas en ausencia de suplementación

Introduction. Gingivalfibroblasts(GF)arecells of gingivalconnective tissuethat havetakenpromising relevance in recent years due to their probable use incelltherapy,giventheir multipotencial and self-renewal capabilities. Objective.To knowandto describetheimpactof theabsenceof Fetal Bovine Serum(FBS supplementation on the survival of gingival fibroblasts in cultures. Materialsandmethods.Gingivalfibroblasts were isolated fromgingivaltissue of healthypatients andculturedinDMEM(Dulbecco’sModifiedof Eagle Medium)culture mediain absenceand supplemented with 0.2%FBS at 37 ° C in a humid atmosphere with 5% CO2.A morphological evaluation,survivaland proliferation ofGFwere carried out, aswellas theidentificationby the immunofluorescence technique of cellular cytoskeleton markerssuch asactin and mitochondria.Results. The GFgrownin theabsenceand with supplementation of 0.2%FBSshowed a fusiform shape, with oval nuclei and numerous cytoplasmic extensions during the culture time.A slight increase in theproliferationofGFwasobservedin thosecellsincontactwiththe DMEMmedium +0.2%FBScompared to the medium where the supplementation was absent.Immunostainingof actin and mitochondria showed that theabsenceandsupplementationto 0.2% ofFBSdid not affect its location in theevaluated. Conclusion.Gingival fibroblastssurviveand proliferate in theabsenceofFBS, preserving their cellular morphological characteristics. Introducción. Los fibroblastos gingivales (FGs) son células del tejido conjuntivo gingival que han tomado en los últimos años una relevancia promisoria por su probable utilización en la terapia celular, dadas sus capacidades de multipotencialidad y de autorrenovación. Objetivo. Conocer y describir el impacto de la ausencia en la suplementación de Suero Fetal Bovino (SFB) en la supervivencia de fibroblastos gingivales en cultivos. Materiales y métodos. Fibroblastos gingivales fueron aislados de tejido gingival de pacientes sanos y cultivados en medios de cultivos DMEM (Dulbecco’s Modified of Eagle Medium) en ausencia y suplementados con 0.2% de SFB a 37°C en una atmósfera húmeda con 5% de CO2. Se llevó a cabo una evaluación morfológica, de supervivencia y proliferación de los FGs, así como la identificación mediante la técnica de inmunofluorescencia de marcadores del citoesqueleto celular como la actina y mitocondrias. Resultados. Los FGs cultivados en ausencia y con suplementación de 0.2% de SFB evidenciaron una forma fusiforme, con núcleos ovalados y numerosas prolongaciones citoplasmáticas durante el tiempo de cultivo. Un leve aumento en la proliferación de FGs fue observado en aquellas células en contacto con el medio DMEM+0.2% de SFB comparadas con el medio donde estuvo ausente la suplementación. El inmunomarcaje de la actina y las mitocondrias dejó en evidencia que la ausencia y suplementación a 0.2% de SFB no afectó su localización en los FGs evaluados. Conclusión. Los fibroblastos gingivales sobreviven y proliferan en ausencia de SFB, conservando sus características morfológicas celulares.