UTJECAJ FILTRIRANJA I CENTRIFUGIRANJA RAZRJEĐIVAČA SPERME NA VIJABILNOST OHLAĐENE SPERME BIKA BUFALA

This study was conducted to investigate influence of filtration or centrifugation of TRIS milk diluent on the viability and acrosomal integrity of buffalo spermatozoa preserved under refrigeration condition. Semen ejaculates (n=40) were collected twice weekly using artificial vagina. Each ejaculate was exposed to the following diluents, TRIS (T1 to T4), Milk (M1 to M8), and combinations of TRIS and milk diluents at different ratios (TM1 to TM11). Some parameters as live percentage, viability indicies and acrosomal integrity of spermatozoa was calculated immediately following dilution of semen, then at 3rd, 6th and 9th day of storage at refrigeration temperature (5ºC). Data were statistically analyzed. The results revealed that centrifugation of TRIS diluent once (T3) or twice (T4), before dilution processes, had a beneficial effect on the examined parameters of diluted semen (live percentage, viability indicies and acrosomal integrity of spermatozoa) during the entire period of storage when compared with control TRIS diluent (T1) or filtrated TRIS diluent (T2). However, T3 was the best of all (T1, T2 or T4). Centrifugation of milk-yolk diluent (M3) was found better than any other treatment for the examined milk diluents. Moreover, M3 was the best of all followed by M4 and M6, then followed by the others. Likewise, a combination of T3 and M3 at a ratio of 50:50 (TM6) was, in many aspects, superior to any other combination (TM1 to TM11) or diluents used in this study for dilution and preservation of buffalo semen at refrigeration temperature. It can be concluded that centrifugation of TRIS or milk diluent once before dilution would be the best treatment. Moreover, combination of one part of centrifuged TRIS diluent and one part of centrifuged milk diluents proved to be the proper diluent of choice for dilution and preservation of buffalo semen. It is recommended to use this combination to dilute and freeze buffalo semen for the artificial insemination program.
Cilj ovoga rada bio je istražiti utjecaj filtriranja i centrifugiranja razrjeđivača TRIS i mliječnog razrjeđivača na vijabilnost i akrosomalni integritet sperme bufala čuvane u uvjetima hlađenja. Ejakulati sperme (n=40) sakupljani su dvaput tjedno primjenom umjetne vagine. Svaki ejakulat izložen je sljedećim razrjeđivačima: TRIS (T1 do T4), mlijeko (M1 do M8) i kombinacija razrjeđivača TRIS i mliječnog razrjeđivača (TM1 do TM11). Neki su parametri, kao živi postotak, vijabilnost i akrosomalni integritet sperme, izračunati odmah nakon rezrjeđivanja sperme, zatim 3., 6. i 9. dan čuvanja na temperaturi hlađenja (5°C). Podaci su statistički analizirani. Rezultati su pokazali da centrifugiranje razrjeđivačem TRIS jedanput (T3) ili dvaput (T4) prije procesa razrjeđivanja ima povoljan utjecaj na ispitivane parametre razrjeđivanja sperme (živi postotak, vijabilnost i akrosomalni integritet sperme) u cijelom razdoblju čuvanja, u usporedbi s kontrolnim razrjeđivačem TRIS (T1) ili filtriranim razrjeđivačem (T2). Međutim, T3 je bio najbolji od svih (T1, T2 ili T4). Centrifugiranje razrjeđivača mlijeko-žumanjak (M3) pokazalo se boljim od bilo kojeg tretiranja ispitivanih mliječnih razrjeđivača. Štoviše, M3 je bio najbolji, slijede M4 i M6, a zatim ostali. Isto tako, kombinacija T3 i M3 u omjeru 50:50 (TM6) bila je u mnogo pogleda bolja od bilo koje druge kombinacije (TM1 do TM11) razrjeđivača upotrijebljenih u ovom istraživanju. Može se zaključiti da bi centrifugiranje TRIS ili mliječnim razrjeđivačem jedanput prije razrjeđivanja bio najbolji tretman za očuvanje sperme bufala na temperaturi hlađenja. Osim toga, kombinacija jednog dijela centrifugiranog razrjeđivača TRIS i jednog dijela centrifugiranih mliječnih razrjeđivača pokazala se pravim izborom za razrjeđivanje i očuvanje sperme bufala. Preporuča se upotreba ove kombinacije za razrjeđivanje i zamrzavanje sperme bufala za program umjetne oplodnje.