N003 Caractérisation électrophysiologique de progéniteurs cardiaques issus de cellules souches embryonnaires humaines

Les progeniteurs cardiaques issus de cellules souches embryonnaires humaines apparaissent comme de bons candidates dans la prevention et le traitement de la dysfonction cardiaque par therapie cellulaire. Cependant, la greffe de cellules presentant des proprietes electriques indesirables pourrait predisposer les patients a des arythmies. Il est donc important de caracteriser les proprietes electrophysiologiques des progeniteurs cardiaques avant transplantation. Les cellules progenitrices cardiaques utilisees sont derivees de la lignee HUES-24 et selectionnees sur leur capacite a exprimer SSEA-1 apres une induction de 4 jours par le BMP2. A l’aide de la technique de patch-clamp en configuration cellule entiere, nous avons pu enregistrer des courants Ca2+ et K+, 24 a 48 H apres la selection. Les courants Ca2+ observes (2,22 ± 0.30 Pa/pF) sont de type L, aucun courant de type T n’ayant ete detecte dans ces conditions. Ces courants sont insensibles a l’isoproterenol (1μm) et a la forskoline (30μm) suggerant l’absence de regulation β-adrenergique. Des courants K+ actives par depolarization (6.79 ± 1.10 Pa/pF) sensibles au tetraethylammonium (10 mM) et a la 4-aminopyridine (5 mM) ont ete caracterises. Ces courants rectifiants sortants ressemblent aux courants rectifiants sortants retardes (IKDR) deja decrits sur des cellules souches embryonnaires murines. En revanche, aucun courant entrant active par hyperpolarisation n’a ete observe. Finalement, aucune conductance Na+ n’a pu etre mise en evidence. Sur les cellules n’exprimant pas SSEA-1, utilisees comme controles negatifs, aucun courant Ca2+, K+ ou Na+ n’a ete detecte. Le profil moleculaire des canaux ioniques exprimes par les cellules progenitrices est aborde parallelement par une approche genomique a l’aide de la RT-PCR haut debit. En conclusion, les cellules souches embryonnaires humaines presentent les courants majeurs impliques dans l’electrogenese cardiaque des 24 h apres leur orientation cardiaque. Neanmoins, l’absence de regulation β-adrenergique et de courants Na+ souligne l’immaturite de ces cellules comparees aux cardiomyocytes matures. Le suivi de la genese des proprietes electrophysiologiques de ces progeniteurs cardiaques, dans le contexte d’une therapie cellulaire cardiovasculaire, devrait nous permettre d’explorer la capacite de ces cellules a exprimer un phenotype electrophysiologique mature et a etablir des couplages excitation-contraction avec les cellules hotes