Avaliação in vitro da citotoxicidade do extrato de Croton lechleri Müll. Arg. (Euphorbiaceae) e sua equivalência com compostos quinoléicos e avermectina

As espécies do gênero Croton L., em especial a Croton lechleri Müll. Arg. conhecida popularmente como “sangue de dragão”, são utilizadas para diversos fins terapêuticos pela população brasileira. Ensaios in vitro avaliando a citotoxicidade desta planta em células saudáveis são escassos. Desta forma, este estudo objetivou avaliar a toxicidade celular do extrato etanólico da casca de C. lechleri, e comparar com compostos comercializáveis como compostos quinoléicos e avermectinas. O teste hemolítico foi realizado através da adição do extrato em suspensão de hemácias em soro fisiológico a um hematócrito de 10% de concentrações decrescentes. O ensaio de citotoxicidade foi realizado em células VERO mantidas em meio de cultura RPMI suplementado com soro fetal bovino, onde foram adicionadas 7 concentrações diluídas de 1/2 a partir da solução mãe de 500µg/mL do extrato bruto da C. lechleri e dos fármacos Cloroquina, Hidroxicloroquina e Ivermectina. A hemólise foi analisada através de um UV/VIS, em intervalos de 30, 60 e 120 minutos. A citotoxicidade após 72 horas através do ensaio de redução de resazurina. Os resultados demonstraram que o extrato de C. lechleri em diferentes concentrações e tempos, apresentou baixa ou nenhuma toxicidade nas hemácias. No ensaio de citotoxicidade o extrato apresentou CC₅₀ de 218,9 µg/mL, a CQ, HCQ e IVe de 128,5; 191,6 e 32,9 µg/mL, respectivamente. Conclui-se que o extrato etanólico das cascas de C. lechleri não apresentou hemólise significativa e que o mesmo apresentou uma citotoxicidade moderada frente às células VERO, evidenciando que esse produto natural é potencialmente seguro para uso popular. Species of the genus Croton L., especially Croton lechleri Müll. Arg. popularly known as "dragon blood", are used for various therapeutic purposes by the Brazilian population. In vitro assays evaluating the cytotoxicity of this plant in healthy cells are scarce. Thus, this study aims to evaluate the cellular toxicity of the ethanolic extract of C. lechleri bark, and compare it with commercially available compounds such as quinoleic compounds and avermectins. The hemolytic test was performed by adding the extract in red cells suspension in saline at a hematocrit of 10% with decreasing concentrations. The cytotoxicity assay was performed on VERO cells maintained in RPMI culture medium supplemented with fetal bovine serum, to which 7 concentrations diluted 1/2 from the stock solution of 500 µg/mL of the crude extract of C. lechleri and the drugs Chloroquine, Hydroxychloroquine and Ivermectin. Hemolysis was analyzed using a UV/VIS at intervals of 30, 60 and 120 minutes. Cytotoxicity after 72 hours by resazurin reduction assay. The results showed that the extract of C. lechleri at different concentrations and times, showed low or no toxicity to red blood cells. In the cytotoxicity assay, the extract presented CC₅₀ of 218,9 µg/mL, the CQ, HCQ and IVe of 128,5; 191,6 and 32,9 µg/mL, respectively. It was concluded that the ethanolic extract of C. lechleri bark did not present significant hemolysis and that it presented moderate cytotoxicity against VERO cells, showing that this natural product is potentially safe for popular use. Las especies del género Croton L., especialmente Croton lechleri Müll. Arg. popularmente conocido como "sangre de dragón", son utilizadas con diversos fines terapéuticos por la población brasileña. Los ensayos in vitro que evalúan la citotoxicidad de esta planta en células sanas son escasos. Por lo tanto, este estudio tuvo como objetivo evaluar la toxicidad del extracto etanólico de la corteza de C. lechleri y compararlo con compuestos disponibles comercialmente como compuestos quinoleicos y avermectinas. La prueba hemolítica se realizó agregando el extracto suspendido de glóbulos rojos en solución salina a un hematocrito del 10% con concentraciones decrecientes. El ensayo de citotoxicidad se realizó en células VERO mantenidas en medio de cultivo RPMI suplementado con suero fetal bovino, las que se añadieron 7 concentraciones diluidas las 1/2 de la solución madre de 500µg/mL del extracto crudo de C. lechleri y los fármacos Cloroquina, Hidroxicloroquina e Ivermectina. La hemólisis se analizó utilizando UV/VIS a intervalos de 30, 60 y 120 minutos. Citotoxicidad después de 72 horas por ensayo de reducción de resazurina. Los resultados mostraron que el extracto de C. lechleri a diferentes concentraciones y tiempos, mostró baja o nula toxicidad para glóbulos rojos. En el ensayo de citotoxicidad, el extracto presentó CC₅₀ de 218.9 µg/mL, el CQ, HCQ e IVe de 128,5; 191,6 y 32,9 µg/mL, respectivamente. Se concluyó que el extracto etanólico de corteza de C. lechleri no presentó hemólisis significativa y que presentó citotoxicidad moderada contra células VERO, demostrando que este producto natural es potencialmente seguro para uso popular.