Transient and reversible reduction of stratum corneum filaggrin degradation products after allergen challenge in experimentally mite-sensitised atopic dogs

A defective skin barrier occurs in dogs with atopic dermatitis, and there is controversy over whether this defect pre-exists, or is secondary to allergic inflammation.To study if an allergen challenge decreases the natural moisturising factor (NMF), which contains the main filaggrin degradation products.Four house dust mite (HDM)-sensitised adult atopic dogs from a research colony.Dogs were challenged epicutaneously with HDMs on the right lateral abdomen while the left thorax served as control. We swabbed the skin surface before, and at days (D)1, D2, D3, D7 and D28 after challenge, on both selected sites; swabs were soaked in detergent and frozen until assayed. The NMF components were measured by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC/MS-MS).The allergen challenge induced moderate skin lesions at the application sites, and also mild erythema at the control areas. The allergen provocation led to significant decreases in the total NMF and its components trans-urocanic acid (t-UCA), pyrrolidone carboxylic acid (PCA) and serine on both sites. Lesion scores abated by D7 and the NMF concentrations had re-increased by D28. Skin lesion scores correlated negatively with the total NMF, t-UCA and PCA concentrations.In this experimental model, a single epicutaneous allergen challenge led to a transient and reversible decrease in skin surface NMF and its components, and concentrations were negatively correlated with skin lesion scores. These observations suggest that some of the skin barrier anomalies seen in atopic dogs likely develop secondarily to the underlying cutaneous allergic inflammation.Un défaut de barrière cutanée existe chez le chien atopique et il y a controverse si ce défaut préexiste ou s’il est secondaire à une inflammation allergique.Etudier si une provocation allergénique diminue le NMF (natural moisturising factor) qui contient les principaux produits de dégradation de la filaggrine.Quatre chiens atopiques sensibilisés aux acariens de poussière de maison (HDM) d’une colonie de recherche. MÉTHODES: Les chiens ont été provoqués par test épicutanés avec HDMs sur l’abdomen latéral droit pendant que le thorax gauche servait de contrôle. Nous avons prélevés la surface de la peau avant et après provocation à D1, D2, D3, D7 et D28 sur les deux faces sélectionnées; les écouvillons ont été trempés dans un détergent et congelés jusqu’aux tests. Les composés NMF ont été mesurés par LC/MS-MS (liquid chromatography-tandem mass spectrometry). RÉSULTATS: La provocation allergénique a induit des lésions modérées aux sites d’application, et aussi un érythème modéré aux zones contrôles. Le test de provocation à mené à des diminutions significatives du NMF total et ses composés t-UCA (trans-urocanic acid), PCA (pyrrolidone carboxylic acid) et sérine sur les deux sites. Les scores lésionnels se calmaient à D7 et les concentrations de NMF ré-augmentaient à D28. Les scores de lésions cutanées corrélaient négativement avec les concentrations de NMF total, t-UCA et PCA.Dans ce modèle expérimental, un test allergénique epicutané unique mène à une diminution réversible et transitoire de NMF de la surface cutanée et de ses composés et les concentrations sont négativement corrélées avec les scores de lésion cutanée. Ces observations suggèrent que certaines des anomalies de barrière cutanée observées chez les chiens atopiques pourraient se développer secondairement à l’inflammation cutanée allergique sous jacente.INTRODUCCIÓN: en perros con dermatitis atópica se observa una barrera cutánea defectuosa, y existe controversia sobre si este defecto existe antes o es secundario a la inflamación alérgica. OBJETIVOS: Estudiar si una exposición con alérgenos disminuye el factor de hidratación natural (NMF), que contiene los principales productos de degradación de la filagrina. ANIMALES: cuatro perros adultos atópicos sensibilizados contra los ácaros del polvo doméstico (HDM) de una colonia de investigación. MÉTODOS: los perros fueron expuestos epicutáneamente con HDM en el abdomen lateral derecho mientras que el tórax izquierdo sirvió como control. Limpiamos la superficie de la piel antes y en los días (D) 1, D2, D3, D7 y D28 después de la exposición, en ambos sitios seleccionados; los hisopos se empaparon en detergente y se congelaron hasta su análisis. Los componentes de NMF se midieron mediante cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC/MS-MS). RESULTADOS: la exposición al alérgeno indujo lesiones cutáneas moderadas en los lugares de aplicación y también eritema leve en las áreas de control. La provocación del alérgeno condujo a disminuciones significativas en el NMF total y en sus componentes ácido transurocánico (t-UCA), ácido pirrolidona carboxílico (PCA) y serina en ambos sitios. Las puntuaciones de las lesiones disminuyeron al D7 y las concentraciones de NMF habían vuelto a aumentar en el D28. Las puntuaciones de las lesiones cutáneas se correlacionaron negativamente con las concentraciones totales de NMF, t-UCA y PCA. CONCLUSIONES E IMPORTANCIA CLÍNICA: en este modelo experimental, una sola exposición a alérgeno epicutáneo condujo a una disminución transitoria y reversible en el NMF de la superficie de la piel y sus componentes, y las concentraciones se correlacionaron negativamente con las puntuaciones de las lesiones cutáneas. Estas observaciones sugieren que algunas de las anomalías de la barrera cutánea observadas en perros atópicos probablemente se desarrollen de forma secundaria a la inflamación alérgica cutánea subyacente.Bei Hunden mit atopischer Dermatitis besteht eine defekte Hautbarriere und es besteht eine Kontroverse darüber, ob dieser Defekt wirklich vor-existiert oder ob er sekundär durch die allergische Entzündung verursacht wird.Es sollte untersucht werden, ob eine Provokation mit dem Allergen den natürlichen Feuchthalte-Faktor (NMF), der die hauptsächlichen Abbauprodukte von Filaggrin enthält, reduziert.Vier erwachsene atopische Hunde aus einer Forschungskolonie, die mit Hausstaubmilben (HDM) sensibilisiert worden waren.Die Hunde wurden epikutan mit den HDMs rechts lateral am Abdomen provoziert, während der linke Thorax als Kontrolle diente. Wir entnahmen vorher und an den Tagen (D) 1, D2, D3, D7 und D28 nach der Provokation von beiden ausgewählten Seiten Tupferproben; die Tupfer wurden in Detergens getränkt und bis zur Untersuchung eingefroren. Die NMF Komponenten wurden mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatografie Tandem Massenspektrometrie (LC/MS-MS) gemessen.Die Allergen Provokation induzierte moderate Hautveränderungen an den Applikationsstellen, sowie ein mildes Erythem an den Kontrollstellen. Die Allergen Provokation führte auf beiden Seiten zu signifikanten Abnahmen der totalen NMF und seiner Komponenten Trans-Urocaninsäure (t-UCA), Pyrrolidoncarbonsäure (PCA) und Serin. Die Läsionswerte nahmen mit D7 ab und die NMF Konzentrationen hatten mit D28 wieder zugenommen. Die Werte der Hautläsionen korrelierten negativ mit den Gesamt NMF, t-UCA und PVA Konzentrationen.In diesem experimentellen Modell führt eine einzige epikutane Allergenprovokation zu einer vorübergehenden und reversiblen Zunahme der NMF der Hautoberfläche und seiner Komponenten, die Konzentrationen waren mit den Hautwerten negativ korreliert. Diese Beobachtungen weisen darauf hin, dass einige der Anomalien der Hautbarriere, die bei atopischen Hunden gesehen werden, sich sekundär aufgrund der zugrundeliegenden allergischen Hautentzündung entwickeln.背景: アトピー性皮膚炎の犬では皮膚バリアの欠損が見られるが、この欠損が以前から存在していたのか、あるいはアレルギー性炎症に二次的に生じたものなのかについては議論が分かれている。 目的: 本研究の目的は、アレルゲン負荷が、主なフィラグリン分解産物を含む天然保湿因子 (NMF) を減少させるかどうかを研究することであった。 被験動物: 研究用コロニーのハウスダストマイト (HDM) 感作アトピー成犬4頭。 方法: 犬の右側腹部にHDMを付着させ、左胸部はコントロールとした。負荷前、負荷後1日目、2日目、3日目、7日目、28日目に、選択した両部位の皮膚表面を綿棒で採取し、綿棒は洗剤に浸して測定するまで凍結させた。NMFの成分は、液体クロマトグラフィー・タンデム質量解析法 (LC/MS-MS) で測定した。 結果: アレルゲン負荷は、塗布部位に中程度の皮膚病を誘発し、コントロール部位にも軽度の紅斑が見られた。アレルゲンの誘発により、両部位のNMFおよびその成分であるtrans-urocanic acid (t-UCA)、pyrrolidone carboxylic acid (PCA)、serineが有意に減少した。皮膚病変のスコアはD7までに減少し、NMFの濃度はD28までに再び上昇した。皮膚病変のスコアは、NMF、t-UCAおよびPCAの合計濃度と負の相関があった。 結論と臨床上の重要性: この実験モデルでは、アレルゲンの単回外皮投与により、皮膚表面のNMFとその成分が一過性かつ可逆的に減少し、その濃度は皮膚病変のスコアと負の相関を示した。これらの観察結果は、アトピー犬に見られる皮膚バリアの異常のいくつかは、根底にある皮膚のアレルギー性炎症に続いて発症する可能性が高いことを示唆している。.背景: 特应性皮炎犬的皮肤屏障存在缺陷, 对于该缺陷是预先存在还是继发于过敏性炎症存在争议。 目的: 研究过敏原激发是否会降低含有主要丝聚蛋白降解产物的天然保湿因子(NMF)。 动物: 来自一个研究种群的4只屋尘螨(HDM)致敏的成年特应性犬。 方法: 在犬右侧腹部用HDM进行皮外激发, 同时左胸作为对照。我们在激发前和激发后第(D)1、D2、D3、D7和D28天, 在两个选定部位擦拭皮肤表面; 将拭子浸泡在洗涤剂中并冷冻直至测定。通过液相色谱-串联质谱法(LC/MS-MS)测定NMF组分。 结果: 过敏原激发在用药部位引起中度皮肤病变, 在对照区域也引起轻度红斑。过敏原激发导致两个位点的总NMF及其组分反式尿烷酸(t-UCA)、吡咯烷酮羧酸(PCA)和丝氨酸显著降低。病变评分在D7时减轻, NMF浓度在D28时重新增加。皮肤病变评分与总NMF、t-UCA和PCA浓度呈负相关。 结论和临床重要性: 在该实验模型中, 单次表皮过敏原激发导致皮肤表面NMF及其组分一过性和可逆性降低, 且浓度与皮肤病变评分呈负相关。这些观察结果表明, 在特应性犬中观察到的一些皮肤屏障异常可能继发于潜在的皮肤过敏炎症。.Defeitos de barreira cutânea ocorrem em cães com dermatite atópica, e há controvérsias se esse defeito é pré-existente, ou secundário à inflamação alérgica.Estudar se um desafio alergênico é capaz reduzir o fator hidratante natural (NMF), que contém os principais produtos de degradação de filagrina.Quatro cães atópicos adultos sensibilizados por ácaros da poeira doméstica (HDM) de uma colônia de pesquisa. MÉTODOS: Os cães foram desafiados por via epicutânea com HDMs no abdômen lateral direito, enquanto o tórax esquerdo serviu como controle. Friccionamos a superfície da pele com swabs antes, e nos dias (D) 1, D2, D3, D7 e D28 após o desafio, em ambos os locais selecionados; os swabs permaneceram embebidos em detergente e congelados até serem processados. Os componentes NMF foram medidos por espectrometria de massa de cromatografia líquida-tandem (LC/MS-MS).O desafio alergênico induziu lesões de pele moderada nos locais de aplicação, e também eritema discreto nas áreas de controle. O desafio alergênico levou a diminuições significativas no NMF total e em seus componentes ácido trans-urocânico (t-UCA), ácido carboxílico pirrolidona (PCA) e serina em ambos os locais. Os escores de lesão diminuíram no D7 e as concentrações de NMF aumentaram novamente no D28. Os escores de lesão de pele correlacionaram negativamente com as concentrações de NMF total, t-UCA e PCA. CONCLUSÕES E IMPORTÂNCIA CLÍNICA: Neste modelo experimental, um único desafio de alergênico epicutâneo levou a uma redução transitória e reversível NMF superficial e seus componentes, e as concentrações foram negativamente correlacionadas com as pontuações da lesão da pele. Essas observações sugerem que algumas das anomalias de barreira da pele observadas em cães atópicos provavelmente se desenvolvem secundariamente à inflamação alérgica cutânea subjacente.