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Genotyping of Candida albicans using length fragment and high-resolution melting analyses together with minisequencing of a polymorphic microsatellite locus

Authors :
Dea Garcia-Hermoso
Gaël Lecellier
Odile Cabaret
Françoise Dromer
Martine Olivi
Cécile Farrugia
Stéphane Bretagne
Jean-Marc Costa
Laboratoire CERBA [Saint Ouen l'Aumône]
Groupe Henri Mondor-Albert Chenevier
Assistance publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP) (AP-HP)-Hôpital Henri Mondor-Hôpital Albert Chenevier
Centre National de Référence des Mycoses invasives et antifongiques - Mycologie moléculaire (CNRMA)
Institut Pasteur [Paris]-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Biologie moléculaire et immunologie parasitaires et fongiques (BIPAR)
Laboratoire de santé animale, sites de Maisons-Alfort et de Dozulé
Agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (ANSES)-Agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (ANSES)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-École nationale vétérinaire d'Alfort (ENVA)-Université Paris-Est Créteil Val-de-Marne - Paris 12 (UPEC UP12)
We thank the following principal investigators of the YEASTS Group who provided Candida albicans isolates. C. Bouges-Michel (hôpital Avicenne, Bobigny), I. Poilane (hôpital Jean Verdier, Bondy), J. Dunan (hôpital Ambroise Paré, Boulogne), G. Galeazzi (hôpital Louis Mourier, Colombes), F. Botterel (hôpital Henri Mondor, Créteil), N. Fauchet (Centre Intercommunal, Créteil), E. Forget (hôpital Beaujon, Clichy), C. Lawrence (hôpital Raymond Poincaré, Garches), C. Bonnal, F. Botterel, P. Bouree (hôpital du Kremlin Bicêtre, Kremlin-Bicêtre), O. Eloy (Centre Hospitalier, Le Chesnay), M.-F. David, N. Khassis, L. Milhaila (hôpital Paul Brousse, Villejuif), E. Chachaty (Institut Gustave Roussy, Villejuif), and in Paris: C. Chochillon (hôpital Bichat), A. Paugam, M.-T. Baixench (hôpital Cochin), M. Cornet (Hôtel Dieu), M.-C. Escande (Institut Curie), M.-E. Bougnoux, Y. Sterckers, S. Challier (hôpital Necker), E. Dannaoui, V. Lavarde (hôpital Européen Georges Pompidou), A. Datry, B. Lmimouni, S. Brun, A. Fekkar (hôpital de la Pitié-Salpétrière), J.-L. Poirot (hôpital Saint Antoine), C. Lacroix (hôpital Saint Louis), D. Moissenet (hôpital Trousseau), M. Develoux (hôpital Tenon), S. Bonacorsi (hôpital Robert Debré).
Assistance publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP) (APHP)-Hôpital Henri Mondor-Hôpital Albert Chenevier
Laboratoire de génétique et biologie cellulaire (LGBC)
Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-École pratique des hautes études (EPHE)-Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines (UVSQ)
École nationale vétérinaire - Alfort (ENVA)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Laboratoire de santé animale, sites de Maisons-Alfort et de Dozulé
Agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (ANSES)-Agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (ANSES)-Université Paris-Est Créteil Val-de-Marne - Paris 12 (UPEC UP12)
Institut Pasteur [Paris] (IP)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
École nationale vétérinaire - Alfort (ENVA)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Laboratoire de santé animale, sites de Maisons-Alfort et de Normandie
Source :
Journal of Microbiological Methods, Journal of Microbiological Methods, Elsevier, 2010, 80 (3), pp.306-309. ⟨10.1016/j.mimet.2010.01.002⟩, Journal of Microbiological Methods, 2010, 80 (3), pp.306-309. ⟨10.1016/j.mimet.2010.01.002⟩
Publication Year :
2010
Publisher :
HAL CCSD, 2010.

Abstract

International audience; Microsatellite length polymorphism (MLP) typing is a PCR-based method used for genotyping of the diploid yeast Candida albicans. However, MLP is subject to homoplasia which can hamper the accuracy of the results. We combined fragment length analysis, high-resolution DNA melting (HRM) analysis, and SNaPshot minisequencing after a single amplification of the CDC3 locus to study 95 epidemiologically independent C. albicans isolates. HRM analysis for a given electrophoretic group led to a maximum of three different curves due to the presence of a SNP upstream of the tandem repeat which could be characterized using the SNaPshot assay. The combination of the three methods had a discriminatory index of 0.88 in complete congruence with previous MLP typing (Mantel test R=0.99, P

Details

Language :
English
ISSN :
01677012 and 18728359
Database :
OpenAIRE
Journal :
Journal of Microbiological Methods, Journal of Microbiological Methods, Elsevier, 2010, 80 (3), pp.306-309. ⟨10.1016/j.mimet.2010.01.002⟩, Journal of Microbiological Methods, 2010, 80 (3), pp.306-309. ⟨10.1016/j.mimet.2010.01.002⟩
Accession number :
edsair.doi.dedup.....5dd9b817b0f53ef352d926a4ea75d963