An Efficient Ethanol-Based Analytical Protocol to Quantify Faecal Steroids in Marine Sediments

The majority of the analytical methods for steroids in marine sediments are laborious and time consuming and involve the use of large volumes of organic (frequently chlorinated) solvents. A method has been developed utilising ethanol extraction with a rapid alumina-ethanol elution clean up, providing an environmentally friendly and inexpensive alternative. Recoveries of steroids (coprostanol, epicoprostanol, cholesterol, cholestanol, 5alpha-coprostanone and 5beta-coprostanone) ranged from 70 to 93% and compared favourably with more traditional analyses. Analytical performance was tested through analysis of reference material and concentrations recorded for coprostanol, cholesterol and cholestanol were close to the mean certified values and were within acceptable values. Relative standard deviations from triplicate analyses were small (6-12%). These initial tests also indicate that the simplified clean up (without fractionation) is not subject to interference in the quantification of the selected faecal steroids. A maioria dos métodos para análise de esteróides em sedimentos marinhos é laboriosa, consome grandes volumes de solventes orgânicos (muitas vezes clorados) e produz grandes quantidades de material de descarte. Neste trabalho desenvolveu-se um método de extração com etanol e um "clean up" rápido, que oferece uma alternativa de menor custo e minimiza o uso de solventes clorados. As porcentagens de recuperação de esteróides (coprostanol, epicoprostanol, cholesterol, cholestanol, 5alfa-coprostanona and 5beta-coprostanona) ficaram na faixa de 70 a 93%, comparáveis às análises mais tradicionais. A eficiência do método foi avaliada através de material de referência e os resultados obtidos para coprostanol, colesterol e colestanol encontram-se próximos aos valores médios certificados e perfeitamente dentro dos valores aceitáveis. Os desvios-padrão relativos para triplicatas foram baixos (6-12%). Os testes indicaram que o "clean-up" simplificado (sem fracionamento) não produz interferência na quantificação dos esteróides fecais.