El papel de Nrf2 (Factor relacionado al factor nuclear eritroide 2) en la protección de células de cáncer hepático

El cáncer es una de las enfermedades que anualmente reporta una alta tasa de mortalidad. Se ha reportado que la prevalencia del carcinoma hepatocelular ha incrementando en los últimos años debido a la capacidad de desarrollar mecanismos moleculares de resistencia que generan protección y sobrevivencia en las células de cáncer hepáticas al tratamiento con agentes quimioterapéuticos. Por ello resulta de gran interés estudiar estos mecanismo de resistencia con el fin de analizarlos y aportar información sobre nuevas estrategias terapéuticas. En las líneas celulares hepáticas de hepatoblastoma y cancerosas, HepG2 y Huh7, se analizó el efecto citotóxico del fármaco antineoplásico cisplatino. Los resultados mostraron tolerancia al efecto citotóxico en ambas líneas celulares a concentraciones menores de 30 M de cisplatino durante 24 hs de exposición. Por lo que se decidió utilizar estas concentraciones para analizar a nivel molecular el efecto citoprotectory su relación con el ciclo celular. Dado que ambas líneas celulares mostraron un comportamiento similar, se consideró estudiar el mecanismo en la línea celular HepG2 ya que la línea Huh7 presenta mutaciones en p53. Se analizó por Western blot la expresión de proteínas involucradas en la regulación del ciclo celular de la línea HepG2, se observó un incremento en la expresión de la proteína p21 y una disminución de la proteína cdk2, con las concentraciones de 2.5 y 5 M de cisplatino a 24 hs de exposición, sugiriendo este resultado un efecto citoestático. Posteriormente, se analizó el comportamiento del ciclo celular en la línea HepG2 por medio de citometría de flujo con las concentraciones de 2.5, 5, 10, 15 y 20 M de cisplatino a 48 y 72 hs de exposición. Los resultados mostraron la presencia de arresto del ciclo celular con las concentraciones de 2.5 y 5 M a partir de 48 hs de exposición que se mantuvo hasta las 72 hs, mientras que a concentraciones mayores de 10 M se observó la presencia de muerte celular. Estos datos son acordes con los resultados obtenidos en la proliferación celular. Con el fin de evaluar la respuesta quimirresistente al agente quimioterapéutico cisplatino se analizó la localización celular y la expresión del factor de transcripción Nrf2 y de sus genes blancos los cuales participan en los procesos antioxidantes y destoxificantes generados por agentes citotóxicos. Los resultados mostraron translocación al nucleo de Nrf2 por microscopia confocal, así como un incremento en la expresión de la proteína Nrf2 y de las proteínas NQO1, HO1 y - GCS., además de un incremento en la expresión de los genes transportadores ATP7B, MRP2, MPR3 y CTR1 con las concentraciones de 2.5 y 5 M de cisplatino durante 24 hs de exposición. Estos resultados mostraron que el tratamiento con cisplatino induce proteínas antioxidantes, así como un incremento de moléculas transportadoras que disminuyen la concentración del agente quimioterapéutico ocasionando un efecto quimiorresistente a nivel celular.