Efecto de la suplementación con ciclodextrinas cargadas con colesterol al semen sexado bovino post-descongelación para su uso en producción in vitro de embriones

Los espermatozoides bovinos presentan una bajo relación de colesterol/fosfolípidos en la membrana plasmática. Esta característica es importante ya que el colesterol juega un papel fundamental en el mantenimiento de la estructura y funcionalidad de la membrana espermática tras la congelación, y, por lo tanto, en la supervivencia del espermatozoide tras el proceso de criopreservación. El proceso de sexado podría agravar todavía aún más esta situación. El objetivo de este trabajo es estabilizar las membranas plasmáticas de espermatozoides sexados mediante el agregado de ciclodextrinas cargadas con colesterol (CLC) post-descongelado y consecuentemente, prolongar su funcionalidad, aumentar su capacidad de fecundar ovocitos in vitro y producción de embriones. Para ello se trataron espermatozoides sexados con CLC a diferentes concentraciones e incubados por 15 minutos antes de evaluar el patrón de motilidad mediante un sistema computarizado CASA y fertilizar ovocitos in vitro. Los espermatozoides tratados con 3 mg de metil-β-ciclodextrina saturada de colesterol cada 120x106 espermatozoides presentaron mejor motilidad y vigor y se mantuvieron elevados durante el tiempo analizado. La concentración de 3 mg de CLC también produjo mayor clivaje, MOR/eBL, BL y embriones totales. Bovine sperm have a low cholesterol/phospholipids ratio in the sperm plasma membrane. This characteristic is important due to cholesterol plays a key role in maintaining the structure and function of sperm membrane after freezing, and therefore, increasing sperm survival. This situation could be amplified in case of sexed semen. The aim of this study is to stabilize the plasma membranes of sperm sexed by adding cholesterol-loaded cyclodextrins (CLC) post-thaw and consequently extend their functionality, increase their ability to fertilize oocytes and produce embryos in vitro. Sexed sperm were treated with CLC at different concentrations and incubated for 15 minutes before evaluating different motility parameters by a computerized system (CASA) and fertilize oocytes in vitro. Sperm treated with 3 mg of methyl-β-cyclodextrin saturated cholesterol for each 120x106 of sperm, showed higher motility parameters and remained high during the analyzed period. The concentration of 3 mg of CLC also increased cleavage rate, early (MOR/eBL), late (BL) and total embryo development. EEA Rafaela Fil: Ferre, Luis Bernardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Fil: Grötter, L. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Fresno, C. National Institute of Genomic Medicine (INMEGEN). Computational Genomics Division; México Fil: Cattáneo, Luciano. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina