Les lymphocytes B autoréactifs sont caractérisés par un phénotype mémoire chez les patients atteints de syndrome de Sjögren primitif et de vascularite associée aux ANCA

Introduction Les lymphocytes B (LB) sont au centre des mecanismes des maladies auto-immunes. Ces maladies sont definies par une rupture de la tolerance du soi du systeme immunitaire chez les patients et la production d’auto-anticorps contre des composants de son propre organisme. Des auto-anticorps specifiques sont detectables chez tous les sujets sains. Neanmoins, ceci n’engendre pas le developpement des maladies auto-immunes, on parle d’auto-immunite naturelle. Les auto-antigenes et auto-anticorps ont ete bien decrits dans les maladies auto-immunes, cependant tres peu d’etudes existent sur les caracteristiques des cellules productrices de ces auto-anticorps : les lymphocytes B (LB) auto-reactifs. L’objectif de ce travail est d’etudier ces LB auto-reactifs dans deux maladies auto-immunes differentes : la vascularite associee aux ANCA (VAA) et le Syndrome de Sjogren (SS) comparativement a des sujets sains afin de mieux comprendre leur role dans l’auto-immunite naturelle et l’auto-immunite pathologique. Materiels et methodes Nous avons mis au point une methode de reconnaissance de ces LB auto-reactifs circulants par la specificite de leur recepteur a l’antigene (BCR) envers la proteinase 3 (PR3) et la SSA, les deux auto-antigenes cles des deux MAI. L’etude des marqueurs de surface par cytometrie en flux a permis de definir le stade de maturation des LBs. Nous avons egalement mesure leur capacite a secreter des immunoglobulines de differents isotypes par ELISPOT, et leur reponse a differents stimuli. Une analyse du repertoire des immunoglobulines ainsi que le profil d’expression genique a l’echelle unicellulaire sur des LB auto-reactifs, comparativement chez des sujets sains et des malades, a ete effectue pour mieux comprendre la nature de la diversite residente au sein des LB auto reactifs. Resultats Nos resultats montrent que ces LB auto reactifs representent 1 a 4 % des LB circulants chez les patients et les sujets sains. Chez les patients atteint de Syndrome de Sjogren, nous avons une augmentation de la frequence des LB auto-reactifs pathogenes specifiques de la SSA par rapport a la frequence des LB auto reactifs naturel. Nos resultats montrent que ces cellules se repartissent differemment parmi les sous-populations de LB ainsi ils ont un stade de maturation plus avance par rapport aux sujets sains (5 a 9 % sont des LB memoires producteurs d’IgG). Sur un plan fonctionnel, les LB auto-reactifs naturels sont quant a eux capables de secreter des auto-anticorps d’isotype IgM mais pas IgG. Une analyse transcriptomique chez un sujet sain est en cours, montrant que les LB auto reactifs ont un profil transcriptomique different des lymphocyte B totaux. Discussion Cette etude montre qu’il existe bien des LB auto-reactifs circulants chez les patients et chez les sujets sains. Il semble que chez les patients atteints de MAI, ces cellules auto-reactives sont plus enrichis dans les compartiments des cellules matures par rapport aux sujets sains. Ceci suggere que ces LB specifiques d’auto-antigene echappent aux mecanismes de tolerance peripherique, et sont capable d’entrer dans les centres germinatifs afin de finir leur maturation et se transformer en cellules secretrices d’IgG de forte affinite contrairement au LB auto-reactifs chez les sujets sains ou elles restent bloquer a certain stade de differentiation. Conclusion Une meilleure comprehension de la diversite unicellulaire existante au sein des LB auto reactifs chez les sujets sains et les patients nous permettra de mieux comprendre la physiopathologie des MAI.