Взаимодействие между Daxx и белком E2 вируса папилломы человека (тип 16)

Целью работы стало изучение взаимодействия белка E2 вируса папилломы человека (HPV16) и белка, ассоциированного с доменом смерти (Daxx). Локализацию и колокализацию белка промиелоцитарного лейкоза (PML) и E2 с Daxx в клетках Caski наблюдали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции. Взаимодействие E2 с Daxx анализировали методами коиммунопреципитации и вестерн-блотинга, а также в дрожжевой двугибридной системе. Флуоресцентные сигналы от Daxx и PML главным образом оказались соответственно в цитоплазме и в ядре клеток Caski. На совмещенном снимке по-прежнему были видны оба типа сигнала. В то же время при совмещении красного сигнала от E2 и зеленого сигнала от Daxx они отображаются как желтый в цитоплазме клеток Caski. Дрожжи, трансформированные одновременно плазмидами pGBKT7/Daxx и pGADT7/E2 либо pGADT7/E2 TAD, могут расти на средах SD/-Trp-Leu-His и SD/-Trp-Leu-His-Ade. Таким образом, в клетках Caski белок Daxx не локализуется совместно с PML, но колокализуется с E2 HPV16 – в основном в цитоплазме. Также показано, что E2 HPV16 и его домен активации транскрипции (TAD) могут взаимодействовать с Daxx.