Rôle du complexe d’initiation de la traduction eIF4F dans la résistance aux thérapies ciblant des points de contrôle immunitaire

Introduction Des progres significatifs ont ete realises dans le traitement du melanome avec le developpement d’immunotherapies anti-PD1. Cependant, 40 a 60 % des patients developpent des resistances au traitement. Une meilleure comprehension des mecanismes de regulation de l’axe PD1/PDL1 est donc necessaire pour optimiser les reponses therapeutiques. Le complexe eIF4F regule la traduction de l’ARNm cap-dependant et joue un role essentiel dans la biologie du cancer en controlant selectivement la synthese des proteines impliquees dans la croissance des tumeurs et la resistance aux traitements. Notre objectif etait d’identifier des ARNm dependant d’eIF4F dans un contexte de resistance au traitement par anti-PD1 et d’evaluer la reponse aux traitements anti-PD1 apres inhibition d’eIF4F dans un modele murin. Materiel et methodes Nous avons travaille initialement in vitro, sur des lignees cellulaires de melanome murin nommees BP sensibles aux anti-PD1 et BP-R1, BP-R2, resistantes. Une analyse in silico des 5′UTR des ARNm purifies a ete realisee pour estimer la minimum free energy (MFE) d’une sequence d’ARNm. Nous avons realise une analyse GSEA (Gene Set Expression Analysis), methode permettant de determiner si un sous-groupe de genes est surrepresente dans un dans un large ensemble et peut etre associe avec un phenotype, ici la resistance aux anti-PD1. Pour identifier une signature transrationnelle nous avons realise des RT-qPCR sur nos trois lignees. Pour etudier la traduction nous avons realise des profilages de Polysomes. Pour etudier l’effet de l’inhibition du complexe d’initiation de la traduction, nous avons utilise un inhibiteur d’eIF4A, le silvestrol, sur nos trois lignees. Enfin, nous avons realise une experience, de greffe tumorale chez la souris C57Bl/6 Ola/Hsd. Les souris ont ete traitees de facon quotidienne avec du silvestrol (0,5 mg/kg) ou un vehicule en intra-peritoneal. L’anti-PD1 ou l’isotype controle a ete injecte en intra-peritoneal les jours 5, 7 et 9 (100 μg/souris). Resultats Nous avons identifie un groupe d’ARN messagers dont la traduction est dependante d’eIF4F dans deux lignees cellulaires de melanome resistantes aux anti-PD1. Nous avons valide cette signature transcriptionnelle et nous l’avons correlee a l’augmentation de la traduction de ces ARNm cibles en realisant des profilages de polysome. L’augmentation de la traduction dans les deux lignees resistantes etait partiellement dependante d’eIF4F. Nous avons ensuite confirme in vivo sur des tumeurs murines que l’inhibition d’eIF4F semble augmenter la reponse aux antiPD1. Discussion L’inhibition in vitro d’eIF4F permet une diminution de la traduction de nos ARNm cibles et son inhibition in vivo semble prometteuse dans l’amelioration de la reponse aux anti-PD1 dans nos deux modeles murins.