P222 Expression différentielle de transcrits alternatifs de TCF7L2 dans le foie humain diabétique, et leur induction par l’insuline dans les cellules hépatiques HepG2

Introduction Les etudes de GWAS sur l’heritabilite du DT2 ont montre le role important du gene TCF7L2. Nous avons montre que plusieurs transcrits alternatifs de TCF7L2 avaient des effets distincts sur la proliferation et la secretion d’insuline des cellules-beta pancreatiques. TCF7L2 est aussi implique dans le metabolisme du glucose des cellules hepatiques (Norton 2011, Savic 2011), d’ou l’interet d’analyser l’expression de TCF7L2 transcrits dans le foie. Patients et methodes Nous avons mesure l’ARNm de TCF7L2 par PCR-quantitative exon-specifique (d’apres Prokunina-Olsson 2009) dans des echantillons de tissu hepatique de patients obeses de la cohorte ABOS (33 normoglycemiques et 31 DT2). Dans les cellules HepG2, nous avons etudie l’expression des genes de la gluconeogenese apres diminution d’expression de TCF7L2 par siRNA. Nous avons egalement analyse les transcrits de TCF7L2 dans ces cellules cultivees avec differentes concentrations de glucose et d’insuline. Resultats Notre analyse montre que les transcrits de TCF7L2 contenant le premier site d’initiation de la transcription (TSS1) sont plus exprimes dans le foie des patients diabetiques que chez les sujets normoglycemiques (augmentation 1,3-fois du rapport TSS1/exon 8, P = 0,002). Grâce a la transfection d’ARNi dans les cellules HepG2, nous avons confirme que la transcription de plusieurs genes de la gluconeogenese, dont G6Pase, est reprimee par TCF7L2. Dans les cellules HepG2 en presence de 1 mM glucose, l’expression de toutes les transcrits de TCF7L2 contenant l’exon 8, dont les TSS1-transcrits, est augmentee d’environ 2 fois avec l’insuline (P = 0,03). D’autre part, le rapport TSS1/exon 8 est toujours augmente par l’insuline dans les cellules HepG2 cultivees avec 1 mM, 5 mM ou 11 mM glucose. Conclusion Nous avons demontre que differents transcrits de TCF7L2 sont induits par l’insuline et par un environnement diabetogene dans les hepatocytes. Ceci suggere que ces transcrits alternatifs pourraient jouer un role important dans les anomalies du metabolisme hepatique du glucose dans le DT2.