Synthese und Eigenschaften fluoreszierender Estradiol-Derivate

17β-Estradiol-7α-butansaure (1) wird unter Zusatz von Dicyclohexylcarbodiimid mit Fluoresceinamin zu Estradiol-7α-butansaure-fluoresceinamid (3) gekoppelt. 17β-Estradiol-7α-butylamin (2) reagiert mit Fluorescamin zum entsprechenden Pyrrolinon-Derivat 4 und mit Fluoresceinisothiocyanat zu Estradiol-7α-butyl-fluoresceinylthiocarbamid (5). Fluoreszenzmessungen ergeben, das die Konjugate in Konzentrationen von weniger als 1 nmol/ml noch gut nachweisbar sind. In Kompetitionsversuchen erfolgt eine 50proz. Verdrangung von [3H]-Estradiol vom cytosolischen Estrogenrezeptor in Konzentrationen von 5 × 10−7mol/l durch 3, 1 × 10−6mol/l durch 4 und 1,8 × 10−7mol/l durch 5. Syntheses and Properties of Fluorescent Estradiol Derivatives 5-[4- (3β,17β-Dihydroxyestran-7α-yl) -1-oxobutylamino]-2- (6-hydroxy-3-oxo-3H-xanthen-9-yl) benzoic acid (3) is prepared by linking fluoresceinamine to 4-(3β,17β-dihydroxyestran-7α-yl)butanoic acid (1) with the aid of dicyclohexylcarbodiimide. 7α-(4-aminobutyl)-3β,17β-estradiol (2) reacts with fluorescamine to the pyrrolinone derivative 4, and with fluorescein isothiocyanate to 5-[4-(3β,17β-dihydroxyestran-7α-yl)butylaminothioxomethylamino]-2-(6-hyddroxy-3-oxo-3H-xanthen-9-yl)benzoic acid (5). The conjugate compounds are determined by fluorometry in concentrations below 1 nmol/ml. The binding activity for the cytosol estrogen receptor is analysed by competition against [3H]-estradiol; 50% displacement of [3H]-estradiol is achieved by 3 at a concentration of 5 × 10−7mol/l, by 4 at a concentration of 1 × 10−6mol/l and by 5 at a concentration of 1,8 × 10−7mol/l.