Electro-Blot Immunoassay—A Means for Studying Serological Relationships among Plant Viruses?

The coat proteins of tymo-, tombus-, como-, nepo-, tobamo-, potex-, carla- and potyviruses were subjected to sodium dodecylsulphate (SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis, electro-blotted onto nitrocellular membranes and reacted with homologous and heterologous antisera to intact plant viruses. Immune complexes were detected after reaction with alkaline phosphatase-labelled goat anti-rabbit antibodies. SDS coat proteins of comoviruses reacted only with antisera which were homologous for their intact particles. In all other groups, however, a rather broad range of serological relationships was detected. With a number of viruses, serological relations to other members of the same group were demonstrated for the first time. SDS coat proteins of maclura mosaic virus, a possible potyvirus, and of beet necrotic yellow vein virus, a possible tobamovirus, did not react with antisera to definitive members of the respective groups. Several unexpected reactivities of SDS coat proteins of viruses from one group with antisera to viruses in other groups were, however, also observed. This indicated that electro-blot immunoassay, like other serological methods, cannot be used reliably to assign a virus to a certain group. The SDS coat proteins of several tombusviruses were able to mimic serological reactions by a direct binding of enzymelabelled antibodies which occurred also without serum treatment. Zusammenfassung Electro-blot Immunoassay—eine Methode zum Studium serologischer Verwandtschaften zwischen Pflanzenviren? Nach Elektrophorese in SDS-Polyacrylamidgelen wurden die Hullproteine („SDS”-proteine) von verschiedenen Tymo-, Tombus-, Como-, Nepo-, Tobamo-, Potex-, Carla- und Potyviren elektrophoretisch auf Nitrozellulosemembranen ubertragen und mit Seren behandelt, die gegen intakte Viren hergestellt worden waren. Immunkomplexe wurden durch Ziegen-Anti-Kaninchen-Antikorper nachgewiesen, die mit alkalischer Phosphatase markiert waren. Die „SDS”-proccine der Comoviren reagierten nur mit den fur die intakten Viren homologen Antiseren. In allen anderen Gruppen wurden daruber hinaus auch Reaktionen mit Seren gegen andere Viren der gleichen Gruppe beobachtet. Eine Reihe von entfernten Verwandtschaften zwischen Gliedern einer Gruppe wurden zum ersten Mal festgestellt. Die „SDS”-proteine von Maclura mosaic virus, einem muglichen Potyvirus, und beet necrotic yellow vein virus, einem muglichen Tobamovirus, reagierten nicht mit Seren gegen definitive Viren der entsprechenden Gruppen. Unerwarteterweise reagierten die „SDS”-proteine von mehreren Viren auch mit Seren gegen Viren in anderen Gruppen. Electro-blot Immunoassay kann daher, ebenso wie andere serologische Methoden, nicht zuverlassig zur Bestimmung der Gruppenzugehorigkeit eines Virus benutzt werden. Die „SDS”-proteine einiger Tombusviren tauschten serologische Reaktivitaten durch eine direkte Bindung von enzymmarkierten Antikorpern vor, die auch ohne Serumbehandlung beobachtet wurde.