Techniken und Strategien zur Identifizierung von Mutationen, die zum Hereditary Nonpolyposis Colorectal Cancer Syndrome (HNPCC Syndrom) prädisponieren

Die Diagnose des Hereditary Nonpolyposis Colorectal Cancer Syndrome (HNPCC Syndrom), welches fur etwa 3‖6% aller kolorektalen Karzinome verantwortlich ist, basierte bislang auf der Existenz klinisch-anamnestischer Faktoren (sog. Amsterdamkriterien). Das HNPCC Syndrom zeigt einen autosomal dominanten Vererbungsmodus mit hoher (70 – 85 %) Penetranz und fuhrt unbehandelt zur Ausbildung kolorektaler Karzinome meist vor dem 50. Lebensjahr [1]. Verursacht wird diese Erkrankung durch Keimbahnmutationen in einer Gruppe von bislang funf bekannten DNA Mismatch Repair (MMR) Genen; in etwa 50% der Falle [2] sind die MMR Gene hMSH-2 [3] und hMLH-1 [4] betroffen. In kolorektalen Karzinomen (CRC) nahezu aller Mutationstrager treten Langenanderungen von repetitiven, nichtkodierenden DNA Sequenzen im Vergleich zu den nichtbetroffenen Allelen aus Normalgewebe auf, was als Mikrosatelliteninstabilitat (MIN) bezeichnet wird [5]. MIN tritt bei CRC ohne HNPCC Anamnese signifikant seltener auf (12–15%) [6]. Insbesondere das Zusammentreffen von jungem Erkrankungsalter und dem molekularen Kriterium MIN ist in mehr als 40% der Falle mit Keimbahnmutationen von MMR Genen assoziiert [7]. Ziel der Arbeit war es, zunachst durch Kombination klinischanamnestischer Daten (partielle oder komplette Erfullung der Amsterdamkriterien) und der relativ einfach durchzufuhrenden Mikrosatellitenanalyse ein Screeningverfahren fur diejenigen Patienten zu etablieren, bei denen mit hoher Wahrscheinlichkeit eine Mutation in den genannten MMR Genen vorliegt. Zum gezielten Mutationsnachweis wurde nachfolgend bei diesen Patienten die aufwendigere Sequenzierung der MMR Gene hMSH-2 und hMLH-1 mit zusammen 35 Exons durchgefuhrt.