Analyse de l’insuline humaine et de ses analogues par techniques immunochimiques et LC-HRMS sur sang postmortem : à propos d’un cas de décès impliquant l’asparte

Objectifs Presenter un cas de deces impliquant un analogue de l’insuline et discuter les apports respectifs et limites des analyses immunochimiques et chromatographiques de l’insuline humaine (IH) et de ses analogues. Methode Description du cas Une infirmiere de 47 ans est retrouvee decedee dans un champ. Dans son vehicule, stationne proche du corps, ont ete retrouves differents contenants de medicaments et une seringue d’insuline asparte. La victime n’etait pas diabetique. Les constatations autopsiques ont mis en evidence un foie de choc, une congestion polyviscerale ainsi qu’un point d’injection au dos d’une main. Ce dernier a ete preleve, ainsi que les matrices usuelles en vue d’une expertise toxicologique. Methodes Une toxicologie de reference et une estimation de l’etat glycemique au moment du deces ont ete realisees. Le dosage de l’IH et de ses analogues dans le serum a ete effectue par immunochimie de types ECLIA (ElectroChimiLuminescent ImmunoAssay)(Cobas E411) (LDD = 1.0 mU/L) et IRMA (Cisbio) (LDD = 0.2 mU/L) et par LC-HRMS (phase inverse) apres preparation associant precipitation (ACN/MeOH 50 :50 v/v), filtration et immunopurification par kit iso-insulin (Mercodia) (LDD = 28,8 mU/L). Resultats Le dosage d’ethanol etait negatif dans le sang peripherique (SP). Differentes molecules medicamenteuses psychotropes ont ete retrouvees dans le sang cardiaque (SC) : amitriptyline (52 ng/mL), nortriptyline (83 ng/mL), diazepam (30 ng/mL), nordazepam (53 ng/mL), oxazepam (262 ng/mL), venlafaxine (129 ng/mL) et zopiclone (511 ng/mL). Les parametres glycemiques etaient les suivants : Hemoglobine glyquee (HbA1c) = 5,3 %, glucose et lactates dans l’humeur vitree = 0,38 mmol/L et 9,0 mmol/L respectivement. Dans le SC, le peptide-C a ete dose a 0,047 nmol/L. Le dosage d’insuline etait negatif ( Conclusion Les kits immunochimiques disponibles en clinique presentent des limites qualitatives et quantitatives. Les reactions croisees avec les analogues propres a chaque kit peuvent mener a des resultats tres variables allant d’une quantification erronee jusqu’a la non detection. Au contraire, la spectrometrie de masse permet d’identifier les insulines et donc de realiser un dosage specifique. En revanche, elle necessite des analyseurs de haute performance et une preparation complexe de l’echantillon. Les auteurs preconisent l’analyse par 2 kits presentant des reactivites croisees differentes et par une technique chromatographique couplee a la spectrometrie de masse pour documenter les cas medicolegaux impliquant l’insuline ou ses analogues.