Diagnostic moléculaire « Point-of-care » innovant pour la détection rapide des arbovirus

L’emergence des arboviroses constitue une menace globale de sante publique compte tenu de la diffusion sur tous les continents des vecteurs et des virus associes a ces infections. La dengue, selectionnee comme modele, affecte annuellement plus de 390 millions de personnes dans le monde. Le manque de tests moleculaires rapides et facilement utilisables sur le terrain limite le diagnostic de l’infection et la prise en charge optimale des patients. Dans ce contexte, nous avons developpe une nouvelle approche analytique basee sur l’amplification isotherme des genomes viraux couplee a l’agglutination de nanoparticules magnetiques (NPs). Les genomes des virus Dengue (DENV1/2/3/4) sont amplifies et biotinyles par RT-RPA (Reverse Transcription Recombinase Polymerase Amplification) puis captures entre des NPs greffees par des sondes nucleiques et des NPs fonctionnalisees par des anticorps anti-biotine. L’application de cycles d’aimantation/relaxation permet d’accelerer cette capture et les agregats formes sont detectes en 5 min par une simple mesure d’absorbance evitant le recours a la fluorescence et a des instruments sophistiques. Une sensibilite analytique de 10 TCID50/mL a ete obtenue sur une gamme de reference (CNR Arboviroses). Sur 31 plasmas humains DENV depistes prealablement positifs en RT-qPCR (8 Fig. 1 ).