PO21 - Régulation transcriptionnelle de la glucose-6-phosphatase par le glucose : implication des espèces actives de l’oxygène selon un mécanisme semblable à la régulation génique par l’hypoxie

Introduction Le diabete de type 2 est caracterise par une hyperglycemie chronique, qui engendre la production d’especes actives de l’oxygene (EAOs), generatrices de phenomenes de glucotoxicite. Cette hyperglycemie est associee a une induction paradoxale de l’expression de la sous-unite catalytique de la glucose-6-phosphatase (G6PC), enzyme cle de la neoglucogenese, concourant probablement a la deregulation de la production hepatique de glucose observee chez les diabetiques. Nous avons fait l’hypothese que le glucose regule l’activite transcriptionnelle du gene G6pc via les EAOs. Materiels et methodes La production d’EAOs induite par un traitement de 24 h avec 25 mM de glucose est mesuree dans des hepatocytes primaires de rat et la lignee HepG2. L’activite transcriptionnelle du promoteur G6pc (gene rapporteur) est etudiee dans la lignee HepG2. La liaison de facteurs de transcription au promoteur G6pc de rat est etudiee par immunoprecipitation de chromatine issue d’hepatocytes de rats. Resultats L’induction de l’activite transcriptionnelle du gene G6pc par le glucose est annulee lorsque la quantite d’EAOs est reduite par un traitement antioxydant ou lorsque l’activite transactivatrice du facteur HIF-1alpha (hypoxia inducible factor 1alpha) est annulee par la surexpression de son dominant negatif. Dans les hepatocytes, le glucose induit la stabilisation du facteur HIF-1alpha et sa liaison au promoteur G6pc. La production d’EAOs ou une forte concentration de glucose stimule l’interaction entre HIF-1alpha et le co-facteur CBP (CREB binding protein), permettant a CBP d’etre recrute sur le promoteur G6pc. Cette regulation est mise en evidence dans le foie de souris rendues obeses et diabetiques par un regime hypercalorique. Conclusion Cette etude caracterise le role des EAOs et de HIF-1alpha dans la regulation de l’activite transcriptionnelle du gene G6pc par le glucose. Elle met egalement en evidence un mecanisme graduel de regulation d’HIF-1alpha par le glucose, dependant des EAOs, semblable a celui decrit lors de l’hypoxie.