Diagnostic et identification d'espèce des microsporidies intestinales par PCR (Polymerase Chain Reaction) chez les patients infectés par le VIH

Resume La methode PCR a ete utilisee pour differencier Enterocytozoon bieneusi et Encephalitozoon intestinalis a partir d'echantillons de 27 biopsies duodenales et 39 echantillons de selles de patients infectes par le VIH atteints de microsporidiose intestinale. La technique de reference pour l'identification d'espece etait la microscopie electronique realisee sur les biopsies duodenales. Vingt-trois biopsies duodenales et 61 echantillons de selles de patients infectes par le VIH mais sans microsporidiose intestinale ont ete utilises comme temoins. Le diagnostic de microsporidiose intestinale a ete tout d'abord confirme sur les biopsies duodenales, par une technique PCR utilisant un couple d'amorces universelles. Deux couples d'amorces specifiques ont ete ensuite utilisees pour l'identification d'espece, l'un specifique de E. bieneusi , et l'autre de E. intestinalis . L'amplification d'un fragment de 1 265 paires de base (pb) de la petite sous-unite ribosomale ( ssr ARN) des microsporidies a ete retrouvee pour 22 biopsies duodenales sur 24 (92 %) et 33 selles sur 33 (100 %) infectees par E. bieneusi . Un fragment de 930 pb de la petite sous-unite ribosomale a egalement ete retrouve pour 3 biopsies duodenales sur 3 et 6 selles sur 6 infectees par E. intestinalis . Les 23 biopsies duodenales et 61 selles temoins ont ete respectivement retrouvees negatives avec le couple d'amorces universelles et les deux couples d'amorces specifiques. Ces resultats suggerent que la PCR peut etre utilisee avec succes pour l'identification d'espece des microsporidies a partir de biopsies duodenales mais aussi de prelevements de selles, evitant ainsi le recours aux prelevements biopsiques avec analyse en microscopie electronique