Selective expression of a reporter gene and of an oncogene in neuronal precursor cells, during development of transgenic mice. Cloning and study of a new regulatory gene involved in cellular proliferation and differentiation

Our work aims to contribute to the study of the regulation of gene expression during nervous system development and cell differentiation. In the first part, we obtained transgenic mice carrying an indicator gene and an immortalizing oncogene, associated with a regulatory region of the gene encoding the light protein of neurofilaments (nf-1). The study of the expression of transgenes during development has shown us that they are coexpressed in various structures giving rise to the nervous system. These transgenic mice should allow the study of the molecular mechanisms involved in the regulation of the expression of the nf-1 gene during embryonic development. This system also opens up the prospect of obtaining neuronal cell lines from these different structures, at various stages of development, then of studying ex vivo and in vitro, the transcriptional factors involved in the control of proliferation and differentiation. cellular, with an approach somewhat analogous to the one we used in the second part of our work. In this second part, we are interested in the identification of genes encoding transcription factors, capable of regulating the proliferation and differentiation of nerve cells. Using cell lines obtained previously in the laboratory, we first showed that the expression of genes encoding proteins comprising helix-loop-helix (hlh) motifs, is correlated with the arrest of proliferation and the triggering of differentiation. Then we contributed to the cloning and to the study of the sequence of a cdna that we called npdc-1 (for neural proliferation differentiation control-1). We have shown that it encodes a novel protein with an hlh domain and multiple phosphorylation sites. This protein is expressed specifically in nerve cells and is involved in the control of proliferation and differentiation.; Notre travail a pour objectif de contribuer a l'etude de la regulation de l'expression des genes au cours du developpement du systeme nerveux et de la differenciation cellulaire. Dans une premiere partie, nous avons obtenu des souris transgeniques portant un gene indicateur et un oncogene immortalisant, associes a une region regulatrice du gene codant pour la proteine legere des neurofilaments (nf-l). L'etude de l'expression des transgenes au cours du developpement nous a montre qu'ils sont coexprimes dans diverses structures donnant naissance au systeme nerveux. Ces souris transgeniques devraient permettre l'etude des mecanismes moleculaires intervenant dans la regulation de l'expression du gene nf-l, au cours du developpement embryonnaire. Ce systeme ouvre egalement la perspective d'obtenir des lignees cellulaires neuronales issues de ces differentes structures, a des stades varies du developpement, puis d'etudier ex vivo et in vitro, les facteurs transcriptionnels intervenant dans le controle de la proliferation et de la differenciation cellulaire, avec une approche quelque peu analogue a celle que nous avons utilisee dans la deuxieme partie de notre travail. Dans cette seconde partie, nous nous sommes interesses a l'identification de genes codant pour des facteurs de transcription, susceptibles de reguler la proliferation et la differenciation des cellules nerveuses. A l'aide de lignees cellulaires obtenues precedemment au laboratoire, nous avons d'abord montre que l'expression de genes codant pour des proteines comportant des motifs helice-boucle-helice (hlh), est correlee a l'arret de la proliferation et au declenchement de la differenciation. Puis nous avons contribue au clonage et a l'etude de la sequence d'un cdna que nous avons appele npdc-1 (pour neural proliferation differentiation control-1). Nous avons montre qu'il code pour une nouvelle proteine presentant un domaine hlh et de multiples sites de phosphorylation. Cette proteine est exprimee specifiquement dans les cellules nerveuses et intervient dans le controle de la proliferation et de la differenciation