Embriogénesis somática y regeneración de planta en Quercus bicolor. Importancia de las arabinogalactanoproteinas

Trabajo presentado en la IX Reunión de la Sociedad Española de Cultivo in vitro de Tejidos Vegetales (2011), celebrada en Puerto de la Cruz, Tenerife (España), del 26 al 29 de abril de 2011
En el presente estudio se ha inducido la embriogénesis somática en Quercus bicolor a partir de explantos foliares y de ápices caulinares. Se desarrollaron embriones somáticos mediante el cultivo en medio de inducción consistente en medio basal Murashige & Skoog [MS, 1962] suplementado con 0,5 mg/L de benciladenina [8A] y 4 mg/L de ácido naftalenacético [ANA] durante 8 semanas, transfiriendo los explantos sucesivamente a medios de 3xpresión con concentraciones reducidas de reguladores [4 semanas] y en medio desprovisto de ellos [8 semanEls). Dado el papel que se atribuye a las arabinogalactanoproteínas [AGP] en la inducción embriogénica de diversas especies, se evaluó el efecto de estos compuestos a lo largo del proceso de ES suplementando o no los diferentes medios con AGP de diferente origen [Larix sp. o Acacia sp.] a diversas concentraciones. Los em Jriones se desarrollaron a partir de las 12 semanas de cultivo en los explantos foliares y de las 15 semanas en los ápices. La frecuencia de callo superó el 90% en todos los tratamientos, si bien el porcentaje de emb:~iogénesis fue relativamente bajo. Sin embargo, las líneas de embriones establecidas se mantienen y multiplican fácilmente mediante embriogénesis secundaria. La respuesta embriogénica se incrementó significativamente al 4,5% frente al 0,5% en las hojas en expansión aisladas del primer nudo a partir del ápice en presencia de AGP de Larix. La AGP de Acacia no promovió respuestas embriogénicas, aunque sí incrementó el peso del callo desarrollado . Antes dB germinar los embriones fue necesaria la aplicación de tratamientos de maduración, mediante el cultivo en medios con dosis elevadas de carbohidratos [sorbitol o maltosa durante 4 semanas] y la aplicación de estratificación en frío [4ºC durante 8 semanas). El cultivo en sorbitol incrementó la respuesta de germinación, aunque fue el almacenamiento en frío el que tuvo un efecto significativamente positivo en la conversión en plántula. La utilización de medios basales diferentes, Gresshoff & Doy [GD, 1972] frente a % MS, durante la etapa de germinación no afectó a la frecuencia de conversión en plántula, sin embargo con el medio GD se observó una importante reducción del porcentaje de propágulos con embriogénesis secundaria, lo que representa una ventaja para el desarrollo de la nueva planta .
R. Mallón es investigador postdoctoral contratado del programa JAE-Doc [CSIC). Los autores agradecen a la empresa "Faresta Mantenimiento de Plantaciones" la cesión del material vegetal. Esta investigación ha sido parcialmente financiada por la Xunta de Galicia mediante el proyecto 09MRU002400PR.