Etude de la beta-lactoglobuline bovine : 1) rôle de facteur de croissance dans des milieux de culture des cellules eucaryotes; 2) étude de récepteurs cellulaires a cette protéine; 3) étude immunologique d'epitopes

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Le premier chapitre de notre travail concerne l'activité mitogénique de la beta-lactoglobuline bovine, cette étape est précédée de celle de sa purification. Des tests biologiques ont permis de mettre en évidence l'action mit génique de la BLG sur les hybridomes, le variant A étant significativement plus mitogène que le variant B. Cette activité représente 72% de l'activité mitogénique donnée par 10% de SVF. Pour des cultures à long terme, en systeme continu ou discontinu, il est indispensable de maintenir 1% de SVF en plus de 2,7 g/l de BLG A/B dans le milieu de culture. La prolifération cellulaire est équivalente à celle donnée par le lactosérum (9%) et 1% de SVF représente 75% de celle donnée par 10% de SVF. Dans ces trois milieux, la sécrétion d'anticorps par les hybridomes est identique. Le deuxième chapitre est consacré à la recherche de récepteurs membranaires à la BLG particulièrement sur l'hybridome mark3. L'emploi de la BLG marquée au carbone 14, montre que cette molécule se repartit à la surface des cellules. Des études de liaison de la BLG marquée à l'iode 125 A des récepteurs membranaires en présence ou en absence de BLG froide permettent de calculer un KD de 210##1#0 m. Le récepteur aurait un poids moléculaire apparent de 81 Kda. La dernière partie a trait à la fabrication d'hybridomes souris-souris, secrétant des anticorps monoclonaux anti-BLG, à la purification d'anticorps et à la détermination d'epitopes