Análisis proteómico de la resistencia inducida por micorrización al patógeno foliar Sclerotinia sclerotiorum en frijol (Phaseolus vulgaris l.)

En los últimos años se han reportado diversos estudios sobre la resistencia inducida por micorrización al ataque de patógenos, en éstos se han determinado los cambios de expresión de genes y proteínas que ocurren en las raíces de plantas colonizadas por hongos micorrízicos arbusculares. Recientemente, se han iniciado estudios para entender cómo afecta esta interacción a la parte aérea de la planta. En nuestro grupo de investigación se llevó a cabo el estudio del efecto de la micorrización con Glomus intraradices en la tolerancia al moho blanco causado por Sclerotinia sclerotiorum en tres variedades de frijol. Los resultados obtenidos muestran una resistencia inducida con G. intraradices a S. sclerotiorum en dos de las tres variedades probadas. Para identificar proteínas diferenciales en la parte aérea de variedades de frijol con capacidad contrastante para inducir la tolerancia a patógenos por colonización micorrízica, en el presente trabajo primeramente se evaluaron cuatro diferentes métodos de extracción de proteínas ya reportados para otros tejidos vegetales. La comparación cuantitativa de extractos de proteínas reveló que el método de extracción con ácido tricloroacético-acetona fue el mejor en cuanto a cantidad y calidad de proteínas resueltas en el análisis 2D-SDS-PAGE. Posteriormente, se realizó un análisis proteómico comparativo entre plantas de frijol de las variedades Azufrado Higuera (susceptible a S. sclerotiorum, cuando es colonizada con G. intraradices) y Azufrado Regional 87 (tolerante a S. sclerotiorum, cuando es colonizada con G. intraradices) colonizadas y no colonizadas con el hongo G. intraradices. El análisis del perfil proteico de dos variedades de frijol a estudiar en las diferentes condiciones, mostró un promedio de 200 proteínas en un rango de pH 4-7 y una masa molecular de 10 a 100 kDa. El análisis proteómico (colonizada vs. no colonizada) de la variedad Az. Higuera, reveló cinco proteínas diferenciales, las cuales disminuyeron su expresión en plantas colonizadas. En cambio, la variedad Az. Regional 87 reveló una proteína que sólo se encuentra en la condición colonizada, once aumentan su expresión relativa y dos la disminuyen en cuanto a plantas colonizadas vs. no colonizadas. Los resultados de identificación mediante espectrometría de masas, muestran once proteínas cuya función se conoce, una con función desconocida y dos proteínas no reportadas en tejidos vegetales. Tripsinógeno y transcetolasas fueron reguladas de manera contrastante entre las variedades. La mayoría de las proteínas diferencialmente inducidas están relacionadas a fotosíntesis.