Optimización de protocolos de transformación vegetal para la aplicación de la tecnología Crispr/Cas

La tecnología Crispr/Cas es una técnica novedosa que utiliza unas guías y una proteína (Cas9) para dirigirse a zonas elegidas del ADN y cortar y provocar mutaciones, lo que permite editar secuencias génicas a voluntad. Tiene muchas aplicaciones en la mejora vegetal al permitir modificar cualquier carácter. En muchas especies, se utiliza la técnica de transformación con Agrobacterium tumefaciens para introducir la construcción Crispr/Cas en la célula de la planta. La optimización del protocolo de transformación es clave para la obtención de mutantes, que pueden ser de enorme validez en la mejora de cultivos con importancia económica. El proceso implica varios pasos de cultivo in vitro. El objetivo de este trabajo es: ¿ Evaluar el tejido óptimo para la transformación de las especies modelo Nicotiana benthamiana, Petunia hybrida y Antirrhinum majus ¿ hojas o hipocotilo ¿ Optimizar el protocolo de transformación de hojas e hipocotilos ¿ Optimizar las condiciones in vitro para la generación de callos y tallos ¿ Evaluar genes candidatos posiblemente involucrado en la formación de callos por RT-PCR. Escuela Técnica superior de Ingeniería Agronómica Universidad Politécnica de Cartagena