Production and determination of some kinetic properties of li̇pase produced by Trichoderma citrinoviride

Bu çalışmada topraktan izole edilmiş yeni bir fungal kaynaktan lipaz üretimiamaçlanmıştır. Lipaz kaynağı olarak, Kocaeli, İlimtepe mevkiinden topraktan izoleedilen ve daha sonra 18S rRNA dizi analizi sonucu Trichoderma citrinovirideolduğu saptanan fungus kullanılmıştır. Lipaz üretiminde önem taşıyan üretimortamı koşulları ile reaksiyon ortam parametreleri incelenmiştir. Çeşitli karbon veazot kaynaklarının lipaz aktivitesine etkisi incelenmiş, lipaz üretimi için en uygunkarbon kaynağının glukoz en uygun azot kaynağının ise pepton olduğu tespitedilmiştir. Karbon kaynağı olarak kullanılan yağlardan ise en uygunununzeytinyağı olduğu tespit edilmiştir. Lipaz üretiminde en uygun inkübasyon koşulları,pH 5.5, sıcaklık 30 ve inkübasyon süresi 4 gün olarak saptanmıştır. Reaksiyonortamı koşullarında inkübasyon süresinin 30 dakika, inkübasyon sıcaklığının 40°C ve %1 substrat konsantrasyonunun lipaz üretimi için en uygun koşullar olduğutespit edilmiştir. Şeker fabrikası atığı olan melasın ucuz karbon kaynağı olarakkullanılabileceği gözlenmiştir. Zengin içerikli ortamla kıyaslandığında sadecemelas bulunan ortamdaki lipaz sentezinde düşüş gözlemlense de, maliyetin çokdaha ucuz olması bu olumsuzluğu örtmektedir.Anahtar kelimeler: Lipaz, Tirichoderma citrinoviride, Mikrobiyal lipaz üretimi In this study, the production of lipase is aimed from a new fungal source that wasisolated from soil. Fungi was isolated from soil locality Kocaeli, İlimtepe.Subsequently it was determinated as Trichoderma citrinoviride by the analysis of18S rRNA sequence. This microorganism have been used as a source of lipase.In the production of lipase, culture conditions and media components areinvestigated as important parameters. Various carbon and nitrogen sources areused for lipase activity investigation. For production of lipase glucose was found tobe most suitable carbon source and peptone was found to be most suitablenitrogen source. As a carbon source olive oil was found to be the most suitable oil.pH 5.5, temperature 30 °C and incubation time for 4 days was found to be optimalincubation conditions for lipase production. Incubation time for 30 minutes,incubation temperature 40 °C and 1% of the concentration of substrate were foundto be the most favorable conditions for lipase production in conditions of thereaction medium. It was observed that molasses, which is the waste of sugarfactory, can be used as a cheap source of carbon. Although the lipase synthesisdecreases when compared with that of rich synthetic media, the cost of beingmuch lower, offsets this disadvantage.Key words: Lipase, , Trichoderma citrinoviride, Microbial lipase production. 89