Freezing ram semen with modified diluents

Tez çalışmasında, koç spermasının sulandırma sıvısına FCS (%15) ve farklı mM'lerde sisteamin eklenerek spermanın düşük sıcaklıklarda saklanması ve eritilmesi sonrasında, spermada gözlenen olumlu ya da olumsuz değişiklikler incelendi. Çalışma için 5 baş koçtan elektroejakülatör yardımı ile sperma alındı ve alınan spermalar spermatolojik özellikleri incelenerek her hayvandan eşit hacimde olacak şekilde bir araya getirildi. Sonuç değerlendirmeleri yapıldıktan sonra 6 eşit hacime ayrıldı. Birincisi kontrol grubu olmakla birlikte, ikinci gruba %15 FCS, üçüncü gruba 3 mM sisteamin, dördüncü gruba 3 mM sisteamin + %15 FCS, beşinci gruba 6 mM sisteamin ve altıncı gruba 6 mM sisteamin + %15 FCS olacak şekilde toplamda altı grup oluşturuldu. Sıvı azotla dondurma aşamaları takip edilerek payetlere çekilen sperma örnekleri, ekilibrasyon sonrası ve eritme sonrası aşamalarda; faz-kontrast mikroskobu, CASA (Computer Asisted Semen Analysis-Bilgisayar Destekli Sperma Analiz Sistemi), HOST, Hancock yöntemleri kullanılarak kalite ve morfolojik değerlendirmeye tabi tutuldu. Çalışmada 6 mM sisteamin eklenmiş gruplarda (5 ve 6. gruplar) motilitenin düştüğü ve ölü spermatozoa sayısının arttığı, bunun yanında diğer grupların (kontrol grubu, 2, 3 ve 4.grup) motilite ve morfolojilerinde dikkate değer değişimlerin olmadığı görüldü. Sonuç olarak FCS (%15) ve düşük mM'lerde sisteaminin, koç spermasının dondurulmasında toksik etki yaratmadığı ve sulandırıcılara eklenebileceği görülmüştür.Anahtar Kelimeler: Koç sperması, donma-eritme, antioksidan, sisteamin, FCS. In the thesis study, positive and negative changes in semen were observed after storing spermatozoa at lower temperatures by adding different molarity cysteamine and FCS (15%) in sperm diluents. For the study, semen was taken from 5 rams with the help of electro-ejaculator. Spermatological quality of collected sperm were invastigate after that mixed with pooling system and the results were divided into 6 equal volumes. While the first was the control group, a total of six groups were formed by adding 15% FCS to the second group, 3 mM cysteamine to the third group, 3 mM cysteamine + 15% FCS to the fourth group, 6 mM cysteamine to the fifth group and 6 mM cysteamine + 15% FCS in the sixth group. Samples of semen taken into straws following the steps of freezing with liquid nitrogen, after equilibration and post-melting stages; quality and morphology evaluations were performed using phase-contrast microscopy, CASA (Computer Assisted Semen Analysis), HOST, Hancock methods. In the study, 6 mM cysteamine supplemented groups (groups 5 and 6) decreased motility and increased number of dead spermatozoa, also there were no significant changes in the motility and morphology of the other groups (control group, 2, 3 and 4). As a result, it was observed that cysteamine in low molarities and FCS (15%) did not have toxic effects on freezing of ram semen and these substances could be added to diluents.Key words: Ram sperm, freezing- thawing, antioxidant, cysteamine, FCS. 90