Dijagnostika arbovirusnih infekcija: rezultati Referentnog centra Ministarstva zdravstva za dijagnostiku i praćenje virusnih zoonoza

Arbovirusi čine veliku skupinu s >500 poznatih virusa, od kojih su većina uzročnici zoonoza. Na području Hrvatske, dokazane su kliničke infekcije uzrokovane virusom krpeljnog encefalitisa (TBEV), West Nile (WNV), Usutu (USUV), virusom papataci groznice i Toscana (TOSV) uz serološki dokazanu prisutnost Tahyna (TAHV) i Bhanja virusa (BHAV). Infekcije uzrokovane virusom dengue (DENV), Zika (ZIKV) i chikungunya (CHIKV) se bilježe sporadično u putnika povratnika iz endemskih područja. Za velik broj arbovirusnih infekcija ljudi predstavljaju slučajne krajnje domaćine s kratkotrajnom i niskom viremijom (iznimka su npr. žuta groznica, dengue i chikungunya), zbog čega je izravna dijagnostika često neuspješna. Stoga se u dijagnostici ovih infekcija najčešće primjenjuju serološki postupci. U rutinskoj se dijagnostici koriste imunoenzimni test (EIA ; enzyme immunoassay) i indirektni imunofluorescentni test (IFA ; indirect immunofluorescence assay) kojima je moguće razlikovati pojedine klase protutijela. Imunoblot testovi (western blot, LIA ; line immunoassay) imaju veću specifičnost u odnosu na EIA i IFA test jer dokazuju protutijela na različite virusne antigene. Međutim, pojedine skupine virusa kao npr. alfavirusi ili flavivirusi često pokazuju križne reakcije, posebice između virusa koji pripadaju istoj seroskupini te je u tim slučajevima reaktivne rezultate potrebno potvrditi dokazom neutralizacijskih protutijela (test neutralizacije virusa ; VNT, neutralizacijski test redukcije plakova ; PRNT). Rijetko su moguće križne reakcije i u VNT testu, no u tim je slučajevima homologni titar obično znatno viši od heterolognog. Kao dodatni test za potvrdu akutne/nedavne primarne infekcije koristi se određivanje aviditeta IgG protutijela. Ovaj se test pokazao korisnim u dijagnostici flavivirusnih infekcija za razlikovanje akutne/nedavne infekcije u bolesnika s dugom perzistencijom IgM protutijela, te križno-reaktivnim IgM protutijelima (dengue, West Nile infekcije, krpeljni encefalitis). U Referentnom centru Ministarstva zdravstva za dijagnostiku i praćenje virusnih zoonoza pri Hrvatskom zavodu za javno zdravstvo rutinski se provodi molekularna i serološka dijagnostika arbovirusnih infekcija (tablica 1). U suradnji s Veterinarskim fakultetom Sveučilišta u Zagrebu i Hrvatskim veterinarskim institutom, VNT je uveden u dijagnostiku flavivirusa (TBEV, WNV, USUV). Po potrebi, uzorci se šalju na potvrdno testiranje u OIE Referentni centar za West Nile virus, Istituto Zooprofilattico Sperimentale "G. Caporale", Teramo, Italija.