Proteases from Penaeus monodon Fabricius, 1798 (Decapoda, Penaeidae): partial characterization and localization.

This study aimed to characterize and determine the distribution of proteases in various anatomical parts of Penaeus monodon using mainly electrophoresis on sodium dodecyl sulfate (SDS) polyacrylamide gels impregnated with casein (casein-SDS-PAGE) and specific protease inhibitors. Twelve caseinolytic bands designated A-L, with estimated molecular masses of 11.4-49.6 kDa were detected by SDS-PAGE, and were most abundant in the hepatopancreas. Among the 12 bands, E, J, K and L were predominant, A, G and H were identified as chymotrypsin-like proteases, D, E, I, J, K and L were identified as trypsin-like proteases, and B, C and F were identified as serine proteases. The proteases were most active at 50°C and pH 7.0. The proteolytic and trypsin-like activities of Penaeus monodon were most abundant in hepatopancreas extracts and least abundant in extracts from the haemolymph. Trypsin-like proteases in the hepatopancreas extract were found to activate prophenoloxidase (proPO) to form phenoloxidase (PO). Résumé: Cette étude vise à caractériser et à déterminer la distribution des protéases dans diverses parties anatomiques de Penaeus monodon , en utilisant principalement la technique de l'électrophorèse en gel de polyacrylamide contenant du dodécylsulfate de sodium (SDS) imprégné de caséine (casein SDS-PAGE) et des inhibiteurs spécifiques de protéase. La technique de l'électrophorèse SDS-PAGE révèle l'existence de douze bandes d'activité caséinolytique, désignées A-L et de poids moléculaire variant de 11,4 à 49,6 KDa. Ces bandes sont les plus abondantes dans l'hépatopancréas. Sur les douze bandes révélées, quatre ont été trouvées prédominantes à savoir E, J, K et L. Les bandes A, G et H ont été identifiées comme des protéases de type chymotrypsine, les bandes D, E, I, J, K et L comme des protéases de type trypsine et les bandes B, C et F des comme des protéases à sérine. La meilleure activité protéasique a été observée à 50°C et à pH 7,0. Les activités protéolytiques et celles de type trypsine de Penaeus monodon ont été trouvées plus abondantes dans l'hépatopancréas et moins abondantes dans l'hémolymphe. La formation de la phénoloxydase (PO), dans l'hépatopancréas, est due à l'activation de la prophénoloxydase (proPO) par des protéases de type trypsine. [ABSTRACT FROM AUTHOR]