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Saffron (Crocus sativus L.), renowned as the world’s most expensive spice extracted from its stigmas, is an autumn-flowering, sterile triploid geophyte species (2n=3x=24) belonging to the Iridaceae family. It is propagated vegetatively through the development of daughter corms from the mother corm. Low multiplication rates of daughter corms under natural conditions and many biotic and abiotic stresses reduce productivity, thereby restraining the availability of planting material. Thus, the main objective of this work is to improve the vegetative propagation of saffron through tissue culture. The results show that soaking of explants in 0.1% (w/v) mercury chloride (HgCl2) for 10 min is more effective for explant disinfection (95%), with a survival rate of over 85%. Whereas, for the initiation phase, the in vitro culture of whole corms on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.5 mg /L of 1-naphthalene acetic acid (NAA) in combination with 3 mg/L of 6-benzylaminopurine (BAP) was more effective, resulting in a sprouting rate of 90% with a maximum of 5 sprouted buds per explant. As for the multiplication phase, the highest number of shoots (4 shoots/single shoot explant) was observed on MS medium supplemented with 8 mg/L of BAP in combination with 0.5 mg/L of NAA. The results of this study can serve as a starting point for establishing an efficient and reproducible in vitro regeneration system in order to increase the number of shoots per explant for proliferation and micro-corms formation phases by exploring other culture media with different PGR combinations.

Najda cv. is an important date palm cultivar due to its high fruit quality and resistance to bayoud, a disease that killed million plants of date palm. The in vitro propagation of cv. Najda through organogenesis is hampered by some physiological disorders, namely hyperhydricity, tissue browning and precocious rooting. In order to achieve efficient and large-scale propagation of true-to-type plantlets of cv. Najda, we evaluated the effect of different cytokinin types and concentrations (6-benzylaminopurine (BAP), 6-(dimethylallylamino) purine (2iP) and thidiazuron (TDZ), at 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 or 0.5 mg/L), as well as that of medium texture (semi-solid and liquid) on adventitious shoot bud multiplication, hyperhydricity, tissue browning and precocious rooting. The optimal culture conditions for shoot bud proliferation and subsequent development were observed on semi-solid half-strength Murashige and Skoog (MS/2) medium supplemented with 0.5 mg/L 1-naphthaleneacetic acid (NAA) and 0.4 mg/L BAP, where an average of 23.8 shoot buds per explant, low rate of hyperhydricity (22.5%), moderate tissue browning (55.0%) and low percentage of precocious rooting (20.0%) were observed. Shoot elongation and rooting were performed on semi-solid and liquid plant growth regulator (PGR)-free MS/2 medium. Shoots were then transferred to the glasshouse, where the survival rate reached 95 %. The findings of the present study will be highly beneficial to rehabilitate the Moroccan palm groves infested by bayoud.

Organogenesis is the in vitro regeneration technique used in Morocco for rapid and large-scale propagation of date palm. Unfortunately, this technique is hampered by tissue browning, a physiological disorder that decreases the proliferation capacity of shoot buds and affects the quality of the multiplied plants, and by endophytic bacteria, which are introduced in vitro even if explants are well disinfected. In order to solve these problems, the effects of different concentrations of the methanolic extracts from six Opuntia species were evaluated during shoot bud multiplication of date palm cv. Mejhoul. Organogenic cultures of date palm cv. Mejhoul were cultured for 4 months on semi-solid and half-strength Murashige and Skoog (MS/2) medium, supplemented with plant growth regulators (PGRs) and different concentrations (1, 5 or 10 ml/l) of the methanolic extracts from cladodes of Opuntia megacantha, O. ficus indica, O. robusta, O. aequatorialis, O. leucotricha and O. inermis. Our results showed that, regardless of the cactus pear species used, the concentration of 10 ml/l of the methanolic extract is not suitable for shoot bud multiplication since it results in considerable phytotoxicity. The optimal concentration for shoot bud multiplication was 1 ml/l of the extracts of O. ficus indica, which showed the highest number of shoot buds per explant (14.2), 5% tissue browning and the elimination of endophytic bacteria. The use of the methanolic extracts from cactus pear petals also resulted in bacterium elimination. However, it did not improve the multiplication rate. After the multiplication phase, shoot buds were transferred to the elongation-rooting medium then to glasshouse where a high survival rate of 80% was observed.

Bouskri cv. est l’une des variétés du palmier dattier (Phoenix dactylifera L.) les plus appréciées par le consommateur marocain. Cependant, cette variété est très sensible à la maladie du bayoud. Afin de la préserver, le développement d'un schéma de propagation rapide est primordial. La présente étude permet d’évaluer l'effet de plusieurs facteurs sur l'organogenèse du cv. Bouskri. Des souches bourgeonnantes ont été cultivées sur le milieu de Murashige et Skoog (MS), le milieu Woody Plant Medium (WPM) et le milieu de Nitsch et Nitsch (NNM) pendant 3 mois. Par la suite, l’effet de différentes combinaisons hormonales ainsi que celui de l’état physique du milieu ont été évalués. Les résultats ont montré que l'utilisation du milieu de base MS a produit le nombre le plus élevé de bourgeons adventifs par souche (13.1). Les régulateurs de croissance ont également affecté de manière significative la multiplication des bourgeons. En effet, le taux de multiplication le plus élevé (17.4) a été observé sur le milieu additionné de 0.9 μM de l’acide 2-naphthoxyacetique (NOA), 1.1 μM de l’acide indole-3-acetique (IAA), 1.9 μM du 6-(dimethylallylamino) purine (2iP) et 1.8 μM de kinétine, tandis que les autres combinaisons hormonales ont donné des taux de multiplication allant de 13.1 à 16.2 bourgeons par souche. L'utilisation des milieux liquides n'a pas amélioré la multiplication des bourgeons, mais elle a entraîné une vitrification accentuée (75-90%). L'élongation et l'enracinement des bourgeons ont été effectués sur le milieu MS dépourvu d’hormones et, après le transfert des plantules sous serre, le taux de survie observé était de 90% après 3 mois. Le protocole développé dans la présente étude sera utilisé pour la multiplication rapide et la conservation de la variété Bouskri.

The Bayoud disease, caused by the fungus Fusarium oxysporum f. sp. albedinis, is a very dangerous date palm disease that killed millions of plants during the last century and threatens the best Moroccan cultivars, including cv. Bouskri. In order to fight Bayoud and to preserve the best date palm cultivars, rapid and large-scale propagation through organogenesis followed by planting regenerants in Bayoud-free areas is being in use in Morocco. In the present work, the effects of medium strength, carbon source and antioxidants were investigated in order to develop an efficient regeneration system through organogenesis for cv. Bouskri. Four different strengths of Murashige and Skoog medium were evaluated: full-strength (MS), half-strength (MS/2), one-third strength (MS/3) and one-quarter strength (MS/4). In addition, different concentrations of sucrose, commercial granulated sugar (10, 30 or 50 g/l), polyvinylpyrrolidone (PVP) and activated charcoal (1, 2 and 3 g/l) were tested. It was found that the optimal medium strength for the multiplication of adventitious shoot buds of cv. Bouskri is MS/2, while the use of 30 g/l sucrose and 2 g/l activated charcoal improved the proliferation rate. In fact, under these culture conditions, the average number of shoot buds per explant was 23.3, and the percentages of tissue browning, hyperhydricity and precocious rooting were 25.0, 30.0 and 25.0 %, respectively. On the other hand, the average number of precociously formed roots per organogenic culture was 0.9. Shoot growth and development were carried out on plant growth regulator (PGR)-free MS/2 medium and resulted in an average shoot length of 13.9 cm, an average root number of 4.1 and an average root length of 3.2 cm. After transferring the plants to the glasshouse, the survival rate observed was 95%.

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Impatiens hawkeri is among the three important bedding plants in the world. There is no efficient protocol for fast micropropagation of Impatiens hawkeri cv. Sweeties Blue Star. Single nodes were germinated on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1-naphthaleneacetic acid (NAA; 0.00, 0.10 and 0.50 mg l-1), 6-benzyladenine (BA; 0.00, 0.10, 0.50 and 1.00 mg l-1) and kinetin (KIN; 0.00, 0.10, 0.50 and 1.00 mg l-1). The shoot length was highest in medium containing 0.10 mg l-1 NAA and control. The largest number of shoots (14.06 and 14.00 per explant) was produced in media supplemented with 1.00 mg l-1 BA, 0.50 mg l-1 NAA and 1.00 mg l-1 BA, 0.10 mg l-1 NAA, respectively. The 0.10 mg l-1 NAA along with 1.00 mg l-1 BA was found to be superior for production of leaf (57.13). Maximum root length (33.80 mm) and root number (29.13) were obtained on medium supplemented with 0.10 mg l-1 NAA without BA and KIN. Plantlets were transplanted to pots filled with perlite and peat moss (in ratio of 1:1) and transferred to the greenhouse for acclimatization. Regenerated plantlets were morphologically identical with mother plants. Upon ex vitro transfer, 100% of plants survived. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

In vitro culture techniques are recognized as efficient strategies for large-scale plant production, as well as providing alternatives for plant conservation. In this study the micropropagation of Tarenaya rosea was established using petiole and foliar blade segments cultivated on MS medium with 6-benzyladenine (BA) and/ or 6-furfurylaminopurine (KIN). The regeneration rate from explants was evaluated after 30-days in culture, as well as the proliferation rate from explant-derived shoots, reached after four subcultures performed at 30-days in culture. In vitro propagation occurred by both direct (DO) and indirect (IO) organogenesis. The highest regeneration rates by DO (50% to 100%) were reached on media containing only BA, while morphogenic calluses (IO) were mainly formed with BA+KIN. Explants on media with BA showed the presence of small black nodules on their surface, and histological analysis revealed the presence of trichomes with anthocyanin content. Elongation and rooting were reached on growth regulator-free MS. Acclimatization rates around 80% were achieved and the in vitro-regenerated plants were successfully maintained under field conditions. Results show significant morphogenetic potential of T. rosea from leaf explants, mainly when cultivated in the presence of 4.4 µM BA, providing a new alternative source of plant material for biotechnological and in vitro conservation studies. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Este trabalho objetivou avaliar o efeito de fitorreguladores na calogênese e rizogênese em discos foliares de Eugenia involucrata. Foram testadas, em dois experimentos, combinações de ácido naftalenoacético (ANA) e 6-benzilaminopurina (BAP) e de 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e BAP. Aos 45 dias de cultivo todos os tratamentos formaram calos, principalmente naqueles em que foram empregados ANA isolado e, também, combinado com BAP, bem como 2,4-D e BAP (5:5 e 10:10 µM). Apenas ANA isolado (10 µM) induziu rizogênese. Aos 90 dias de cultivo pôde-se perceber melhor o efeito dos fitorreguladores, observando-se que 2,4-D e BAP (5:5 e 10:10 µM) favoreceram a calogênese, enquanto para rizogênese o melhor tratamento foi com 10 µM de ANA. É possível mediar processos de desdiferenciação e rediferenciação celular a partir de discos foliares de Eugenia involucrata.

The objective of this work was to study the in vitro regeneration of tomato 'Alambra' F1 using explants apices, nodal segments, hypocotyls and cotyledons. The explants were inoculated in test tubes on MS medium setting and recultivate twice to the same media type and then to recultivate and regeneration induction medium containing MS medium supplemented with 1 mg L-1 kinetin. The experiment was a completely randomized design with four treatments and eight repetitions. After 30 days, the evaluations were conducted and buds with 1.5 cm from the apical segment and nodal explants were separately transferred to MS medium added with 1.0 mg L-1 NAA for rooting, where they stayed, too, for 30 days. The use of explants apical segments, via direct organogenesis, presents better responses for morphogenic regeneration in the formation of tomato seedlings 'Alambra' F1. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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Objective: To evaluate and reconstruct three-dimensional images of vascularization along the fallopian tube (FT), as well as to determine its relationship with the ovary and ovarian fimbria, and to quantify the blood vessels along the FT according to its anatomical segments, using confocal microtomography (micro-CT). Materials and Methods: Nine specimens (six FTs and three FTs with ovaries) were fixed in a solution of 10% formalin for > 24 h at room temperature. Iodine staining was performed by soaking the specimens in 10% Lugol's solution for 24 h. All specimens were evaluated using micro-CT. A morphometric analysis was performed on the reconstructed images to quantify the vascular distribution along the FT. Results: In the FTs evaluated, the density of blood vessels was significantly greater in the fimbrial segments than in the isthmic segments (p < 0.05). The ovarian fimbria was clearly identified, demonstrating the important relationship between these vessels and the FT fimbriae. Conclusion: We believe that the vascularization in the fimbriae is greater than and disproportional that in the other segments of FT, and that the ovarian fimbria plays an important role in the development of that difference. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Este trabalho objetivou avaliar o efeito de fitorreguladores na calogênese e rizogênese em discos foliares de Eugenia involucrata. Foram testadas, em dois experimentos, combinações de ácido naftalenoacético (ANA) e 6-benzilaminopurina (BAP) e de 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e BAP. Aos 45 dias de cultivo todos os tratamentos formaram calos, principalmente naqueles em que foram empregados ANA isolado e, também, combinado com BAP, bem como 2,4-D e BAP (5:5 e 10:10 µM). Apenas ANA isolado (10 µM) induziu rizogênese. Aos 90 dias de cultivo pôde-se perceber melhor o efeito dos fitorreguladores, observando-se que 2,4-D e BAP (5:5 e 10:10 µM) favoreceram a calogênese, enquanto para rizogênese o melhor tratamento foi com 10 μM de ANA. É possível mediar processos de desdiferenciação e rediferenciação celular a partir de discos foliares de Eugenia involucrata. This study evaluated the effect of growth regulators on callogenesis and rhizogenesis in Eugenia involucrata. In two experiments, we tested the naphthaleneacetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BAP), and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and BAP associations. After 45 days of culture, all treatments formed calli, however, those treatments with NAA (alone or combined with BAP) and 2,4-D combined with BAP (5:5 and 10:10 µM) presented the best results. Only the use of NAA at 10 µM induced rhizogenesis. At 90 days of culture, the effect of phytoregulators was most evident, where 2,4-D combined with BAP (5:5 and 10:10 µM) were more favorable for callogenesis while 10 μM NAA were more favorable for rhizogenesis. These results indicate that cell dedifferentiation and re-differentiation processes are achievable from leaf explants of Eugenia involucrata. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Purpose of this study was to investigate the effect of different photosynthetic photon flux density (PPFD) conditions using LED lamps on culture of shoot explants derived from in vitro shoots of Fragaria x ananassa cv. Festival. To examine the combined effect of 55% red LED, 15% far red LED, 10% blue LED, 15% green LED and 5% warm light LED light on in vitro growth of plantlets, fresh and dry plant biomass, plant height, leaf area, number of shoot, shoot length, number of root and percentage of rooting and various growth of micro-propagated plants were assessed under four light intensities (25, 50, 75 and 100 μmol m−2 s−1 PPFD; TRT2, TRT3, TRT4, TRT5, respectively). Un-rooted strawberry shoots were cultured in the "Culture Pack"-rockwool system with MS medium under CO2-enriched condition. The best response for regeneration of shoots and root induction was observed for shoot explants obtained on MS supplemented with BAP 1 mg/l and NAA 0.5 mg/l at TRT3 (50 μmol m−2 s−1 PPFD). Chlorophyll and net photosynthesis were optimal in plants grown under TRT4 (75 μmol m−2 s−1 PPFD). Stomatal resistance and Fv/Fm values were highest at low light irradiance (TRT2). The highest efficiency and high frequency of shoot formation occurred after 30 days. Elongation of shoot buds was obtained at TRT4 (75 μmol m−2 s−1 PPFD) and TRT5 (100 μmol m−2 s−1 PPFD) on the same MS medium. Regenerated shoots rooted best on the same medium of elongation. Irradiance at 75 μmol m−2 s−1 PPFD was suitable for the acclimatization of strawberry plants. We concluded that the present protocol can be efficiently used for mass propagation of the strawberry. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

ABSTRACT Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae), an economically important forest tree species, is prized for its timber and fruits, and is also an important ornamental plant. This study aimed to evaluate the effect of Thidiazuron (TDZ) and α-Naphthaleneacetic acetic acid (NAA) on in vitro multiplication of nodal segments of E. involucrata. We tested the effect of the absence and presence of NAA (0.5 µM), combined with TDZ at concentrations of 0, 2, 4, 8, 16, or 32 µM, on the in vitro multiplication of E. involucrata. The use of TDZ combined with NAA (0.5 µM) favored the formation of shoots and buds in the explants, especially at 32 µM TDZ concentration. Intermediate concentrations of TDZ also promoted shoot formation but induced hyperhydricity in the explants. It is possible to induce organogenesis leading to the multiplication of E. involucrata nodal segments using TDZ, preferably combined with NAA.

A sacaca é uma planta medicinal do bioma Amazônico e tem sido considerada como substituta do pau-rosa (Aniba roseodora) na produção de linalol. Este trabalho objetivou avaliar a propagação vegetativa in vitro de sacaca, incluindo o estabelecimento de propágulos do campo, protocolos de descontaminação e a determinação de taxas de multiplicação, além de descrever aspectos limitantes da cultura durante os trabalhos in vitro. Foram utilizadas microestacas de 1,0 cm, com uma gema axilar, coletadas de plantas adultas do campo. Tratamentos de desinfestação foram testados no estabelecimento, além de se avaliar a influência do mês do ano da coleta sobre as taxas de contaminação. Após desinfestadas, as microestacas foram inoculadas em tubos de ensaio com meio MS, suplementado com BAP (0, 1, 2 e 3 mg L-1) e AG3 (0 e 0,5 mg L-1). Foi obtido o estabelecimento in vitro da sacaca com 41,9% das microestacas brotadas. A taxa de contaminação alcançou 58,1% (65,4% de origem fúngica e 34,6% de origem bacteriana), com maior ocorrência quando os propágulos foram coletados entre os meses de outubro e janeiro, os mais chuvosos da região amazônica. O aumento nas concentrações de BAP e AG3 no meio de cultura melhorou as taxas de multiplicação do material. Apesar dos resultados obtidos, a espécie apresenta uma série de peculiaridades e limitações ao cultivo in vitro que foram identificadas e relatadas neste trabalho.

Epistemology in psychopathology has evolved and consisted into currents, supported by more or less specific notions and engaging different approaches, according to three theoretical principles. These three principles are: the etiological principle, the clinical principle and the holistic principle, that, by combining their different criteria, would result in quite various psychopathological currents. Among these currents there are: biological psychiatry, characterology, psychoanalysis, clinical psychology, family psychoanalysis, systemic family therapy, clinical family characterology, cultural psychopathology and contextual psychopathology. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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O jacarandá-da-bahia (Dalbergia nigra Vellozo) é uma espécie nativa da Mata Atlântica que está ameaçada de extinção na tentativa de conservar a espécie, a micropropagação surge como uma das soluções para este problema por ser de baixo custo e produzir plântulas com um período curto de tempo. Dessa forma, o objetivo deste projeto foi avaliar as condições mais favoráveis à indução de brotos in vitro, possibilitando o uso de técnicas de micropropagação por ser uma das etapas deste processo. Para indução dos brotos foi utilizado o meio MS e testado dois tipos de explante (segmento apical e segmento nodal) e três concentrações de TDZ (0, 5 e 20 μM). Com os resultados de número de brotos por explante, após 30 dias de inoculação, observamos que não houve interação significativa entre os explantes e as concentrações de TDZ. A diferença significativa foi encontrada apenas entre os explantes, sendo o nodal (2.26) apresentando maior número de brotos que o apical (1.16). Pode-se concluir então que as concentrações de TDZ não influenciaram no número de brotos e que o segmento nodal é o mais indicado para o processo de micropropagação.

Annonaceae is an ancient family of plants including approximately 50 genera growing worldwide in a quite restricted area with specific agroclimatic requirements. Only few species of this family has been cultivated and exploited commercially and most of them belonging to the genus Annona such as A. muricata, A. squamosa, the hybrid A. cherimola x A. squamosa and specially Annona cherimola: the cherimoya, commercially cultivated in Spain, Chile, California, Florida, México, Australia, Ecuador, Peru, Brazil, New Zealand and several countries in South and Central America. The cherimoya shows a high degree of heterozygosis, and to obtain homogeneous and productive orchards it is necessary to avoid the propagation by seeds of this species. Additionally, the traditional methods of vegetative propagation were inefficient and inadequate, due to the low morphogenetic potential of this species, and the low rooting rate. The in vitro tissue culture methods of micropropagation can be applied successfully to cherimoya and other Annona sp to overcome these problems. Most of the protocols of micropropagation and regeneration were developed using the cultivar Fino de Jete, which is the major cultivar in Spain. First it is developed the method to micropropagate the juvenile material of cherimoya (ENCINA et al., 1994), and later it was optimized a protocol to micropropagate adult cherimoya genotypes selected by outstanding agronomical traits (PADILLA and ENCINA, 2004) and further it was improved the process through micrografting (PADILLA and ENCINA, 2011).At the present time we are involved in inducing and obtaining new elite genotypes, as part of a breeding program for the cherimoya and other Annonas, using and optimizing different methodologies in vitro: a) Adventitious organogenesis and regeneration from cellular cultures (ENCINA, 2004), b) Ploidy manipulation of the cherimoya, to obtain haploid, tetraploid and triploid plants (seedless), c) Genetic transformation, for the genes introduction to control the postharvest processes and the genes introduction to provide resistance to pathogen and insects and d) Micropropagation and regeneration of other wild Annona or related Annonaceae species such as: Annona senegalensis, A. scleroderma, A. montana, A. reticulata, A. glabra, A. diversifolia and Rollinia sp.

O presente trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes formas de inoculação, no meio nutritivo, de explantes foliares de Eugenia involucrata DC., uma espécie florestal nativa com diversas potencialidades econômicas. Foram avaliadas as posições abaxial, adaxial, com e sem cortes no limbo foliar. Foi utilizado o meio de cultura MS acrescido de 10 µM de ANA isolado ou das combinações, em µM, de 2,4-D e BAP: 5-5 e 5-10. A posição dos explantes afeta a calogênese e a organogênese em segmentos foliares de E. involucrata, sendo mais adequada a abaxial sem cortes na região do limbo. A associação dos reguladores de crescimento 2,4-D + BAP na concentração de 5-10 µM foi mais promissora para a obtenção de calos, especialmente os nodulares, putativos à embriogênese somática.

A organogênese é uma técnica pouco estudada na micropropagação de erva-mate. Este trabalho objetivou avaliar diferentes meios de cultura na calogênese in vitro e organogênese de Ilex paraguariensis St. Hil. Foram coletadas folhas em plantas em casa-de-vegetação. Segmentos foliares foram colocados em meios de cultura ¼ MS, WPM ou JADS, contendo zeatina e 2,4-D. O meio MS foi mais eficiente na indução de calos. No meio WPM foi observada rizogênese. Nos meios testados não houve formação de brotações adventícias.

Umburana-de-cheiro é uma espécie nativa da Caatinga, amplamente utilizada pela população local, devido o valor madeireiro, ornamental, forrageiro e, principalmente medicinal. Considerando o significativo risco de extinção e a inexistência de estudos relacionados ao cultivo e propagação, objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo para micropropagação de Amburana cearensis. Para isso, avaliou-se a influência do regulador vegetal 6-benzilaminopurina (BAP) em cinco concentrações (0,0; 2,22; 4,44; 8,88 e 17,76µM) sobre a multiplicação in vitro de diferentes explantes (segmento nodal, ápice caulinar e segmento cotiledonar) e na etapa de enraizamento testou-se diferentes concentrações de ácido indol butírico (AIB) (0,0; 2,5; 5,0 e 10,0µM) na presença e ausência de 1,0g L-1 de carvão ativado. Maior número de brotos (2,36) foi obtido na presença de 4,44µM de BAP, a partir do segmento cotiledonar e maior porcentagem de enraizamento (92,0%) ocorreu na presença de 10,0µM de AIB na ausência de carvão ativado. Não existiram dificuldades para o estabelecimento do protocolo de micropropagação de A. cearensis.Umburana de cheiro is a species native to the Caatinga, widely used by local people, because the value of timber, ornamental, forage and especially medicinal. Considering the significant risk of extinction and the ausence of studies related to the cultive and propagation, the aim of this work was to establish a protocol for micropropagation Amburana cearensis. For this, we evaluated the influence of plant growth regulator BAP at five different concentrations (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.76mM) on the in vitro multiplication of different explants (nodal segments, apex cotyledon and stem segment) and the rooting stage we tested different concentrations of IBA (0.0, 2.5, 5.0 and 10.0mM) in the presence and absence of 1.0g L-1 of activated charcoal. Highest number of shoots (2.36) was obtained in 4.44mM of BAP from cotyledonary segment and higher rooting percentage (92.0%) ocurred in 10.0mM of IBA in the absence of activated charcoal. There were no difficulties to the establishment of micropropagation protocol A. cearensis.

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.

O objetivo deste trabalho foi otimizar o cultivo e desenvolvimento de embriões, bem como avaliar a indução da micropropagação do pinhão-manso (Jatropha curcas) in vitro. Na primeira etapa, foi avaliada a influência da sacarose (concentrações 0, 15, 30 e 60 g L-1) no desenvolvimento de embriões em meio basal MS. Das plântulas geradas no cultivo de embriões, foram excisadas microestacas e colocadas em meio MS suplementado com os reguladores vegetais 6-benziladenina (BA), 6-benzilaminopurina (BAP), cinetina (6-furfuriladenina) (KIN) e ácido 4-(3-indolil) butírico (AIB), nas concentrações 0,5, 1,0, 2,0 e 3,0 mg L-1. Os resultados evidenciaram que a faixa de 15 a 30 g L-1 de suplementação exógena da sacarose promove o melhor alongamento da parte aérea das plantas; a rizogênese, contudo, é mais vigorosa na faixa de 30 a 60 g L-1, em que ocorre aumento significativo do número de raízes. Na fase de micropropagação, o BAP à concentração de 2,0 mg L-1 induz maior número de brotações, enquanto a KIN (1,0 e 2,0 mg L-1) promove maior número de folhas. Ocorre calogênese na base das brotações, mais significativa na suplementação com 2,0 mg L-1 de 6-BAP. A melhor concentração de sacarose, quanto ao vigor vegetal e rapidez na obtenção de explantes, é de 30 g L-1. Na micropropagação, os melhores resultados da organogênese direta de brotações ocorrem à concentração de 2,0 mg L-1 de BAP.

It is possible to determine the optimum time for permanence of vegetative propagules (mini-cuttings) inside a greenhouse for rooting, and this value can be used to optimize the structure of the nursery. The aim of this study was to determine the dynamics of adventitious rooting in mini-cuttings of three clones of Eucalyptus benthamii x Eucalyptus dunnii. Sprouts of H12, H19 and H20 clones were collected from mini-stumps that were planted in gutters containing sand and grown in a semi-hydroponic system. The basal region of the mini-cuttings was immersed in 2,000 mg L-1 indole-3-butyric acid (IBA) solution for 10 seconds. The rooting percentage of the mini-cuttings, the total length of the root system and the rooting rate per mini-cutting were also evaluated at 0 (time of planting), 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49 and 56 days. We used logistic and exponential regression to mathematically model the speed of rhizogenesis. The rooting percentage was best represented as a logistic model, and the total length of the root system was best represented as an exponential model. The clones had different speeds of adventitious rooting. The optimum time for permanence of the mini-cuttings inside the greenhouse for rooting was between 35 and 42 days, and varied depending on the genetic material.O tempo ideal de permanência de propágulos vegetativos (miniestacas) no interior da casa de vegetação para a rizogênese é possível de ser determinado matematicamente, o que pode otimizar as instalações do viveiro. O objetivo deste estudo foi determinar a dinâmica de enraizamento de miniestacas de três clones de Eucalyptus benthamii x Eucalyptus dunnii. Brotações dos clones H19, H12 e H20 foram coletadas de minicepas plantadas em canaletão com areia e cultivadas sob sistema semi-hidropônico. A região basal da miniestaca foi imersa em solução de 2.000 mg L-1 de ácido indolbutírico (AIB) por 10 segundos. A porcentagem de enraizamento de miniestacas, o comprimento total de raízes e a taxa de enraizamento por miniestaca foram avaliados a cada sete dias (0 - instante da estaquia, 14, 21, 28, 35, 42, 49 e 56 dias). Foram utilizadas as regressões logística e exponencial para a modelagem matemática da velocidade dos processos rizogênicos. O modelo logístico teve o melhor ajuste para o percentual de enraizamento, e o modelo exponencial para o comprimento total do sistema radicular. Os clones apresentaram diferentes velocidades de enraizamento. O tempo ideal de permanência das miniestacas dentro da casa de vegetação para o enraizamento está entre 35 a 42 dias, podendo variar em função do material genético.

Foram comparados os efeitos de diferentes dietas e da transição alimentar sobre o desempenho zootécnico e a morfologia do trato digestório de larvas de pacu alimentadas com duas dietas comerciais e uma dieta experimental microencapsulada produzida por gelificação interna. Larvas com quatro dias de vida receberam os seguintes protocolos alimentares: somente náuplios de artêmia em quantidades crescentes (controle positivo); larvas mantidas em jejum (controle negativo); três tipos de alimento formulado durante todo o experimento (dieta experimental microencapsulada, dieta comercial NRD1.2/2.0, Inve, USA, e dieta Poli-Peixe 450F, PoliNutri, Brasil); e três protocolos de transição alimentar com náuplios de artêmia durante os seis primeiros dias, seis dias de coalimentação, e somente as respectivas dietas formuladas após esse período. O experimento foi conduzido por 23 dias em delineamento inteiramente casualizado, com avaliações periódicas do crescimento e do sistema digestório. A taxa de sobrevivência foi determinada ao final do experimento. Os melhores desempenhos de crescimento e sobrevivência, assim como mais acelerada organogênese do sistema digestório, foram verificados entre os animais que receberam alimento vivo. As larvas que passaram pela transição alimentar apresentaram médias intermediárias de crescimento e sobrevivência e não diferiram entre si. Entre os grupos que receberam apenas dieta inerte, somente naquele alimentado com a dieta nacional houve sobrevivência até o final do experimento. Nenhuma das dietas formuladas é adequada para uso como alimento exclusivo para larvas de pacu. Na fase de transição alimentar, a dieta experimental microencapsulada proporciona resultados de sobrevivência e crescimento semelhantes aos obtidos com dietas comerciais.The effects of different diets and dietary transition on the performance and morphology of the digestive tract of pacu larvae fed two commercial formulated diets and an experimental microencapsulated diet produced by internal gelation were evaluated. Four-day old pacu larvae received the following treatments: only artemia nauplii in increasing amount during the experiment (positive control); larvae maintained at fasting (negative control); three types of formulated diets throughout the experiment (experimental microencapsulated diet, commercial diet NRD1.2/2.0, Inve, USA, and diet Poli-Peixe 450F, PoliNutri, Brazil); and three weaning protocols in which artemia nauplii were given from the 1st to 6th days, six days of co-feeding (artemia nauplii + the respective formulated diet), and only respective diets formulated after this period. The experiment was conducted for 23 days in a completely randomized design, with periodical evaluations of growth and digestive system. Survival rate was determined at the end of the experiment.The best performances of growth and survival, as well as the organogenesis of the digestive tract, were verified for the animals which received live feed. The larvae at weaning treatments induced intermediate growth and survival, which did not differ statistically between them. Considering the treatments that received only formulated diets as first feed, the PoliNutri diet was the unique that showed alive larvae at the end of experiment. None of the formulated diets are adequate as initial exogenous food for pacu larvae. During the weaning, the microencapsulated experimental diet provides growth and survival performances similar to those obtained with the commercial diets.

Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis is an herbaceous plant with significant economic value in the ornamental dry flower business. The restricted occurrence of the municipality Mucugê-BA, Brazil, exclusively associated with extractive exploitation, has considered this species as endangered. The objective of this work was to evaluate the organogenic potential of three different types of S. mucugensis subsp. mucugensis explants to promote the development of an alternative method to the propagation of the genetic resources of this important plant. The morphogenetic capacities of the leaf, stem and root this species was tested using Murashige and Skoog culture medium at half salt concentration and different concentrations of growth of regulators benzylaminopurine - BAP (0.00; 2.22 and 4.44 µM), and naphthalene acetic acid - NAA (0.00; 1.34 and 2.68 µM). The morphoanatomic events that lead to formation of shoots were described. Stems proved to be the best source of explants, showing 58.75% regeneration of shoot by direct organogenesis in the absence of growth regulators, and 32.18 and 47.55% of shoot regeneration by indirect organogenesis in the presence of 2.22 and 4.44 µM BAP, respectively. As for leaves, there was callus formation, but without regenerating shoots. Morphogenesis was not observed when roots were used as explants. The histological analyses showed that shoot regeneration in S. mucugensis subsp. mucugensis occurred both indirectly, by unorganized tissue differentiation, and directly through returning to merismatic activity in differentiated mature cells and preexisting bud proliferation.Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis é uma herbácea com grande potencial de utilização no comércio de flores secas ornamentais. A ocorrência restrita ao município de Mucugê-BA, Brasil, associado à exploração extrativista tem levado essa espécie ao risco de extinção. Neste estudo, objetivou-se avaliar o potencial organogênico de três diferentes tipos de explantes de S. mucugensis subsp. mucugensis visando ao desenvolvimento de um método alternativo para a sua propagação. A capacidade morfogênica de caule, folha e raiz foi testada utilizando o meio de cultura Murashige e Skoog com metade da concentração salina e diferentes concentrações dos reguladores de crescimento benzilaminopurina - BAP (0,00; 2,22 e 4,44 µM) e ácido naftaleno acético - ANA (0,00; 1,34 e 2,68 µM). Os eventos morfoanatômicos que levaram a formação dos brotos foram descritos. O caule demonstrou ser a melhor fonte de explante, apresentando 58,75% de regeneração de brotos via organogênese direta, em meio livre de regulador de crescimento; e 32,18 e 47,55% de regeneração de brotos por organogênese indireta na presença de 2,22 e 4,44 µM de BAP, respectivamente. Para folha, foi obtida a formação de calos sem regeneração de brotos, não sendo observada morfogênese, quando se utilizou raiz como explante. As análises histológicas mostraram que a regeneração de brotos em S. mucugensis subsp. mucugensis ocorreu tanto por via indireta, pela diferenciação do tecido calogênico desorganizado, quanto por via direta pela retomada da atividade meristemática em células maduras diferenciadas e proliferação de gemas pré existentes.

The first step in plant transformation using somatic embryogenesis ororganogenesis for plant regeneration in vitro has been the identification of genotypes with the best totipotency. Thus, the objective of this experiment was to evaluate the totipotency of ten cultivars and one soybean line from the Coodetec Gene Bank. The somatic embryos developed from immature cotyledons measuring from 4 to 6 mm in length, and the organogenesis was evaluated from mature soybean seeds. The cultivars CD 201, CD 216 and CD 220 were the most promising genotypes to produce somatic embryos, whereas the cultivar CD 217 had the highest quantity of differentiated explants, which represents the best regeneration efficiency for participating in organogenic systems. In the experiment with somatic embryogenesis, time to plant regeneration was ten months, but the plants were regenerated after only four months in the experiment with organogenesis.A identificação de genótipos que possuam maior totipotência quandosubmetidos à embriogênese somática e organogênese é a primeira etapa para a condução de um programa de transformação genética. Este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial de embriogênese somática e organogênese em nove cultivares de soja e uma linhagem, do banco de germoplasma da Coodetec. Cotilédones imaturos de soja com 4 a 6 mm de comprimento foram utilizados para produção de embriões somáticos, induzidos com 2,4-D, e sementes maduras de soja foram usadas para avaliação do potencial organogênico. As cultivares CD 201, CD 216 e CD 220 mostram-se promissoras para produção de embriões somáticos, enquanto que para o sistema organogênico a cultivar CD 217 apresentou a maior quantidade de explantes diferenciados e manteve a maior eficiência de regeneração. Para obtenção de uma planta via embriogênese somática foram necessários 10 meses, em virtude do período necessário para obtenção dos explantes. O sistema organogênico se mostrou mais rápido, e plantas completas de soja foram obtidas em quatro meses de cultivo in vitro.

A shoot regeneration system for Plectranthus neochilus was studied from leaf explants. Leaves developed under in vitro conditions were cultured on Wood Plant Medium supplemented with 0.2mg dm-3 α-naphthaleneacetic acid (NAA) and different 6-benzilaminopurine (BAP) or thidiazuron (TDZ) concentrations (0, 1.5, 3.0, 4.5 and 6.0mg dm-3). An increase in percentage of responsive explants (85.3%) and in the number of shoots developed per explant (3.2) was observed when the explants were treated with 5.3 and 4.7mg dm-3 BAP, respectively. The leaf explants cultured on media supplemented with TDZ became vitreous and did not form buds. The regeneration system used is efficient for boldo bud induction and shoot development, showing high potential for advanced cellular and molecular studies.O objetivo do presente trabalho foi adequar um protocolo de regeneração a partir de explantes foliares de Plectranthus neochilus. Folhas desenvolvidas sob condições in vitro foram cultivadas em meio WPM suplementado com 0,2mg L-1 de ácido α-naftaleno acético (ANA) e diferentes concentrações (0; 1,5; 3,0; 4,5 e 6,0mg L-1) de 6-benzilaminopurina (BAP) ou thidiazuron (TDZ). Observou-se o aumento na percentagem de explantes regenerantes (85,3%) e no número de brotações por explante (3,2), quando os explantes foliares foram cultivados em meio contendo 5,3 e 4,7mg L-1 de BAP, respectivamente. Os explantes foliares cultivados em TDZ tornaram-se vítreos e não formaram gemas. O protocolo utilizado é eficiente para a indução de gemas e brotações, demonstrando a potencialidade de seu uso para estudos mais avançados de biologia celular e molecular.

A exploração de árvores tropicais realizada de forma indiscriminada, buscando espécies de alto valor econômico, tem levado várias espécies, como o mogno (Swietenia macrophylla King), ao perigo de extinção. O desenvolvimento de uma metodologia de regeneração de gemas, direta ou indireta, poderia auxiliar na obtenção de um grande número de mudas e constituir uma perspectiva à propagação sexuada. Essa última é limitada pelo fato das sementes perderem rapidamente a capacidade germinativa. No presente trabalho, foram utilizados dois tipos de explantes: fragmentos foliares e de raízes de plantas cultivadas in vitro. Após desinfestação, os explantes foram colocados em meio de cultura de Murashige e Skoog (1962) contendo três quartos da concentração de sais, vitaminas do mesmo meio, 30g.L-1 de sacarose, auxina (ácido naftaleno-acético, ANA, 0,11 µM e 0,54 µM), citocinina (cinetina, CIN, 1,2 µM, 2,3 µM, 4,7 µM e 9,3 µM; 6-benziladenina, BA, 2,2 µM, 4,4 µM e 8,8 µM ou 2-isopenteniladenina, 2-iP, 2,5 µM) e 7g.L-1 de ágar. As variáveis testadas foram a concentração e o tipo de regulador de crescimento e a origem dos explantes. A cada 30 dias, os explantes foram avaliados pela contagem do número de explantes formando calos ou raízes e a consistência dos calos. Foram obtidos calos a com base nos dois tipos de explantes. Nos explantes foliares, 90% deles formaram calos em meios de cultura contendo BA 4,4 µM com ANA 0,54 µM e BA 8,9 µM com ANA 0,11 ou 0,54 µM. Nos explantes de raízes, a maior percentagem de explantes com calos foi de 55%, no meio de cultura com BA 2,2 µM e ANA 0,54 µM. Raízes adventícias foram obtidas partindo de calos e do limbo dos explantes foliares, em meios de cultura com CIN e ANA. Não foi observada a formação de gemas adventícias.

The objective of this study was to evaluate the effects of 6-benzylaminopurine (BAP) and α-naphthaleneacetic acid (NAA) combinations, basal media and beta-lactam antibiotics on in vitro organogenesis from mature stem segments of 'Pêra', 'Valência' and 'Bahia' sweet oranges and 'Cravo' rangpur lime. For induction of shoot regeneration, the segments of the four cultivars were placed on Murashige and Skoog (MS) medium containing the following BAP/NAA concentrations: 0.0/0.0; 0.25/0.0; 0.25/0.25; 0.5/0.0; 0.5/0.5; 1.0/0.0; 2.0/0.0; 2.0/0.25; 2.0/0.5; and 2.0/1.0 mg L-1. In order to test the influence of the culture media on shoot-bud induction, (MS), Murashige and Tucker (MT), and woody plant medium (WPM) formulations were evaluated, associated with the best combination of plant growth regulators obtained in the previous experiment. The influence of four beta-lactam antibiotics (timentin, cefotaxime sodium salt, meropenem trihydrate and augmentin) on shoot regeneration was determined. Better regeneration responses were achieved when internodal segments were cultured onto MS-based medium with 500 mg L-1 cefotaxime with the following BAP/NAA concentrations: 0.5 + 0.25 mg L-1 for 'Cravo', 1.0 + 0.25 mg L-1 for 'Valência' and 'Bahia', and 1.0 + 0.5 mg L-1 for 'Pêra'. Genotype, growth regulators, basal media and beta-lactam antibiotics affect the morphogenetic response in mature tissues of citrus.O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de combinações de 6-benzilaminopurina (BAP) e ácido α-naftalenoacético (NAA), meios de cultura e antibióticos beta-lactâmicos sobre a regeneração in vitro de segmentos internodais de laranja doce ('Pêra', 'Valência' e 'Bahia') e limão 'Cravo'. Para a indução de brotações, os explantes internodais foram cultivados em meio Murashige e Skoog (MS) contendo as seguintes combinações de BAP/ANA: 0,0/0,0; 0,25/0,0; 0,25/0,25; 0,5/0,0; 0,5/0,5; 1,0/0,0; 2,0/0,0; 2,0/0,25; 2,0/0,5; e 1,0/2,0 mg L-1. A fim de testar a influência dos meios de cultura na organogênese, as formulações (MS), Murashige e Tucker (MT) e "woody plant medium" (WPM) foram avaliadas, associadas à melhor combinação de reguladores de crescimento obtida no experimento anterior. Foram utilizados quatro antibióticos beta-lactâmicos (timentin, cefotaxima, trihidrato de meropenem e augmentin), em diferentes concentrações, para avaliar sua influência na regeneração in vitro. As melhores respostas foram obtidas quando os explantes foram cultivados em meio MS com 500 mg L-1 de cefotaxima com as seguintes combinações BAP/ANA: 0,5 + 0,25 mg L-1; para 'Cravo'; 1,0 + 0,25 mg L-1; para 'Valência' e 'Bahia'; e 1,0 + 0,5 mg L-1; para 'Pêra'. Genótipos, meios de cultura e antibióticos beta-lactâmicos afetam a resposta morfogenética de tecidos maduros de citros.

In order to evaluate the formation of adventitious buds and in vitro regeneration of sour orange plants (Citrus aurantium L.) two organogenesis-inducing experiments were conducted. In the first experiment, the induction and in vitro regeneration of adventitious buds were tested on epicotyl and internodal segments under the influence of BAP or KIN associated with NAA. The second experiment evaluated the in vitro regeneration of sour orange plants related to different explant types (epicotyls segments, internodal segments of in vitro germinated plantlets and internodal segments of greenhouse cultivated plants). Data collected on both experiments included the percentage of responsive explants (explants that formed buds), and the number of buds per explant. The addition of BAP showed the best organogenic response. In vitro germinated epicotyl segments and internodal segments are recommended as explants for sour orange in vitro organogenesis. Rooting of regenerated shoots was achieved without the need of auxin in the medium.Com o objetivo de avaliar a formação de gemas adventícias e regeneração in vitro de plantas de laranja-azeda (Citrus aurantium L.), foram realizados dois experimentos de indução à organogênese. No primeiro experimento, a indução e a regeneração in vitro de gemas adventícias foram investigadas a partir de segmentos internodais e segmentos de epicótilo sob o efeito de BAP ou CIN associados com ANA. O segundo experimento avaliou a regeneração in vitro de plantas de laranja-azeda em função do tipo de explante (segmentos de epicótilo, segmentos internodais de plantas germinadas in vitro e segmentos internodais de plantas cultivadas em casa de vegetação). Os dados coletados em ambos os experimentos incluíram a porcentagem de explantes responsivos (explantes que formaram gemas) e número de gemas por explante. A adição de BAP revelou a melhor resposta organogenética. Segmentos de epicótilo e segmentos internodais são explantes recomendados para a indução de organogênese in vitro de laranja-azeda. Enraizamento das brotações foi alcançado sem a adição de auxinas ao meio de cultura.

Azadirachta indica A. Juss, popularmente conhecido como nim, é uma espécie arbórea que se destaca por possuir substâncias de ação inseticida, fungicida, bactericida e nematicida. Sementes de nim foram inoculadas em meio de cultura WPM (Wood Plant Medium) contendo diferentes concentrações de ácido giberélico (GA3) (0; 3,0; 6,0; 9,0; e 12,0 mg L-1). Após 30 dias, cotilédones obtidos a partir de plântulas germinadas in vitro foram inoculados em meio WPM suplementado com ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) (0,0; 1,0; 2,0; e 3,0 mg L-1) e, ou, 6-benzilaminopurina (BAP) (0,0; 1,0; 2,0; e 3,0 mg L-1). As culturas foram incubadas no escuro, a 28 ºC. Os calos formados foram avaliados com base na sua coloração e textura, e três subcultivos foram realizados mensalmente em meio WPM contendo 2,0 mg L-1 BAP, na presença de luz. A cada 30 dias, avaliou-se o número de brotos formados a partir dos calos subcultivados. Entre os meios testados, o mais apropriado para germinação in vitro de nim foi o WPM na ausência de GA3. Explantes cotiledonares cultivados em WPM suplementado com 2,0 mg L-1 de BAP promoveram a maior formação de calos com potencial morfogênico. Quando esses calos foram transferidos para meio de composição similar, obteve-se alta formação de brotações até o terceiro subcultivo.Azadirachta indica A. Juss, popularly known as neem, is a woody species widely used because of its insecticide, fungicide, bactericide, and nematicide properties. Seeds of neem were inoculated in WPM (Wood Plant Medium) containing different concentrations of gibberelic acid (GA3) (0, 3, 6, 9, and 12 mg L-1). After 30 days, cotyledons were inoculated in WPM supplemented with 0.0; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1 acid 2,4-phenoxyacetic acid (2,4-D) and/or 0.0; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1 6-benzylaminopurine (BAP). The cultures were kept in the dark at 28 ºC. Differentiated calli were evaluated based on their coloration and texture, and three subcultures were carried out on a monthly basis in WPM medium with 2.0 mg L-1 BAP, in the presence of light. Every 30 days, the number of differentiated shoot-buds was evaluated. WPM medium lacking GA3 promoted the highest in vitro seed germination indexes. Cotyledonary-derived explants cultured in WPM medium with 2.0 mg L-1 BAP yielded calli with high morphogenic potential. When those calli were transferred to medium with similar composition, a high shoot formation was achieved up to the third subculture.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a indução e a formação de gemas adventícias em explantes de laranja-azeda, pelo uso de fitorreguladores. Em experimentos de organogênese in vitro foram avaliados 6-benzilaminopurina (BAP), thidiazuron (TDZ) e cinetina (CIN), em diferentes concentrações e sob duas condições de luminosidade; BAP e CIN combinados ou não com ácido naftalenoacético (ANA); e BAP e CIN isoladamente ou combinados entre si. Segmentos de epicótilo de 1 cm de comprimento, provenientes de plântulas de laranja-azeda germinadas in vitro, foram utilizados como explantes. Para induzir a formação de gemas, os segmentos foram cultivados em meio MT com ou sem adição de fitorreguladores. O material foi cultivado a 27ºC em ausência de luz por 30 dias, seguidos de fotoperíodo de 16 horas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro ou cinco repetições, a depender do experimento e, cada repetição foi constituída de placa de Petri com 20 explantes. Após 60 ou 70 dias de cultivo foram avaliados o percentual de explantes responsivos e o número de gemas por explante. A adição de BAP ao meio de cultura, combinada ou não com ANA, e em combinações com CIN promovem melhor resposta organogênica.The objective of this work was to evaluate the induction and formation of adventitious buds in sour orange explants through the use of plant regulators. In vitro organogenesis experiments were conducted to evaluate the effect of BAP, TDZ, and KIN in different concentrations and under two light conditions; BAP and KIN, combined or not with NAA; BAP and KIN, separately or in combined concentrations. Sour orange epicotyl segments (1 cm length), from in vitro germinated plants, were used as explants. In order to induce bud formation, the explants were cultured in MT medium with or without the addition of plant regulators. The material was cultivated at 27ºC in the absence of light for 30 days, followed of culture under a 16-hour photoperiod. The experimental design was completely randomized, with four or five replicates, depending on the experiment; each replicate comprised one Petri dish with 20 explants. After 60 or 70 days of cultivation, the percentage of responsive explants and the number of buds were evaluated. The addition of BAP to the culture medium, combined or not with ANA, and in combinations with CIN, induces better organogenic response.

Objetivou-se neste trabalho estudar a regeneração in vitro da planta daninha Euphorbia heterophylla a partir de explantes hipocotiledonares, cotiledonares e radiculares com diferentes concentrações do hormônio 2iP, combinado ou não com auxina e cinetina adicionado ao meio MS/2. Foram avaliados os números de explantes com gema, número de gemas por explante, número de plântulas enraizadas e aclimatadas. Obteve-se em média duas gemas por explante hipocotiledonar em 50% desses, a partir de organogênese direta com o uso de 0,5 mg.L-1 de 2iP. Não houve regeneração a partir dos explantes cotiledonares e radiculares. A cultura racinar desenvolveu-se em todos os tratamentos contendo ou não auxina. Esses resultados poderão auxiliar em futuros testes fisiológicos de resistência dessa planta a herbicidas.This work aimed to study the in vitro regeneration of the weed Euphorbia heterophylla from hypocotyls, cotyledon and root explants grown under different concentrations of the hormone 2iP, combined or not with auxin added to MS/2 medium. The parameters analyzed were the number of explants with shoot, number of shoot for explants, number of rooted and acclimatized plants. The results showed an average of two shoot for hypocotyls explants, in 50% of these, from direct organogenesis with the use of 0.5 mg. L-1 of 2iP. No regeneration from the cotyledon and root explants was verified. The root culture developed in all treatments with or without auxin. These results will be able to assist in future physiological tests of resistance of this plant of herbicides.

Por apresentar dormência em suas sementes, a propagação do pequizeiro necessita de estudos para a obtenção de mudas por via assexuada. Este trabalho teve como objetivo contribuir para o estabelecimento de um protocolo de micropropagação de pequizeiro. Para indução de brotações, os explantes foram inoculados em meio WPM com diferentes concentrações de BAP e ANA. Para a indução de raízes, brotações obtidas in vitro foram transferidas para meio WPM suplementado com diferentes concentrações de AIB e na presença ou ausência de carvão ativado. As plantas obtidas foram transferidas para sacos de polietileno contendo o substrato, cobertas com uma garrafa tipo pet para auxiliar no processo de aclimatização. O melhor tratamento para a indução de brotações foi aquele que utilizou 0,05mg L-1 de ANA combinado com 0,75mg L-1 de BAP, obtendo-se uma média de 6 brotações por explante, induzindo maior número de gemas por explante (17,4), o que proporcionou a maior taxa de multiplicação (8,7). A utilização de 3mg L-1 de AIB proporcionou a indução de raízes em 100% dos explantes, gerando um número médio de 12,87 raízes por brotação. As raízes desenvolvidas no meio de cultivo contendo carvão ativado foram maiores (33,16 mm), com maior número de raízes secundárias (19,53) e com maior taxa de sobrevivência na fase de aclimatização.Due the presence of seed dormancy, the propagation of Caryocar brasiliense requires studies in order to obtain young asexually plants. This work had as objective contribute to the establishment of a "pequizeiro" micropropagation protocol. For shoot induction, explants were inoculated in WPM medium with different concentrations and interactions of BAP and NAA. For rooting induction, shoots obtained in vitro were transferred to WPM medium supplemented with different concentrations of IBA in the presence or absence of activated charcoal. The best treatment for shoot induction was the use of 0,05mg L-1 ANA + 0,75mg L-1 BAP, which produced an average of 6 shoots/explant (17,4) providing the highest rate of multiplication (8,7). The use of 3mg L-1 IBA promoted root induction in all explants generating average of 12,87 roots per explant. Roots developed in the presence of activated charcoal presenting higher length (33,16 mm) and higher number of secondary roots (19,53).

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O sucesso de técnicas biotecnológicas no melhoramento in vitro de citros está condicionado à existência prévia de uma metodologia eficiente de regeneração de plantas. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um sistema para regeneração de plantas in vitro, via organogênese de tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort. Ex Tan.). Experimentos avaliando concentrações de BAP (benzilaminopurina) e condições de cultivo, posição e polaridade do segmento de epicótilo, no meio de cultura, foram desenvolvidos para maximizar a regeneração. Para a indução das brotações, segmentos de epicótilo (1,0 cm de comprimento) foram cultivados em meio de cultura MT (Murashige & Tucker, 1969). Após 45 dias, foram avaliados: percentual de explantes responsivos e nº. de gemas/ explante responsivo. Para enraizamento, foram utilizados os meios MT e MT/2, com ou sem ANA (ácido naftalenoacético) na concentração 1,0 mg L-1. Após 60 dias, avaliou-se o percentual de brotos que emitiram raízes. A máxima proliferação de gemas foi obtida em condições de escuro, por 30 dias, utilizando-se da concentração 2,0 mg L-1 de BAP. Não houve efeito significativo da posição do explante na resposta organogenética. Os segmentos apicais e mediais mostraram-se mais eficientes que os basais. A concentração de 1,0 mg L-1 de BAP com o cultivo em condições de escuro, por 30 dias, na fase de indução de brotações combinada com ausência de auxina no meio MT/2, na fase de indução de raízes, assegurou melhor índice de enraizamento dos brotos regenerados.The success of biotechnology for in vitro citrus plant breeding programs depends on the availability of efficient methodologies for plant regeneration. The objective of this work was to establish a system for regeneration of in vitro plants, through organogenesis of 'Cleopatra' (Citrus reshni Hort. ex Tan.) mandarin plants. Experiments were performed to evaluate the concentration of BAP and culture conditions, position and polarity of the epicotyls segment in culture media to maximize the regeneration of plants. For bud induction, epicotyls segments (1.0 cm of length) were cultivated in MT media, and evaluated after 45 days for % of responsive explants, and number of responsive buds per explants. For rooting, MT and MT/2 media were tested, with and without NAA (1,0 mg L-1). After 60 days, the % of shoots that emitted roots was evaluated. The maximum shoot proliferation was obtained under dark for 30 days, with BAP at 2.0 mg L-1. No effect of explants position in organogenesis response was observed. The apical and medium segments were shown to be more responsive than the basal segments. BAP concentration of 1,0 mg L-1, under dark for 30 days, at shoot induction stage, combined with the lack of auxin in MT/2 media, at the rooting induction stage, assured greater rooting of the regenerated shoots.

Este trabalho teve como objetivo avaliar a regeneração in vitro de plantas de urucum (Bixa orellana L.) a partir de diferentes tipos de explantes. Para definir o meio de cultura adequado para indução de brotações, diferentes concentrações e, ou, combinações da auxina AIA e das citocininas BAP e ZEA foram testadas. As melhores respostas de regeneração para segmentos de hipocótilo, nós cotiledonares e hipocótilos invertidos foram observadas em meios suplementados de ZEA (2,28 µM) e AIA (0,30 µM), ZEA (4,56 µM) e ZEA (4,56 µM), respectivamente. O meio de enraizamento mais eficaz foi o MS, com a metade de sua concentração salina e 5 µM de AIB. Análises citológicas, realizadas antes da aclimatação, confirmaram a estabilidade cromossômica das plantas cultivadas in vitro, não sendo detectado variação com relação ao número de cromossomos metafásicos (2n = 14).The present work aimed the establishment of a regeneration protocol for annatto (Bixa orellana L.) from different juvenile explants. In order to promote shoot induction, different concentrations and/or combinations of IAA and the cytokinins BAP and ZEA were assessed. Better regeneration responses were achieved when segmented hypocotyl, cotiledonary nodes and inverted hypocotyl were cultured onto MS-based medium supplemented with ZEA (2.28 µM) and IAA (0.30 µM), ZEA (4.56 µM) or ZEA (4.56 µM), respectively. Rooting of elongated shoots displayed higher frequencies when half-strength MS medium with IBA (5 µM) was used. No genetic variation was detected among regenerants as revealed by cytological analysis based on metaphasic chromosome countings (2n = 14).

Breeding methods based on genetic transformation techniques need to be implemented for Eucalyptus camaldulensis to shorten the long breeding cycles and avoid manipulation of adult trees; that requires the development of plant regeneration protocols enabling development of plants from transformed tissues. The present work aimed to optimise the regeneration process already established for the species. Cotyledonary leaves of E. camaldulensis were cultured in MS medium supplemented with naphthaleneacetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BAP) combinations. The most efficient treatment for bud indirect regeneration (2.7 µmol L-1 NAA and 4.44 µmol L-1 BAP) was used for further experiments. When explants were kept in the dark during the first 30 days, the percentage of explants forming calluses increased and explant necrosis was reduced in comparison with light-cultured explants. Mineral medium modifications were compared and half-strength MS mineral medium turned out to be as efficient as full-strength medium, producing 54% and 47% of explants with buds, respectively. For shoot elongation, MS medium with half-strength nitrate and ammonium salts, and 0.2% activated charcoal yielded rooted shoots 1 to 8 cm high after one month. The procedure is an efficient protocol for E. camadulensis plant regeneration, reducing the stages necessary for the obtention of complete plants.A implementação, para espécies florestais, de técnicas de melhoramento baseadas em métodos de transformação genética, permitirá reduzir os longos ciclos de melhoramento e evitar a manipulação de árvores adultas. Isto implica dispor de um protocolo de regeneração que permita o desenvolvimento de plantas a partir de tecidos transformados. Este trabalho teve como objetivo otimizar este protocolo de regeneração para Eucalyptus camaldulensis. Folhas cotiledonares foram cultivadas em meio de cultura MS suplementado com combinações de ácido naftalenoacético (ANA) e 6-benzilaminopurina (BAP). O tratamento mais eficiente em termos de regeneração indireta de gemas foi 2,7 µmol L-1 de ANA combinado com 4,44 µmol L-1 de BAP, o qual foi utilizado nos experimentos posteriores. A manutenção dos explantes no escuro durante os trinta primeiros dias elevou a porcentagem de explantes com calos e reduziu a morte dos explantes, em comparação com os que permaneceram na luz. Modificações da composição mineral do meio MS foram comparadas e mostraram que a redução de metade dos sais foi tão eficiente para a formação de gemas (54% dos explantes) quanto o meio completo (47%). O meio de cultura com a concentração de íons nitrato e amônio reduzida à metade e 0,2% de carvão ativado apresentou-se adequado para o alongamento e enraizamento das brotações que atingiram uma altura de 1 a 8 cm depois de 30 dias. O processo completo representa um protocolo eficiente para a regeneração de plantas de Eucalyptus camaldulensis, uma vez que reduz o número de etapas para a obtenção de plantas completas.

A exploração de árvores tropicais realizada de forma indiscriminada, buscando espécies de alto valor econômico, tem levado várias espécies, como o mogno (Swietenia macrophylla King), ao perigo de extinção. O desenvolvimento de uma metodologia de regeneração de gemas, direta ou indireta, poderia auxiliar na obtenção de um grande número de mudas e constituir uma perspectiva à propagação sexuada. Essa última é limitada pelo fato das sementes perderem rapidamente a capacidade germinativa. No presente trabalho, foram utilizados dois tipos de explantes: fragmentos foliares e de raízes de plantas cultivadas in vitro. Após desinfestação, os explantes foram colocados em meio de cultura de Murashige e Skoog (1962) contendo três quartos da concentração de sais, vitaminas do mesmo meio, 30g.L-1 de sacarose, auxina (ácido naftaleno-acético, ANA, 0,11 M e 0,54 M), citocinina (cinetina, CIN, 1,2 M, 2,3 M, 4,7 M e 9,3 M; 6-benziladenina, BA, 2,2 M, 4,4 M e 8,8 M ou 2-isopenteniladenina, 2-iP, 2,5 M) e 7g.L-1 de ágar. As variáveis testadas foram a concentração e o tipo de regulador de crescimento e a origem dos explantes. A cada 30 dias, os explantes foram avaliados pela contagem do número de explantes formando calos ou raízes e a consistência dos calos. Foram obtidos calos a com base nos dois tipos de explantes. Nos explantes foliares, 90% deles formaram calos em meios de cultura contendo BA 4,4 M com ANA 0,54 M e BA 8,9 M com ANA 0,11 ou 0,54 M. Nos explantes de raízes, a maior percentagem de explantes com calos foi de 55%, no meio de cultura com BA 2,2 M e ANA 0,54 M. Raízes adventícias foram obtidas partindo de calos e do limbo dos explantes foliares, em meios de cultura com CIN e ANA. Não foi observada a formação de gemas adventícias.

O objetivo deste trabalho foi obter um protocolo de regeneração de brotações in vitro a partir de explantes de pereira (Pyrus communis L.) cultivar Carrick, visando a programas de transformação genética. Para tanto, utilizaram-se três tipos de explantes (ápice caulinar, folha e entrenó) que permaneceram durante 0, 10, 20, 30 ou 40 dias em meio de indução e, posteriormente, foram transferidos para meio de proliferação com 8,9 ou 13,3µM de thidiazuron (TDZ). Aos 85 dias após o início do experimento, observou-se que o explante ápice caulinar apresentou maior capacidade de regeneração de brotações quando comparado ao explante entrenó, enquanto o explante folha não mostrou capacidade de regenerar brotações. Verificou-se também que, inoculando o explante diretamente em meio de proliferação sem auxina, houve uma maior percentagem de regeneração e que, aumentando o tempo de permanência dos explantes em meio de indução, diminuiu a percentagem de regeneração de brotações. A concentração de thidiazuron (TDZ) no meio de proliferação não afetou a capacidade de regeneração de brotações.The objective of this work was to obtain a shooting regeneration protocol from explants of pear tree (Pyrus communis L.) Carrick cultivar, aiming at genetic transformation programs. Three types of explants (caulinary tip, leaf and entrenode) were used. They were left for 0, 10, 20, 30 or 40 days in induction medium, and afterwards they were transferred to proliferation medium with 8.9 or 13.3µM of TDZ. At 85 days after the beginning of the experiment, it was noted that the caulinary tip explant showed higher capacity of shooting regeneration when compared to entrenode explants, while the leaf explant was not able to regenerate. It was also observed that inoculating the explant directly in proliferation medium without auxin resulted in a higher percentage of regeneration, and increasing the period of time that the explants remained in induction medium lowered the percentage of regeneration of shoots. The TDZ concentration in the proliferation medium did not affect the capacity of shooting regeneration.