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This study aimed to investigate the molecular pathways involved in muscle wasting in an animal model of osteoarthritis (OA) induced by anterior cruciate ligament transection (ACLT) in rats. Reduction of protein syntheses, increased proteolysis and impaired muscle regeneration are important pathways related to muscle wasting, and myogenin, MyoD, myostatin and MuRF-1 are some of their markers. Female Wistar rats were allocated into two groups: OA (submitted to the ACLT) and SHAM (submitted to surgery without ACLT). Nociception, spontaneous exploratory locomotion and body weight of animals were evaluated weekly. Twelve weeks after the disease induction, animals were euthanized, and the right knee joints were collected. Gastrocnemius muscle of the right hind paw were dissected and weighed. Gastrocnemius was used for evaluation of muscle atrophy and expression of IL-1β, TNF-α, Pax7, myogenin, MyoD, myostatin and MuRF-1. Histopathology of the knee confirmed the development of the disease in animals of OA group. Gastrocnemius of OA animals showed a reduction of about 10% in area and an increased IL-1β expression compared to animals of SHAM group. Expression of myostatin was increased in OA group, while myogenin expression was decreased. TNF-α, Pax7, MuRF-1 and MyoD expression was similar in both OA and SHAM groups. Nociception was significantly elevated in OA animals in the last two weeks of experimental period. Spontaneous exploratory locomotion, body weight and weight of gastrocnemius showed no difference between OA and SHAM groups. Gastrocnemius atrophy in OA induced by ACLT involves elevated expression of IL- 1β within the muscle, as well as increased expression of myostatin and decreased expression of myogenin. Therefore, muscle wasting may be linked to impaired muscle regeneration.

Contextualização: O músculo esquelético tem a capacidade de adaptação frente a estímulos variados, tais como atividade contrátil, danos diretos e indiretos. Uma das modalidades terapêuticas utilizadas na reabilitação de disfunções musculoesqueléticas que vem demonstrando resultados positivos no tratamento e na prevenção de várias patologias é a terapia aquática. Objetivo: Analisar o efeito da natação na expressão dos fatores regulatórios miogênicos MyoD e miogenina durante o reparo do músculo esquelético de rato após criolesão. Métodos: Foram utilizados 40 ratos Wistar, divididos em 04 grupos: (1) Controle; (2) “Sham” (sem lesão, submetido a exposição do músculo tibial anterior (TA); (3) Criolesionado e (4) Criolesionado e submetido à natação, analisados em 7, 14 e 21 dias. A criolesão foi realizada por meio de duas aplicações, utilizando um bastão metálico de extremidade plana, resfriado em nitrogênio líquido diretamente no ventre muscular. O protocolo consistiu de sessões de natação com duração de 90 minutos, realizadas 6 vezes por semana. Ao término do protocolo os animais foram eutanasiados, os músculos TA foram removidos e o RNA total foi extraído. Em seguida, foi obtido o cDNA para a realização do PCR em tempo real utilizando primers específicos para MyoD e miogenina. Resultados: Os resultados evidenciaram uma redução na expressão de miogenina após 7 dias nos grupos criolesionado com (p≤0.01) e sem (p≤0.01) natação e após 14 no grupo criolesionado com natação (p≤0.05) com relação aos grupos controle e “sham”, respectivamente. Não encontramos diferenças entre os grupos criolesionados com (p>0.05) e sem natação (p>0.05). Com relação à expressão de MyoD não houve diferença entre os grupos avaliados. Conclusão: A natação não influenciou a expressão dos fatores regulatórios miogênicos durante o processo de reparo de músculo esquelético de rato após criolesão. Background: Skeletal muscle has the ability to adapt to several stimuli, such as contractile activity as well as direct and indirect damage. Aquatic therapy has been used in the rehabilitation of musculoskeletal disorders. In addition, it has demonstrated positive results in the therapeutic process and preventing several diseases.. Objective: The aim of the present study was to analyze the effect of swimming on the expression of the myogenic regulatory factors MyoD and myogenin during the skeletal muscle repair process in rats following cryoinjury. Methods: Forty Wistar rats were randomly divided into four groups: 1) Control; 2) Sham – non-muscle damaged, submitted to procedure for exposure of the tibialis anterior (TA) muscle; 3) Cryoinjured; and 4) Cryoinjured and submitted to swimming. Analyses were carried out at 7, 14 and 21 days. Cryoinjury was performed with two applications of the flat end of a metal rod previously cooled in liquid nitrogen directly to the belly of the TA muscle. The protocol consisted of 90-minute swimming sessions six times a week. At the end of the protocol, the animals were euthanized and the TA muscles were removed. Total RNA was extracted using the TRIzol reagent. Next, cDNA was obtained to perform real-time PCR using specific primers for MyoD and myogenin. Results: The results showed a reduction in the expression of myogenin in the groups cryoinjury with p≤0.01and without p ≤0.01 swimming after 7 days, and in group cryoinjury with swimming (p≤0.05) after 14 days respect to the control groups and “sham”, respectively. There were no differences between groups cryoinjury with (p> 0.05) and without (p>0.05) swimming. Regarding the expression of MyoD there was no difference between the groups. Conclusion: Swimming did not affect the expression of myogenic regulatory factors during the skeletal muscle repair process in rats following cryoinjury.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-19T15:19:00Z No. of bitstreams: 1 Jacira Souza Ribeiro.pdf: 1136563 bytes, checksum: 6f35b1abf4cd3ca62f8560ee50069169 (MD5) Made available in DSpace on 2018-06-19T15:19:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacira Souza Ribeiro.pdf: 1136563 bytes, checksum: 6f35b1abf4cd3ca62f8560ee50069169 (MD5) Previous issue date: 2015-12-10 The low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) has been used to promote muscle repair with better quality and in shorter time, however, there is no standardization for the parameters used in clinical practice. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of USPBI on the repair of skeletal muscle of rats after cryoinjury. Male Wistar rats (n=45) were divided into 3 groups: control; only injury; Injured and treated with LIPUS. The LIPUS application was performed daily, using the stationary mode, pulse 1: 4, 1 MHz frequency, intensity 0.4 W / cm2 for 3 minutes. The injured groups were euthanized at 1, 2, 3 and 7 days following injury induction. The tibialis anterior muscle (TA) was removed for morphological analysis and collagen remodeling, and the muscle sections stained with H&E and Picrosirus Red, respectively. Then, the slides were photographed and quantified using the program "Image J". The analysis of MyoD and myogenin gene expression was performed using real time PCR. The results showed that the USPBI promoted modulation of inflammatory responses with a decrease of inflammatory infiltrates after 1, 2, 3 and 7 days, and reduction of myonecrosis after 7 days, followed by an increase in the number of immature fibers after 3 and 7 days, and increase of blood vessels on days 2, 3 and 7 days. Regarding the deposition of collagen, the results showed better organization of the fibers in all experimental periods, and increased deposition of collagen fibers in the injured group and treated after 2 and 3 days. In addition, treatment with LIPUS promoted increased gene expression of MyoD reduction after 3 days and after 7 days. Regarding myogenin expression, the treated group showed increased expression after 7 days. In conclusion, the LIPUS induced positive effects on muscle repair process leading to reduced inflammation and myonecrosis, increased in the immature fibers and mature blood vessels, as well as modulation of Myod and miogenin in different periods. O ultrassom pulsado de baixa intensidade (USPBI) tem sido utilizado por promover um reparo muscular de melhor qualidade e menor dura????o, por??m, n??o h?? padroniza????o quanto aos par??metros utilizados na pr??tica cl??nica. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do USPBI sobre o reparo do m??sculo esquel??tico de rato ap??s crioles??o. Foram utilizados 45 ratos Wistar, machos, divididos em 3 grupos experimentais: controle; somente les??o; lesionado tratado com USPBI. A aplica????o de USPBI foi realizada diariamente ap??s indu????o da les??o, modo estacion??rio, pulsado 1:4, frequ??ncia 1 MHz, intensidade 0,4 W/cm2, durante 3 minutos. Os grupos lesionados foram eutanasiados ap??s 1, 2, 3 e 7 dias da indu????o da les??o. O m??sculo tibial anterior (TA) foi removido para an??lise morfol??gica e de remodelamento do col??geno, sendo os cortes corados com H&E e Picrosirius Red, respectivamente. As l??minas foram fotografadas e quantificadas com aux??lio do programa ???Image J???. A express??o g??nica de MyoD e miogenina foi obtida por PCR em tempo real. Os resultados evidenciaram que o USPBI promoveu modula????o da resposta inflamat??ria, havendo redu????o do infiltrado inflamat??rio ap??s 1, 2, 3 e 7 dias, e redu????o da mionecrose ap??s 7 dias, seguido pelo aumento no n??mero de fibras imaturas ap??s 3 e 7 dias, e aumento dos vasos sangu??neos nos dias 2, 3 e 7 dias. Em rela????o ?? deposi????o de col??geno, os resultados evidenciaram melhor organiza????o das fibras em todos os per??odos experimentais, al??m de aumento da deposi????o de fibras col??genas no grupo lesionado e tratado ap??s 2 e 3 dias. Al??m disso, o tratamento com USPBI promoveu aumento da express??o g??nica de MyoD ap??s 3 dias e redu????o ap??s 7 dias. Em rela????o a express??o de miogenina, o grupo tratado demonstrou aumento da express??o ap??s 7 dias. Em conclus??o, o USPBI nos par??metros utilizados induziu efeitos positivos ao processo de reparo muscular causando redu????o do processo inflamat??rio e mionecrose, aumento de fibras jovens vasos sangu??neos maduros, al??m de modula????o de MyoD e miogenina nos diferentes per??odos avaliados.

Base teórica: A osteoartrite é uma doença crônica cuja principal característica é a degradação progressiva da cartilagem articular. Além do acometimento articular, frequentemente, os pacientes com osteoartrite apresentam fraqueza e atrofia dos músculos periarticulares. Apesar disso, os mecanismos moleculares envolvidos na perda muscular relacionada à osteoartrite não são conhecidos. Os principais mecanismos já estudados, em outras condições, estão relacionados ao aumento da degradação e à redução da síntese de proteínas musculares e a déficits na ativação das células-satélite, responsáveis pela regeneração muscular. A miostatina, um importante regulador negativo do crescimento da massa muscular, estimula o aumento da degradação e a redução da síntese de proteínas musculares. Por outro lado, MyoD e miogenina, são marcadores de proliferação e de diferenciação de células-satélite, respectivamente. Objetivos: Investigar os mecanismos moleculares envolvidos na perda muscular em um modelo animal de osteoartrite induzida por transecção do ligamento cruzado anterior em ratas. Métodos: Ratas Wistar fêmeas foram alocadas em dois grupos: OA (submetidas à cirurgia de transecção do ligamento cruzado anterior do joelho direito) e SHAM (submetidas à cirurgia fictícia do joelho direito). Durante o período experimental de 12 semanas foram avaliados, semanalmente, o peso corporal e a locomoção exploratória espontânea. Após a eutanásia, foram coletadas as articulações do joelho direito para confirmação do desenvolvimento da doença. Os músculos gastrocnêmio, tibial-anterior e sóleo, da pata posterior direita, foram dissecados, pesados e congelados. O músculo gastrocnêmio foi utilizado para a avaliação da atrofia muscular, através da análise da área seccional da miofibra, e para análise da expressão proteica de miostatina, MyoD e miogenina. Resultados: A locomoção exploratória espontânea, o peso corporal e o peso dos músculos gastrocnêmio, tibial-anterior e sóleo não apresentaram diferença significativa entre os grupos OA e SHAM. A histopatologia da articulação do joelho confirmou o desenvolvimento da doença nos animais do grupo OA. A área do músculo gastrocnêmio demonstrou redução de aproximadamente 10% no grupo OA, em comparação com o grupo SHAM. O grupo OA apresentou aumento na expressão proteica de miostatina e redução na expressão proteica de miogenina. A expressão proteica de MyoD não apresentou diferença entre os grupos. Conclusão: A atrofia do músculo gastrocnêmio presente na osteoartrite induzida por transecção do ligamento cruzado anterior envolve aumento na expressão de miostatina e redução na expressão de miogenina. Nesse modelo, a perda muscular pode estar relacionada à proteólise induzida pelos níveis aumentados de miostatina e ao déficit na diferenciação das células-satélite devido à redução na expressão de miogenina. Background: Osteoarthritis is a chronic joint disease primarily characterized by cartilage loss. In addition to joint impairment, patients with osteoarthritis often suffer from weakness and atrophy of the periarticular muscles. However, the molecular mechanisms involved in osteoarthritis-related muscle wasting are not known. The main mechanisms studied, in other conditions, are related to increased degradation and reduced synthesis of muscle protein and to deficits in the activation of satellitecells, which are responsible for muscle regeneration. Myostatin, an important negative regulator of muscle growth, stimulates the increase of degradation and the reduction of synthesis of muscle protein. Moreover, MyoD and myogenin are markers of proliferation and differentiation of satellite-cells, respectively. Objective: To investigate the pathways involved in muscle wasting in a model of osteoarthritis induced by anterior cruciate ligament transection (ACL) in rats. Methods: Female Wistar rats were allocated into two groups: OA (submitted to the ACL transection) and SHAM (submitted to surgical procedures without ACL transection). The spontaneous exploratory locomotion and the body weight of animals were evaluated weekly. In the twelfth week after the induction of disease, animals were euthanized and the right knee joints were collected for further confirmation of the disease by histopathology. Gastrocnemius, tibialis-anterior and soleus muscles from right hind paw were dissected, weighed and frozen. Gastrocnemius was used for evaluation of muscle atrophy, by cross-sectional area measurement, and protein expression of myostatin, MyoD and myogenin. Results: Spontaneous exploratory locomotion, body weight and weight of muscles showed no difference between OA and SHAM groups. The histopathology of the knee joints confirmed the development of the disease in animals from OA group. Gastrocnemius area of animals from OA group had a reduction of about 10% compared to animals from SHAM group. Protein expression of myostatin was increased in animals from OA group, while myogenin expression was decreased. MyoD expression was similar in both OA and SHAM groups. Conclusion: Gastrocnemius atrophy in osteoarthritis induced by ACL transection involves increased protein expression of myostatin and decreased protein expression of myogenin. In this model, muscle wasting may be linked to myostatininduced proteolysis and to deficits in satellite-cell differentiation due to decreased expression of myogenin.

Made available in DSpace on 2015-02-02T12:39:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-01Bitstream added on 2015-02-02T13:07:50Z : No. of bitstreams: 1 S0100-204X2014000500364.pdf: 590812 bytes, checksum: 012b6a959a6ff3c8f354677cb78be96a (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O objetivo deste trabalho foi estimar as frequências de polimorfismos alélicos em genes de bovinos Nelore e associá-los às características de carcaça e qualidade da carne. Seiscentos machos foram genotipados quanto aos seguintes polimorfismos: DGAT1 (VNTR com 18 nucleotídeos na região promotora); ANK1, novo polimorfismo, identificado no presente estudo e mapeado na região gênica regulatória NW_001494427.3; TCAP (AY428575.1:g.346G>A); e MYOG (NW_001501985:g.511G>C). No estudo de associação, foram utilizados os dados fenotípicos de massa da carcaça quente, área de olho do lombo, espessura de gordura subcutânea, percentagem de gordura intramuscular, força de cisalhamento, índice de fragmentação miofibrilar, coloração da carne (L*, a*, b*) e perdas por cocção. O alelo B do gene ANK1 foi associado ao aumento da coloração vermelha (a*) da carne. No gene DGAT1, os alelos 5R, 6R e 7R foram associados ao aumento de gordura intramuscular, à redução das perdas por cocção e ao aumento da área de olho de lombo, respectivamente. O SNP (polimorfismo de nucleotídeo único) do gene TCAP não apresentou polimorfismo, e os alelos do gene MYOG não foram associados a nenhuma das características avaliadas. Os resultados indicam que os genes ANK1 e DGAT1 podem ser utilizados na seleção de animais Nelore quanto à qualidade de carne e carcaça. The objective of this work was to estimate the allele polymorphism frequencies of genes in Nellore cattle and associate them with meat quality and carcass traits. Six hundred males were genotyped for the following polymorphisms: DGAT1 (VNTR with 18 nucleotides at the promoter region); ANK1, a new polymorphism, identified and mapped here at the gene regulatory region NW_001494427.3; TCAP (AY428575.1:g.346G>A); and MYOG (NW_001501985:g.511G>C). In the association study, phenotype data of hot carcass weight, ribeye area, backfat thickness, percentage of intramuscular fat, shear force, myofibrillar fragmentation index, meat color (L*, a*, b*), and cooking losses were used. Allele B from the ANK1 gene was associated with greater redness (a*). Alleles 5R, 6R, and 7R from the DGAT1 VNTR gene were associated with increased intramuscular fat, reduced cooking losses and increased ribeye area, respectively. The single nucleotide polymorphism (SNP) of the TCAP gene was not polymorphic, and MYOG alleles were not associated with any of the evaluated characteristics. These results indicate that ANK1 and DGAT1 genes can be used in the selection of Nellore cattle for carcass and meat quality. Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Unesp Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Melhoramento e Nutrição Animal Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Unesp Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Melhoramento e Nutrição Animal

The objective of this work was to estimate the allele polymorphism frequencies of genes in Nellore cattle and associate them with meat quality and carcass traits. Six hundred males were genotyped for the following polymorphisms: DGAT1 (VNTR with 18 nucleotides at the promoter region); ANK1, a new polymorphism, identified and mapped here at the gene regulatory region NW_001494427.3; TCAP (AY428575.1:g.346G>A); and MYOG (NW_001501985:g.511G>C). In the association study, phenotype data of hot carcass weight, ribeye area, backfat thickness, percentage of intramuscular fat, shear force, myofibrillar fragmentation index, meat color (L*, a*, b*), and cooking losses were used. Allele B from the ANK1 gene was associated with greater redness (a*). Alleles 5R, 6R, and 7R from the DGAT1 VNTR gene were associated with increased intramuscular fat, reduced cooking losses and increased ribeye area, respectively. The single nucleotide polymorphism (SNP) of the TCAP gene was not polymorphic, and MYOG alleles were not associated with any of the evaluated characteristics. These results indicate that ANK1 and DGAT1 genes can be used in the selection of Nellore cattle for carcass and meat quality. O objetivo deste trabalho foi estimar as frequências de polimorfismos alélicos em genes de bovinos Nelore e associá-los às características de carcaça e qualidade da carne. Seiscentos machos foram genotipados quanto aos seguintes polimorfismos: DGAT1 (VNTR com 18 nucleotídeos na região promotora); ANK1, novo polimorfismo, identificado no presente estudo e mapeado na região gênica regulatória NW_001494427.3; TCAP (AY428575.1:g.346G>A); e MYOG (NW_001501985:g.511G>C). No estudo de associação, foram utilizados os dados fenotípicos de massa da carcaça quente, área de olho do lombo, espessura de gordura subcutânea, percentagem de gordura intramuscular, força de cisalhamento, índice de fragmentação miofibrilar, coloração da carne (L*, a*, b*) e perdas por cocção. O alelo B do gene ANK1 foi associado ao aumento da coloração vermelha (a*) da carne. No gene DGAT1, os alelos 5R, 6R e 7R foram associados ao aumento de gordura intramuscular, à redução das perdas por cocção e ao aumento da área de olho de lombo, respectivamente. O SNP (polimorfismo de nucleotídeo único) do gene TCAP não apresentou polimorfismo, e os alelos do gene MYOG não foram associados a nenhuma das características avaliadas. Os resultados indicam que os genes ANK1 e DGAT1 podem ser utilizados na seleção de animais Nelore quanto à qualidade de carne e carcaça.

Agradecimentos: This study was supported by São Paulo Research Foundation (FAPESP), Proc. 08/52641-1, by the National Council for Scientific and Technological Development (CNPq), Proc. 130628/2008-5, and by CAPES. This work is part of the MSc thesis that was presented by RWAS to the University of Campinas, UNICAMP, 2010 Abstract: Alves Souza, RW, Aguiar, AF, Vechetti-Júnior, IJ, Piedade, WP, Rocha Campos, GE, and Dal-Pai-Silva, M. Resistance training with excessive training load and insufficient recovery alters skeletal muscle mass–related protein expression. J Strength Cond Res 28(8): 2338–2345, 2014—The aim of this study was to investigate the effects of a resistance training program with excessive training load and insufficient recovery time between bouts on muscle hypertrophy- and atrophy-related protein expression. Male Wistar rats were randomly assigned to either a trained (TR, N = 9) or a sedentary (SE, N = 9) group. The TR group was subjected to a 12-week resistance training program with excessive training load and insufficient recovery between bouts that was designed to induce plantaris muscle atrophy. After the 12-week experiment, the plantaris muscle was collected to analyze the cross-sectional area (CSA) of the muscle fibers, and MAFbx, MyoD, myogenin, and IGF-I protein expression (Western blot). The CSA was reduced significantly (-17%, p = 0.05) in the TR group compared with the SE group. Reciprocally, there was a significant (p = 0.05) 20% increase in MAFbx protein expression, whereas the MyoD (-27%), myogenin (-29%), and IGF-I (-43%) protein levels decreased significantly (p = 0.05) in the TR group compared with the SE group. In conclusion, our data indicated that muscle atrophy induced by resistance training with excessive training load and insufficient recovery was associated with upregulation of the MAFbx catabolic protein and downregulation of the MyoD, myogenin, and IGF-I anabolic proteins. These findings suggest that quantitative analysis of these proteins can be important and complementary with other biochemical markers to confirm a possible overtraining diagnosis CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO - CNPQ COORDENAÇÃO DE APERFEIÇOAMENTO DE PESSOAL DE NÍVEL SUPERIOR - CAPES FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO - FAPESP Fechado

Orientadores: Daniela Cristina Carvalho de Abreu, Alberto Cliquet Junior Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da laserterapia de baixa potência no comprimento de onda ?=780nm entre diferentes períodos de tratamento 7, 14 e 21 dias e verificar a dose (10J/cm2 ou 50J/cm2) que promove melhor reparo muscular através das análises histopatológicas e imunohistoquímicas. Foram utilizados 54 ratos machos divididos em 3 grupos: GC: grupo controle (criolesão, sem tratamento); G10: criolesão do músculo tibial anterior (TA) e tratados com laser dose 10J/cm² e G50: criolesão do músculo TA e tratados com laser dose 50J/cm² que foram subdivididos em 3 subgrupos (n=6): 7, 14 e 21 dias de tratamento. Os achados histopatológicos revelaram maior organização das fibras musculares dos grupos tratados com laser 10J/cm² e 50J/cm² durante os períodos 7 e 14 dias em relação ao grupo controle; no período 21 dias os grupos apresentaram semelhanças na reparação tecidual. Em relação à área da lesão os grupos tratados com laser 10J/cm² e 50J/cm² durante 7 dias obtiveram diminuição significativa (p ? 0.05) da área da lesão em relação ao grupo controle, sendo que os grupos 14 e 21 dias não apresentaram diferenças significativas entre eles. Na contagem dos vasos o grupo tratado com laser 10J/cm² no 14° dia apresentou aumento dos vasos em relação ao grupo tratado com dose 50J/cm², mas não em relação ao grupo controle. Nos tempos de 7 e 21 dias os grupos não apresentaram diferença significativa entre si. Com relação às análises imunohistoquímicas da myoD no período de 7 dias os grupos tratados com laser 10J/cm² e 50J/cm² apresentaram maior imunomarcação comparada com o grupo controle, no período 14 e 21 dias a imunomarcação estava ausente. A imunomarcação da miogenina estava presente de forma semelhante nos períodos 7 e 14 dias para os três grupos analisados e no período 21 dias a imunomarcação da miogenina estava ausente em todos os grupos experimentais. Os resultados mostraram que o laser possui efeitos positivos no reparo muscular Abstract: The objective of this study was to assess the effects of 780nm low-level laser therapy at different periods of 7, 14 and 21 days after cryolesion, including the dose (10 or 50J/cm2) to promote a better muscle repair evidenced by histopathological and immumohistochemical analyses. Fifty-four male rats were divided into three groups: injured control group (CG) - injured animals without any treatment; injured 780nm laser treated group, at 10 J/cm² (G10) and injured 780nm laser treated group, at 50 J/cm² (G50). Each group was divided into 3 subgroups (n=6): 7, 14 and 21 days post-injury. Histopathological findings revealed better-organized muscle fibers in the G10 and G50 during the periods of 7 and 14 days compared to CG. The G10 and G50 during 7 days showed a significant reduction (p? 0.05) of lesion area compared to CG, without differences between groups treated for 14 and 21 days. The G10 showed an increase of the amount of vessels after 14 days compared to the G50, but not in relation to controls. With regard to the immumohistochemical analyses of the MyoD factor, The G10 and G50 during 7 days showed higher concentrations of immunomarkers than controls. Myogenin immunomarkers were similarly observed at days 7 and 14 in all three groups analyzed, whereas immunomarkers were found in none of the groups after 21 days of laser therapy. The results showed that laser has positive effects on muscle repair Mestrado Fisiopatologia Cirúrgica Mestra em Ciências

Financiadora de Estudos e Projetos Esta pesquisa é o resultado de quatro anos dedicados ao doutorado. Apresenta caráter pioneiro em vários aspectos. Primeiro, este trabalho utilizou a metodologia de Branched de DNA (bDNA) para análise de expressão gênica em tecidos biológicos. Inicialmente, a técnica que era destinada para cultura de células, foi adaptada para homogenatos de tecido. Primeiramente, validamos a metodologia mediante o uso do protocolo QuantiGene® Reagent Systems Evaluation Program (Genospetra). Mediante este protocolo, vários ensaios experimentais foram realizados, e resultou na adequação metodológica que a empresa utilizou para padronizar os procedimentos para análise com homogenatos de tecidos animais. Atualmente, nosso protocolo faz parte do manual do Sistema de Reagentes QuantiGene Panomics® que está sendo utilizado pela própria empresa para análise da expressão gênica com homogenatos de tecido muscular. Segundo, tendo em vista a existência de poucos trabalhos na literatura que investiga o efeito do laser λ=514 nm durante a regeneração do músculo esquelético, decidimos realizar esta investigação para fins de desenvolvimento do laser de argônio de baixa intensidade para fins terapêuticos. Terceiro, consiste no primeiro trabalho que investiga três comprimentos de onda de laser de baixa intensidade sobre a expressão de genes durante o processo de regeneração muscular in vivo. Ao final desse estudo obtivemos resultados relevantes que deram origem a dois manuscritos submetidos em revistas internacionais, em anexo. Para apresentação desta tese, os resultados obtidos foram organizados em capítulos que correspondem aos dois artigos apresentados a seguir.

Made available in DSpace on 2011-04-09T21:50:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PROCIARF2001.00119.PDF: 265111 bytes, checksum: b5811dd33e4b1c5513fbd3b3bddc818c (MD5) Previous issue date: 2001-10-22