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Coxiella burnetii é uma bactéria gram-negativa intracelular obrigatória, responsável pelo aparecimento da Febre Q em humanos e Coxielose nos animais. Os ruminantes domésticos são considerados reservatórios de infeção constituindo a principal fonte de infeção para humanos que ocorre predominantemente através da inalação de aerossóis contaminados. Os animais infetados eliminam a bactéria para o ambiente através dos produtos do parto ou aborto, das fezes, urina e leite. Considerando que a bactéria apresenta elevada estabilidade, mesmo em condições ambientais adversas, a transmissão pode ocorrer não apenas por via direta, como também por via indireta ou mesmo vetorial. Sendo o leite uma via de eliminação importante em ruminantes, e considerando que o leite não pasteurizado e os produtos derivados do mesmo, são consumidos em diferentes partes do mundo; a possibilidade de existir transmissão pela por via oral, nomeadamente através da ingestão de leite não pasteurizado, é possível, mas é ainda um assunto controverso para a comunidade científica. Na Europa, por exemplo, vários tipos de queijo com elevada qualidade gastronómica são confecionados com leite não pasteurizado. Isto gera algumas preocupações acerca do aparecimento de surtos de Febre Q entre a população humana derivado do consumo destes produtos. Apesar de a infeção por via oral em humanos por C. burnetii permanecer um aspeto que requer investigação adicional, vários estudos recentes comprovaram a presença e a viabilidade da bactéria em amostras de leite e queijo. Apesar da evidência não conclusiva da ocorrência de infeção resultante da ingestão de leite não pasteurizado e seus sub-produtos, deve ser dada particular atenção às atividades ocupacionais como a ordenha e outras associadas à manipulação de leite cru. É assim necessário incrementar a perceção da importância da pasteurização na segurança alimentar. O presente trabalho pretende realizar uma reflexão relativamente à Febre Q, suas fontes de infeção e riscos associados à infeção. Coxiella Burnetti is a Gram-negative obligate intracellular bacterium that is responsible for Q fever in humans and Coxiellosis in animals. Domesticated ruminants are considered reservoirs of infection, constituting in that way the main source of infection for humans, wich occurs predominantly through inhalation of contaminated aerosols. Infected animals shed the bacteria onto the environment via parturition and miscarriage as well as faeces, urine, and milk. Bearing in mind that this bacterium proves to be highly stable, even in adverse environmental conditions, transmission may occur directly, indirectly, or even vectorially. Milk as a relevant route by which ruminants shed the bacteria and considering that unpasteurized milk and derived products are consumed in different parts of the world, the possibility of oral transmission, particularly through the ingestion of unpasteurized milk, is feasible but it still controversial within the scientific community. In Europe for instance there are numerous varieties of cheese, of very high gastronomic quality, which are manufactured with unpasteurized milk. This raises some concerns with regards to the emergence Q Fever outbrakes in human population as consequence of ingesting these products. Despite the subject of C. Bunetii ability to cause human infection by means of ingestion requiring additional investigations, several recent studies corroborated the presence and viability of the bacteria in several milk and cheese samples. Regardless of inconclusive evidence of infection occurrence resulting from the ingestion of unpasteurized milk and its by-products, special attention should be paid to occupational activities such as milking and others associated with the handling of raw milk. It is therefore pertinent to raise awareness of the relevance of pasteurization in promoting/guaranteeing food safety. The present work aims to reflect on Q fever, its infection sources, and associated risks.

Made available in DSpace on 2022-04-29T08:38:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2022-03-01 In the past decade, cases of Q fever have been reported in Brazil. Although the previous report of Coxiella burnetii in humans and animals, the knowledge about the occurrence of this pathogen in livestock in Brazil is scarce. This study aimed to search C. burnetii and possible coinfections in tissues of aborted bovine fetuses from Brazil. Tissue samples from seventy-six aborted bovine fetuses sent to the laboratory of molecular diagnosis of infectious diseases from 2013 to 2019 were evaluated by real-time PCR for C. burnetii. Overall, 9.2% (7/76) of the samples were positive for C. burnetii. Moreover, the molecular diagnostic history of our lab revealed the coinfection with Neospora spp. in three fetuses and the presence of histopathological features suggestive with fetal neosporosis in another one. The previous report of C. burnetii in humans and animals in the country, with the detection of C. burnetii from tissues of aborted bovine fetuses reported here, reinforces the neglected state of the disease in Brazil and raises the question of the role of the pathogen in reproductive disorders in national livestock. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Higiene Veterinária e Saúde Pública Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Botucatu Setor de Patologia Veterinária Departamento de Patologia Clínica Veterinária Universidade Federal do Rio Grande do Sul Universidade de São Paulo Anses Unité fièvre Q animale, Sophia Antipolis Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Higiene Veterinária e Saúde Pública Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Botucatu

Cattle are broadly deemed a source of Coxiella burnetii; however, evidence reinforcing their role in human infection is scarce. Most published human Q fever outbreaks relate to exposure to small ruminants, notably goats. Anti-phase II C. burnetii IgG and IgM were measured by indirect fluorescent antibody tests in 27 farm and veterinary diagnostic laboratory workers to ascertain whether occupational exposure to cattle aborting due to C. burnetii was the probable source of exposure. Four serological profiles were identified on the basis of anti-phase II IgG and IgM titres. Profile 1, characterised by high IgM levels and concurrent, lower IgG titres (3/27; 11.1%); Profile 2, with both isotypes with IgG titres higher than IgM (2/27; 7.4%); Profile 3 with only IgG phase II (5/27; 18.5%); and Profile 4, in which neither IgM nor IgG were detected (17/27; 63.0%). Profiles 1 and 2 are suggestive of recent C. burnetii exposure, most likely 2.5–4.5 months before testing and, hence, during the window of exposure to the bovine abortions. Profile 3 suggested C. burnetii exposure that most likely predated the window of exposure to aborting cattle, while Profile 4 represented seronegative individuals and, hence, likely uninfected. This study formally linked human Q fever to exposure to C. burnetii infected cattle as a specific occupational hazard for farm and laboratory workers handling bovine aborted material.

SARS-CoV-2 é o agente patogénico responsável pela atual pandemia COVID-19 que começou em dezembro de 2019, em Wuhan, China. Até maio de 2021, cerca de 166 milhões de casos e mais de 3 milhões de mortes foram registados mundialmente. Este vírus de genoma RNA tem uma transmissão humano-a-humano altamente eficiente por meio de disseminação de gotículas respiratórias e aéreas. A manifestação clínica pode ser ausente ou leve, mas em alguns casos ocorre pneumonia severa. Os gatos geralmente não apresentam sinais clínicos atuando como hospedeiros silenciosos. A febre Q é uma zoonose mundial causada pela bactéria Coxiella burnetii. A infeção em humanos é caracterizada por uma doença febril inespecífica que pode evoluir para quadros mais graves, como pneumonia e hepatite. Em ruminantes domésticos está associada a alterações reprodutivas, enquanto que em gatos é muitas vezes assintomática e, portanto, a maioria das infeções passa despercebida. A febre Q é endémica em Portugal, mas o papel dos gatos na epidemiologia da infeção não é claro. Vários estudos demonstraram o potencial zoonótico dos gatos para ambos os agentes patogénicos. Este estudo teve como objetivo a pesquisa serológica de SARS-CoV-2 e a pesquisa serológica e molecular de C. burnetii em gatas da região centro litoral de Portugal. Entre outubro de 2020 e março de 2021, um total de 47 gatas atendidas em centros de atendimento médico-veterinários no centro litoral de Portugal foram incluídas neste estudo. Amostras excedentes de soro ou plasma colhidas para realização de exames complementares, foram armazenadas e posteriormente testadas para a presença de anticorpos anti-SARS-CoV-2 e anti-C. burnetii com o método de ELISA. Em fêmeas sujeitas ao procedimento cirúrgico de ovariohisterectomia, foram realizados esfregaços uterinos para deteção molecular de C. burnetii através de PCR. Em relação ao SARS-CoV-2, a taxa de seropositividade foi 2.1% (IC 95%: 0.4 a 11,1%) (n=1), correspondente a uma gata de seis meses que apresentou S/P%=62,1%. Foram ainda obtidos dois resultados duvidosos (4.3%; IC 95%: 1.2 a 14.3%), com valores de S/P%=52,7% e 50,5%. Relativamente à pesquisa de anticorpos e DNA de C. burnetii, não foram obtidos resultados positivos. Na amostra estudada, a taxa de exposição em gatas foi considerada baixa para SARS-CoV-2 e inexistente para C. burnetii. No entanto, os gatos representam uma grande ameaça como agente zoonótico para humanos, evidenciando a importância da vigilância destes agentes, especialmente SARS-CoV-2 em gatos com proprietários positivos para COVID-19 e C. burnetii em gatos que contatem com ruminantes domésticos. SARS-CoV-2 is the pathogen behind the ongoing COVID-19 pandemic that began in December 2019 in Wuhan, China. By May 2021, close to 166 million cases and over 3 million deaths were recorded worldwide. This RNA genome virus has highly efficient human-to-human transmission through the dissemination of respiratory and aerial droplets. The clinical manifestation may be absent or mild, but in some cases severe pneumonia occurs. Cats usually do not show clinical signs, therefore may act as silent hosts. Q fever is a worldwide zoonosis caused by the bacterium Coxiella burnetii. Infection in humans is characterized by a nonspecific febrile illness that can progress to more severe conditions, such as pneumonia and hepatitis. In domestic ruminants it is associated with reproductive abnormalities, whereas in most cats it displays no symptoms, therefore most infections go unnoticed. Q fever is endemic in Portugal but the role of cats in the epidemiology of the infection is unclear. Several studies have demonstrated the zoonotic potential of cats for both pathogens. The aim of this study was the serological research of SARS-CoV-2 and the serological and molecular research of C. burnetii in female cats from the central coast region of Portugal. Between October 2020 and March 2021, a total of 47 female cats attended in veterinary medical centres in the central coast region of Portugal were enrolled in this study. Surplus serum or plasma samples collected for clinical purposes were stored and subsequently tested for the presence of anti- SARS-CoV-2 and anti-C. burnetii antibodies using the ELISA method. In females submitted to ovariohysterectomy, uterine swabs were collected for molecular detection of C. burnetii. Regarding SARS-CoV-2, the seropositivity rate was 2.1% (95% CI: 0.4 to 11.1%) (n=1), corresponding to a six-month-old cat who displayed a S/P% of 62.1%. Two doubtful results were also obtained (4.3%; 95% CI: 1.2 to 14.3%), with values of S/P%=52.7% and 50.5%. Regarding the investigation of antibodies or DNA of C. burnetii, no positive results were obtained. In the studied sample, the exposure rate in female cats was considered low in SARS-CoV-2 and nonexistent in C. burnetii. Nevertheless, cats still impose a big threat as a zoonotic agent for humans, thus the importance of surveillance of these pathogens. Especially SARS-CoV-2 in cats with COVID-19 positive owners and C. burnetii in cats that have contact with domestic ruminants.

Coxiella burnetii é o agente causador da zoonose Febre Q. Esta apresenta uma ocorrência mundial e os ruminantes domésticos são os hospedeiros mais comuns de C. burnetii e fonte da infeção humana. Os cães podem também ser infetados, contudo, o seu papel na epidemiologia desta bactéria ainda não está claro. Este estudo foi realizado em cadelas pacientes de centros de atendimento médico-veterinário das regiões norte e centro de Portugal, entre outubro de 2020 e março de 2021, para realização de ovariohisterectomia. Amostras de sangue/soro/plasma excedentes de análises de rotina e tecidos excedentes de procedimentos cirúrgicos foram colhidas e utilizadas para a realização dos testes serológicos e moleculares. Durante o período de estudo foram sujeitos a amostragem um total de 78 animais diferentes (n=78). As amostras de soro/plasma foram testadas para detetar a presença de anticorpos específicos anti-C. burnetii recorrendo a um teste ELISA comercial adaptado para várias espécies (ID Screen Q Fever Indirect Multispecies®, IDVet®). Na pesquisa de anticorpos, os resultados foram expressos em valores S/P%. Um S/P% > 50% foi classificado como positivo. Um total de sessenta (n = 60) animais foram testados para anticorpos anti-Coxiella burnetii. A amostra foi composta por trinta cães de raça pura e trinta animais de raça cruzados, com uma variação de idades entre cinco meses e quinze anos. Apenas um resultado positivo (S/P%= 54.96) foi detetado correspondendo a uma cadela de seis anos residente numa zona rural. A taxa de seropositividade foi assim determinada em 1,7% (CI 95%: 0,3 a 9,1%). Um resultado duvidoso (S/P% = 43%) foi detetado numa outra cadela de cinco anos residente numa zona semirrural. Para a deteção DNA de C. burnetii no tecido reprodutivo, foram realizados testes de qPCR em 67 amostras.Todas as amostras apresentaram um resultado negativo, não tendo sido evidenciada a presença de C. burnetii nas amostras testadas. A taxa de exposição encontrada nos animais testados foi muito baixa nos testes serológicos. Isto pode sugerir que as cadelas das regiões norte e centro de Portugal não são frequentemente expostas à bactéria ou por outro lado a amostragem de conveniência pode não ser representativa da população comprometendo as conclusões por enviesamento dos resultados. No entanto, o estudo e a vigilância da infeção por C. burnetii em animais de companhia podem ser uma mais-valia para prevenir surtos e a transmissão para tutores e veterinários em contato com animais infetados. Coxiella burnetii is the causative agent of the Q Fever zoonosis. It presents a worldwide occurrence and domestic ruminants are the most common hosts of C. burnetii and source of human infection. Dogs can also be infected, however, their role in the epidemiology of this bacterium is not clear. This study was conducted on female dogs presented to veterinary medical centers from the North and Centre regions of Portugal between October 2020 and March 2021 to perform ovariohysterectomy. Surplus blood samples from rotine analysis and tissues obtained from routine cirurgical preocedures were used for serological and molecular testing. During the study period a total of 78 different animals were sampled (n=78). Serums were tested for the presence of specific antibodies anti-C. burnetii using a commercial ELISA adapted for multi-species detection (ID Screen Q Fever Indirect Multispecies®, IDVet®). The results were expressed in S/P% values. An S/P% >50% were classified as positive. A total of 60 (n=60) animals were tested. The sample was composed of 30 pure-breed and 30 crossbreed dogs, with ages ranging from five months to fifteen years old. There was only one positive result (S/P%=54.96) corresponding to a six-year-old female dog living in a rural area. The observed exposure was 1.7% (95% CI: 0.3 to 9.1%). Another female dog with five years old living in a peri-rural area had a suspicious result (S/P=43%). To detect C. burnetii DNA in the reproductive tissue, qPCR tests were performed in 67 canine uteri. A negative result was obtained in all the samples meaning that the presence of C. burnetii was not evidenced. In the serological tests, the rate of exposure found in the tested dogs was low. It may suggest that the female dogs from the north and center regions of Portugal are not often exposed to the bacterium. On the other hand, the convenient sampling could not be representative of the population, compromising the conclusions by biased results. However, the study and surveillance of C. burnetii infection in companion animals could be an asset to prevent outbreaks, and the transmission to owners and veterinarians contacting with infected animals.

Submitted by Danilo Alves De França (daniloafmv@gmail.com) on 2021-08-24T18:07:38Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Danilo Alves de França.pdf: 958245 bytes, checksum: 783c8d3e7efff3404b30222ee5274cca (MD5) Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2021-08-25T16:32:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 franca_da_me_bot_par.pdf: 520383 bytes, checksum: 5defd6d3a43857ca9a3c3c8ce75932ef (MD5) Made available in DSpace on 2021-08-25T16:32:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 franca_da_me_bot_par.pdf: 520383 bytes, checksum: 5defd6d3a43857ca9a3c3c8ce75932ef (MD5) Previous issue date: 2021-06-30 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) A Febre Q e a Brucelose são zoonoses que causam febre e outros sinais clínicos sistémicos em humanos, tendo suas ocorrências negligenciadas e o diagnóstico diferencial para algumas doenças desconsiderado. Este estudo visou investigar a soropositividade de Coxiella burnetii e Brucella spp. em pacientes suspeitos de Dengue, atendidos em 38 municípios do Estado de São Paulo, Brasil. As amostras (n=604) foram obtidas por conveniência e pertenciam ao banco de soros do Instituto Adolfo Lutz. Para avaliar a positividade de C. burnetii, os soros foram submetidos à técnica de Imunofluorescência Indireta (IFA) utilizando protocolos de diagnóstico in-house e comerciais. Para avaliar a positividade de Brucella spp., os soros foram submetidos às técnicas de Soroaglutinação Rápida em Placa com Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), Soroaglutinação Lenta em Tubos (SAL) e 2-Mercaptoetanol (2-ME). Foram realizadas análises multivariadas a partir dos dados dos casos detectados. Do total, 129 pacientes apresentaram resultados positivos, indicando uma soropositividade de 21,36% (95% CI 18,15-24,85). Os títulos observados (mediana) indicam que os pacientes não estavam apenas expostos ao agente, mas também que haviam desenvolvido a doença. De todas as variáveis analisadas, a duração dos sintomas dos pacientes com Febre Q mostrou uma diferença significativa; com ênfase nos pacientes com 7 a 21 dias de sintomas (p-valor=0,0199). Não foi observada qualquer positividade para a Brucelose. Este estudo é a primeira descoberta significativa de pessoas soropositivas para a Febre Q no Estado de São Paulo e uma das primeiras no Brasil. A Febre Q consolida-se como um importante diagnóstico diferencial de doenças febris na região, reivindicando a atenção do governo e o investimento na saúde. Q fever and Brucellosis are zoonoses that cause fever and other systemic clinical signs in humans, having their occurrences neglected and the differential diagnosis for some diseases disregarded. This study aimed to investigate the seropositivity for Coxiella burnetii and Brucella spp. in patients suspected of Dengue, attended in 38 municipalities in the State of São Paulo, Brazil. The samples (n=604) were obtained by convenience and belonged to the Adolfo Lutz Institute serum bank. To evaluate C. burnetii positivity, sera were submitted to the Indirect Immunofluorescence technique (IFA) using in-house and commercial diagnostic protocols. To assess Brucella spp. positivity, sera were subjected to Rapid Plate Serum Agglutination with Buffered Acidified Antigen (AAT), Slow Tube Serum Agglutination (SAL) and 2-Mercaptoethanol (2-ME) techniques. Multivariate analyses of the data of detected cases were performed. Of the total, 129 patients showed positive results, indicating seropositivity of 21.36% (95% CI 18.15-24.85). The observed titers (median) indicate that, in addition to being exposed to the agent, the patients had developed the disease. Of all the variables analyzed, the duration of symptoms of Q fever patients showed a significant difference; with emphasis on patients with 7 to 21 days of symptoms (p-value=0.0199). No positivity for brucellosis was observed. This study is the first significant finding of persons seropositive for Q fever in São Paulo State and one of the first in Brazil. Q fever is consolidated as an important differential diagnosis of febrile illnesses in the region claiming the government attention and investment in health. 155904/2019-1

A Febre Q é uma zoonose causada pela bactéria Coxiella burnetii, que tem distribuição mundial, mas poucos casos humanos relatados no Brasil. Animais domésticos e de produção são reservatórios do agente etiológico. Em humanos a doença se caracteriza pela grande quantidade de manifestações clínicas e sistemas acometidos. O presente estudo objetivou traçar um perfil epidemiológico de indivíduos sorologicamente reagentes entre os anos de 2011 a 2017, com base nos dados coletados no Gerenciador de Ambiente Laboratorial (GAL) do Ministério da Saúde. As amostras reagentes foram selecionadas objetivando-se caracterizá-las quanto ao local de ocorrência, data e perfil demográfico. Verificou-se que o estado brasileiro que obteve maior frequência de amostras reagentes foi o do Rio de Janeiro 72,62 % (50/67), o ano com maior número de casos foi 2016 53,73 % (36/67), a zona urbana foi a com maior frequência 46,26 % (31/67) e a maioria dos reagentes eram homens 83,58 % (56/67) em idade adulta economicamente ativa 38,8% (21-30 anos). Ressaltamos neste trabalho a necessidade da realização de mais estudos de cunho investigativo, com vistas a esclarecer melhor o ciclo epidemiológico da doença e assim poder auxiliar os serviços de saúde quanto ao diagnóstico precoce, tratamento e tomada de decisão.

Made available in DSpace on 2021-12-23T14:39:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 8118_17638.pdf: 1665800 bytes, checksum: 1684647a4c1765d61190ebde958e13d7 (MD5) Previous issue date: 2021-03-23

Submitted by Camila De Fátima Nascimento (camila.f.nascimento@unesp.br) on 2021-02-18T21:17:23Z No. of bitstreams: 1 dissertação mestrado - Cam.pdf: 2564481 bytes, checksum: e07d7b423d02ebd6bd12e711ed5f2675 (MD5) Rejected by Adriana Cristina Damato (adriana.damato@unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 1 - Segundo a CAPES (Portaria nº 206, de 4 de setembro de 2018), o agradecimento deve conter exatamente a seguinte redação: O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001. 2 A Ficha catalográfica é um item obrigatório e deve ser inserida depois da página de rosto (antes do Certificado de Aprovação). Pode ser elaborada online através do site < https://www.biblioteca.unesp.br/ficha/ >. Ficha catalográfica: escreva o título em letra minúscula. Somente a primeira letra do título deve ser em caixa alta, exceto nomes próprios e siglas. Exemplo: Título: Análise do nível de qualidade de vida no trabalho. Caso o título seja muito extenso e a ficha desconfigurar quando for gerada, diminua o tamanho da fonte no sistema. Na Ficha Catalográfica, as palavras chave devem ser inseridas com a primeira letra de cada palavra maiúscula, a menos que a palavra chave for composta por mais de uma palavra, nesse caso somente a primeira letra da palavra composta será grafada maiúscula. A ficha catalográfica foi gerada com o nome da Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Araraquara. Favor alterar para Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Jaboticabal. Em relação aos coorientadores, insira apenas o primeiro na Ficha Catalográfica. 3-CERTIFICADO DE APROVAÇÃO Inserir o Certificado de Aprovação (item obrigatório), assinado pela banca e legível. De acordo com as "Normas para elaboração de dissertação e tese dos programas de pós-graduação" disponível na página da Pós-graduação, o Certificado de Aprovação deve vir após a Ficha Catalográfica. 4- Título do trabalho: Escreva o título e o subtítulo em letra "minúscula". Somente a primeira letra do título deve ser em caixa alta, exceto nomes próprios e siglas. (ISSO SE APLICA NA SUBMISSÃO DO REPOSITORIO NA DISSERTAÇÃO VC PRECISA VER COM O ORIENTADOR.) Exemplo: Título: Análise do nível de qualidade de vida no trabalho Subtítulo: um estudo em uma empresa familiar do setor médico-hospitalar 5- Retirar numeração o de linha da pag 42 até a pag 52. Agradecemos a compreensão. on 2021-02-22T15:26:50Z (GMT) Submitted by Camila De Fátima Nascimento (camila.f.nascimento@unesp.br) on 2021-10-18T22:01:18Z No. of bitstreams: 1 dissertação_mestrado.pdf: 2591885 bytes, checksum: 361ac47c203362e9e2219ca87cc17f9d (MD5) Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2021-10-19T17:07:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nascimento_cf_me_jabo.pdf: 2644619 bytes, checksum: 20e50b39b22a713b6dc3cd4f1ee4c686 (MD5) Made available in DSpace on 2021-10-19T17:07:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nascimento_cf_me_jabo.pdf: 2644619 bytes, checksum: 20e50b39b22a713b6dc3cd4f1ee4c686 (MD5) Previous issue date: 2020-12-18 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Coxiella burnetii é o agente etiológico de uma zoonose denominada febre Q. Essa infecção, caracterizada por sinais clinicos agudos e crônicos inespecíficos, é transmitida ao humano, principalmente, por aerossóis de fezes, urina, leite e restos placentários ou consumo de leite e derivados provenientes de animais infectados. Embora passivel de ocorrer, a transmissão por produtos lácteos é pouco descrita na literatura. O presente trabalho objetivou investigar a presença de DNA de C. burnetii em queijos Minas Artesanais comercializados informalmente em pequenos, médios e grandes mercados no Município de Patos de Minas-Minas Gerais, sudeste do Brasil. Para tal, utilizou-se a tecnica de PCR em tempo real quantitativa (qPCR) baseada no gene IS1111. Foram realizadas 150 entrevistas de consumidores de produtos lácteos para análise do perfil. Os resultados mostraram que 4,6% (4/87) das amostras foram positivas para C. burnetii na qPCR, com 99,84% de identidade para o gene 16S. Nas entrevistas, foram observados que 95,3% (143/150) dos entrevistados consomem leite e derivados; 50% (75/150) consomem leite e queijo tipo Minas Artesanal fresco pelo menos uma vez ao dia; 62% (93/150) não observam os carimbos de inspeção nas embalagens na hora da compra; e, 81,3% (122/150) não sabem o significado desses carimbos. Dessa forma, a presença de DNA de C. burnetii nos queijos analisados e o consumo desse produto comercializado informalmente, ascende um alerta para o risco de transmissão de febre Q na população que consome esse tipo de produto. Coxiella burnetii is the etiological agent of a zoonosis called Q fever. This infection characterized by acute and chronic non-specific clinical signs. It is transmitted to humans, mainly by aerosols from feces, urine, milk and placental remains or consumption of milk and derived from infected animals. Although likely to occur, transmission by dairy products is poorly recorded in the literature. The present study aimed to investigate the presence of DNA from C. burnetii in cheeses Minas Artisanal marketed informally in small, medium and large markets in the Municipality of Patos de Minas Gerais, southeastern Brazil. To do this, use a quantitative real-time PCR (qPCR) technique that is not based on the IS1111 gene. Were 150 interviews of consumers of dairy products were carried out for profile analysis. The results showed that 4.6% (4/87) of the samples were positive for C. burnetii in qPCR, with 99.84% of identity for the 16S rRNA gene. In the interviews, 95.3% (143/150) of the interviewees consumed milk and dairy products were observed; 50% (75/150) consumption cheeses Mins Artisanal Minas in nature milk at least once a day; 62% (93/150) did not observe the inspection stamps on the packaging at the time of purchase; and 81.3% (122/150) do not know the meaning of these stamps. Thus, the presence of C. burnetii DNA in the analyzed products and the consumption of this product sold informally, raises an alert for the risk of transmission of Q fever in the population that consumes this type of product. CAPES: 001

FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais Introdução: A febre Q é uma zoonose de distribuição mundial causada pelo patógeno Coxiella burnetii, uma bactéria que, além de apresentar resistência e estabilidade ambiental, é um dos agentes mais infecciosos ao ser humano. Sua principal forma de transmissão à população humana ocorre através da inalação de aerossóis contaminados com produtos de animais infectados, principalmente bovinos, caprinos e ovinos. A infecção em humanos apresenta um amplo espectro de manifestações, desde casos assintomáticos até complicações graves e fatais. Por apresentarem um quadro clínico semelhante ao da dengue na fase aguda, associado ao seu desconhecimento por parte dos profissionais de saúde, casos de febre Q podem estar sendo equivocadamente diagnosticados e tratados como dengue. Fato este que aumenta os custos do sistema público de saúde, assim como o risco da ocorrência da febre Q crônica, especialmente em pacientes com lesão de válvula cardíaca e imunocomprometidos. Objetivo: Investigar a prevalência de febre Q em casos suspeitos de dengue em Minas Gerais, investigar sua soroprevalência, avaliar os fatores associados a essa zoonose, descrever o perfil epidemiológico dos pacientes e comparar o método de ELISA frente ao método padrão ouro de diagnóstico da febre Q, a Imunofluorescência Indireta (IFI). Metodologia: Foram selecionadas 437 amostras, únicas, de soro de pacientes com suspeita de dengue, coletadas entre um e dez dias de sintomas, de diferentes municípios de Minas Gerais, enviadas à Fundação Ezequiel Dias no período entre janeiro de 2017 e agosto de 2018 para o diagnóstico da dengue e que apresentaram resultado negativo. Os testes realizados para investigação de C. burnetii (febre Q) foram: Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR), Imunofluorescência Indireta e ELISA. Trata-se de um estudo transversal de prevalência. Os resultados encontrados foram analisados por meio de estatística descritiva. Resultados: Não foi detectado o DNA de C. burnetii em nenhuma das 437 amostras de soro analisadas pelo método de qPCR. Pelo método de IFI, 25 amostras (5,72%) foram reativas para pelo menos uma classe de anticorpos anti-C. burnetii e apresentaram títulos de anticorpos abaixo do ponto de corte para considerar a febre Q ativa. A mesorregião Metropolitana de Belo Horizonte concentra a maior parte desses pacientes reativos. Ao investigar os fatores associados, os bovinos representaram mais de 80% em relação à soma dos efetivos de cabeças de bovino, caprino e ovino dos municípios que apresentaram pacientes reativos. A análise do parâmetro “zona (área) de moradia” do perfil epidemiológico dos pacientes reativos demonstrou que 12,50% e 5,19% dos pacientes que residem na zona rural e urbana, respectivamente, foram reativos. A sensibilidade, em uma análise geral, do método de ELISA foi de 13,04%, enquanto que a especificidade foi de 98,55%. Conclusão: Esses resultados indicam que 5,72% dos pacientes tiveram uma exposição prévia ao agente causador da febre Q e que residir na zona rural aumenta as chances a essa exposição. Além disso, demonstram que esse patógeno apresenta circulação em humanos no estado de Minas Gerais. Entre os principais animais relacionados à transmissão de C. burnetii aos seres humanos, os bovinos foram o principal fator associado. O método de ELISA empregado não é indicado como método de triagem para o diagnóstico sorológico da febre Q, podendo ser utilizado como método confirmatório caso algum resultado negativo obtido por outro método seja duvidoso. Por fim, a inclusão da febre Q como uma doença de notificação compulsória em humanos e a atuação conjunta dos setores de saúde humana e de saúde animal no enfrentamento a essa zoonose, numa perspectiva de saúde única (One Health), contribuirão para que a febre Q deixe de ser negligenciada e seja mais bem investigada no Brasil, reduzindo, assim, os prejuízos causados por ela. Introduction: Q fever is a zoonosis of worldwide distribution caused by the pathogen Coxiella burnetii, a bacterium that, besides presenting resistance and environmental stability, is one of the most infectious agents to human beings. Its main form of transmission to human population occurs through the inhalation of aerosols contaminated with products from infected animals, mainly cattle, goats and sheep. Human infection has a wide spectrum of manifestations, from asymptomatic cases to serious and fatal complications. As it presents a clinical picture similar to dengue in the acute phase, associated with its lack of knowledge on the part of health professionals, cases of Q fever may be mistakenly diagnosed and treated as dengue. This fact which increases the costs of the public health system, as well as the risk of the occurrence chronic Q fever, especially in patients with heart valve injury and immunocompromised. Objective: Investigate the prevalence of Q fever in suspected cases of dengue in Minas Gerais, investigate its seroprevalence, evaluate the factors associated with this zoonosis, describe the epidemiological profile of patients and compare the ELISA method against the gold standard method of Q fever diagnosis, Indirect Immunofluorescence (IFI). Methodology: 437 serum unique samples from patients with suspected dengue were selected, collected between one and ten days of symptoms, from different municipalities of Minas Gerais, sent to the Ezequiel Dias Foundation in the period between January 2017 and August 2018 for diagnosis dengue and that presented negative result. The tests performed to investigate C. burnetii (Q fever) were: Real-Time Polymerase Chain Reaction (qPCR), Indirect Immunofluorescence and ELISA. This is a cross-sectional study of prevalence. The results found were analyzed using descriptive statistics. Results: Was not detected the DNA from C. burnetii in any of the 437 serum samples analyzed by the qPCR method. By the IFI method, 25 samples (5.72%) were reactive for at least one class of antibodies anti-C. burnetii and showed antibody titers below the cutoff to consider Q fever active. The mesoregion Metropolitan of Belo Horizonte concentrates most of these reactive patients. To investigating the associated factors, the cattle represented more than 80% in relation to the sum of the head of cattle, goat and sheep of the municipalities that presented reactive patients. The analysis of the parameter “zone (area) of housing”, of the epidemiological profile of reactive patients, showed that 12.50% and 5.19% of patients residing in rural and urban areas, respectively, were reactive. The sensitivity, in a general analysis, of the ELISA method was 13.04%, while the specificity was 98.55%. Conclusion: These results indicate that 5.72% of the patients had previous exposure to the causative agent of Q fever and that living in the countryside increases the chances of such exposure. In addition, they demonstrate that this pathogen has circulation in humans in the state of Minas Gerais. Among the main animals related to the transmission of C. burnetii to humans, cattle were the main associated factor. The ELISA method employed is not indicated as a screening method for the serological diagnosis of Q fever, and can be used as a confirmatory method if any negative result obtained by another method is doubtful. Finally, the inclusion of Q fever as a compulsory notification disease in humans and the joint action of the human health and animal health sectors in the coping against this zoonosis, in a "One Health" perspective, will contribute to the Q fever to stop neglected and be better investigated in Brazil, thus reducing the damage caused by it.

Tese no âmbito do Doutoramento em Ciências Farmacêuticas, Ramo de Microbiologia e Parasitologia e apresentada à Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. A Febre Q é uma doença zoonótica causada por Coxiella burnetii com uma ocorrência mundial. A Febre Q origina normalmente uma infeção assintomática, podendo manifestar-se como uma síndrome gripal com recuperação espontânea. Contudo, por vezes, formas agudas podem causar quadros mais graves como pneumonia, aborto ou meningite. Complicações a longo prazo, como endocardite e problemas osteoarticulares, podem também ocorrer com menor frequência. O espectro de hospedeiros recetivos a C. burnetii é largo. Porém, os ruminantes domésticos são considerados a principal fonte de infeção para humanos, excretando bactérias através de produtos do parto e aborto, do leite e das fezes. O risco que a Febre Q representa para humanos é reconhecido desde a sua primeira descrição, em 1937 na Austrália. E, após um dos maiores surtos alguma vez reportados, ocorrido na Holanda (2007-2011), as autoridades de saúde, nomeadamente a European Food and Safety Authority (EFSA), alertaram para as incertezas existentes na compreensão da epidemiologia da Febre Q. Num relatório científico publicado pela EFSA em 2010, foi referido que, apesar da larga distribuição de C. burnetii entre ruminantes domésticos, a prevalência real de infeção não era conhecida em muitos países; e que a falta de metodologias harmonizadas entre os estudos existentes dificultava a comparação de dados. Além disso, foi realçada a falta de conhecimento sobre o papel de outras espécies, como animais domésticos e silvestres, ou mesmo vetores, na epidemiologia da doença. Em Portugal, a informação sobre a epidemiologia da Febre Q era ainda mais escassa. Apenas alguns estudos reportando a ocorrência de infeção em humanos, em ruminantes domésticos e em animais de zoo estavam publicados e a prevalência de infeção nas populações animais em Portugal permanecia pouco clara. Para reunir informação sobre a epidemiologia de C. burnetii em Portugal, o presente projeto teve como objetivo estimar a prevalência de infeção em diferentes espécies animais (animais domésticos de companhia e de produção, e animais silvestres), mas também identificar potenciais reservatórios de infeção em meio urbano e em meio rural e também em vetores (ixodídeos), e ainda caracterizar geneticamente as estirpes circulantes comparando com estirpes identificadas internacionalmente. Para atingir estes objetivos foi realizado um rastreio serológico em animais domésticos e silvestres; em seguida foi efetuada a pesquisa de DNA de C. burnetii em amostras biológicas colhidas em explorações ou em animais seropositivos, e ainda em ixodídeos; e por fim as estirpes de C. burnetii detetadas foram geneticamente caracterizadas. As metodologias utilizadas foram harmonizadas com as metodologias utilizadas no Laboratório de Referência para a Febre Q sito em França e seguindo as recomendações da EFSA. Os resultados obtidos revelaram que em Portugal, independentemente do tipo de produção, a seroprevalência ao nível da exploração é mais elevada em pequenos ruminantes (32,6% em explorações de carne e 51,6% em explorações de leite) do que em bovinos (23,5% em explorações de carne e 37,8% em explorações de leite). Apesar de não ter sido evidenciada a exposição em suínos domésticos, demonstrou-se que a infeção por C. burnetii não está limitada aos ruminantes domésticos, tendo sido demostrada a exposição em animais de companhia, nomeadamente em cães (12,6%) e gatos (17,2%); em javalis (5,6%); e em veados (30,4%). No entanto, o DNA de C. burnetii foi apenas detetado em ruminantes domésticos. A evidência de excreção de C. burnetii foi superior (20%) em explorações de bovinos do que em pequenos ruminantes (6,3%). Individualmente, a proporção de animais excretores foi superior em caprinos (15%), seguindo-se os bovinos (10,8%) e por fim os ovinos (3,6%). O leite surgiu como a via de excreção mais importante (10,9%) comparativamente com zaragatoas vaginais (2,1%). C. burnetii parece ser um agente importante mesmo em ruminantes domésticos aparentemente saudáveis sendo o leite uma via de excreção importante. Apesar da informação controversa sobre o risco de infeção associado ao consumo de leite não pasteurizado, é necessário considerar as atividades ocupacionais que implicam o contacto com ruminantes domésticos em lactação e/ou que requerem a manipulação do leite e seus produtos derivados. A caracterização molecular de C. burnetii obtida a partir de amostras biológicas permitiu identificar seis novos perfis MLVA-6. Estes novos genótipos apresentam-se no mesmo cluster que genótipos identificados em bovinos de outros países Europeus e em infeções agudas de humanos em Portugal. Globalmente, os resultados obtidos demonstram que em Portugal, C. burnetii circula entre animais domésticos e silvestres. Adicionalmente, a relação próxima entre os genótipos identificados neste estudo e os genótipos identificados em bovinos de outros países da Europa sugere que existe um pool comum de estirpes de C. burnetii que circulam entre bovinos na Europa e que podem estar associados com a infeção em humanos. Finalmente, este estudo realça a necessidade de uniformização de metodologias para a realização de estudos epidemiológicos. Tal é fundamental para a comparação de resultados permitindo abranger diferentes cenários quando é necessário implementar planos de controlo. Q fever is a zoonotic disease caused by Coxiella burnetii that occurs worldwide. It causes usually an asymptomatic infection or manifests as a flu-like syndrome with spontaneous recovery. Sometimes, acute Q fever can cause serious problems like pneumonia, abortions or meningitis, and long-term complications such as endocarditis and osteo-articular problems may occur in a lower percentage of patients. A wide range of hosts can be infected by C. burnetii. Domestic ruminants are considered as the main source of human infection; shedding bacteria principally through birth and abortion products, milk and faeces. The risk that Q fever may represent to humans is recognized since its first description in 1937 in Australia; but after the largest ever reported Q fever outbreak in the Netherlands (2007-2011); public health authorities, namely the European Food and Safety Authority (EFSA), warned about the uncertainties that still exist in the understanding of Q fever epidemiology, including amongst the domestic ruminant populations throughout Europe. Some relevant facts pointed in a scientific report published by EFSA in 2010, mentioned that despite the knowledge about the wide distribution of C. burnetii among domestic ruminants, the true prevalence of infection is not known in many countries; and the lack of harmonized methodologies between the different existing studies hinder data comparison. Moreover, the role of other species, including domestic and wild animals, and even vectors; in the epidemiology of the disease is very limited. In Portugal, epidemiological data on Q fever is even scarcer. Only, a few studies reporting the infection in humans, in domestic ruminants and in zoo animals have been published and the prevalence of Q fever in Portuguese animal populations remains unclear. To gather information about C. burnetii epidemiology in Portugal, the present project aimed to provide information about Q fever prevalence among different animal species (domestic, companion and wild animals), but also to identify potential reservoirs in urban and rural environment and vectors (ticks), and to genetically characterize the circulating strains and compare them with those identified in other countries. To achieve our global objectives, a serologic survey was conducted in domestic and wild animals to screen for Q fever; then C. burnetii DNA was detected in biological samples collected from seropositive herds or animals, and from ticks; and finally, C. burnetii strains were genetically characterized. Harmonized methodologies used in the French Reference Laboratory for Q fever were used, following the recommendations drawn by EFSA. The results obtained showed that in Portugal, independently of the type of production, herd seroprevalence is higher in small ruminants (32.6% meat herds and 51.6% dairy herds) than in cattle (23.5% meat herds and 37.8% dairy herds). Despite the non-evidence of exposure in domestic pigs, C. burnetii infection is not restricted to domestic ruminants as an exposure was demonstrated in companion animals, namely in dogs (12.6%) and in cats (17.2%); in feral pigs (5.6%); and in red deer (30.4%). However, C. burnetii DNA was only detected in domestic ruminants. The shedding of C. burnetii was demonstrated in cattle herds a higher percentage (20%) than in small ruminant herds (6.3%). Individually, the proportion of animal shedders was higher in goats (15%), followed by cattle (10.8%) and then sheep (3.6%). Milk appeared as the most important shedding route (10.9%) compared to vaginal swabs (2.1%). C. burnetii seems to be an important threat even in apparently healthy domestic ruminant populations, and milk appeared as an important shedding route. Despite the controversial data about the risk of infection by the consumption of unpasteurized milk, special attention should be given to occupational activities requiring contact with lactating domestic ruminants, and those requiring the manipulation of milk and milk products. The molecular characterization of C. burnetii obtained from clinical samples allowed the identification of six novel MLVA-6 profiles. These novel genotypes clustered with genotypes identified in cattle from other European countries and in Portuguese acute human infections. Overall, our results demonstrate that in Portugal C. burnetii circulates among several domestic and sylvatic animals. Additionally, the close relation of the herein identified genotypes to those identified in cattle from other European countries suggests that a common pool of C. burnetii strains circulates in cattle in Europe and might be linked to human infection. Finally, this study highlights that harmonized methodologies are needed for epidemiological studies. It is central for comparing results from different studies and to cover different scenarios when controlling programs are needed.

Submitted by Diego Carlos de Souza Zanatto (diegozanatto94@hotmail.com) on 2019-05-31T12:29:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Diego Texto Final.pdf: 1955017 bytes, checksum: 4e54b26100740e5b2c703595f8eee44a (MD5) Rejected by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 1 - O agradecimento à CAPES deve ter a seguinte redação: O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001 2 - Falta o abstract (resumo em inglês) no repositório. 3 - A ficha catalográfica está desconfigurada (não coube tudo no espaço destinado), reduzir o tamanho da fonte que dá certo. 4 - Falta a folha de aprovação da banca. Agradecemos a compreensão. on 2019-05-31T16:50:12Z (GMT) Submitted by Diego Carlos de Souza Zanatto (diegozanatto94@hotmail.com) on 2019-05-31T18:26:24Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Diego Final (Certificado + Aprovacao).pdf: 3630079 bytes, checksum: 91fbac77555e0e273255cd8556cdd281 (MD5) Rejected by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 1 - Na ficha catalográfica o local de defesa está Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara, trocar por Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias de Jaboticabal. Agradecemos a compreensão. on 2019-06-03T12:08:20Z (GMT) Submitted by Diego Carlos de Souza Zanatto (diegozanatto94@hotmail.com) on 2019-06-04T12:42:30Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Diego.pdf: 3630184 bytes, checksum: 8aeae03a3dce7770c481474d7329111f (MD5) Approved for entry into archive by Tatiana Camila Gricio (tatiana.gricio@unesp.br) on 2019-06-04T12:57:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 zanatto_dcs_me_jabo.pdf: 3630184 bytes, checksum: 8aeae03a3dce7770c481474d7329111f (MD5) Made available in DSpace on 2019-06-04T12:57:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 zanatto_dcs_me_jabo.pdf: 3630184 bytes, checksum: 8aeae03a3dce7770c481474d7329111f (MD5) Previous issue date: 2019-05-02 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Coxiella burnetii é uma bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória, que além de considerado agente zoonótico causador da Febre Q em vários países do mundo, foi classificado como um potencial agente de bioterrorismo. Bovinos, ovinos e caprinos representam as fontes de infecção mais frequentemente associadas à ocorrência da enfermidade em humanos, entretanto animais selvagens também podem atuar como importantes fontes de infecção. Desta forma, o presente estudo tem como objetivo investigar a ocorrência de Coxiella burnetii em ruminantes domésticos e selvagens no Brasil. Para tal, 188 amostras de sangue de cervídeos (143 Blastocerus dichotomus, 11 Ozotocerus bezoarticus, 27 Mazama gouazobira, 4 M. bororo e 3 M. americanum), capturados nos estados de MS, SP e MG, foram submetidas à extração de DNA e, subsequentemente, à nested (n)PCR para C. burnetii baseada no elemento de inserção repetitivo IS1111 do gene heat shock protein (htpAB). Além disso, 169 amostras de soro de cervídeos foram submetidas à Reação de Imunofluorescência para detecção de anticorpos IgG anti-C. burnetii. Amostras de soros de bovinos apresentando desordens reprodutivas foram submetidas às Reações de Vírus Neutralização para BoHV-1 e BVD, Soroaglutinação Microscópica para Leptospira spp., Reação de Imunofluorescência Indireta for C. burnetii e Toxoplasma gondii, e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática Indireto para Neospora caninum e Trypanosoma vivax. Todas as amostras de sangue mostraram-se negativas na nPCR, evidenciando ausência de DNA circulante de C. burnetii nos cervídeos amostrados. Alternativamente, a concentração de DNA do agente poderia estar abaixo do limiar da técnica de nPCR utilizada. Na RIFI, 5,32% (9/169) dos cervídeos (7 B. dichotomus e dois M. gouazoubira amostrados no MS) mostraram-se positivos frente ao antígeno de C. burnetii, com títulos variando entre 256 e 16384. A soropositividade para C. burnetii em bovinos foi de 13,7%, com títulos de 128 a 131,072; 57,8% para BoHV-1, com títulos entre 2 a 1,024; 47,1% para BVDV-1a, com títulos de 10 a 5,120; 89,2% para N. caninum; 50% para T. vivax; 52,0% para Leptospira spp., com títulos entre 100 a 800 (sorovares: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona e Icterohaemorrhagiae); e 19,6% para T. gondii com título de 40. Este é o primeiro estudo que evidencia a soropositividade para C. burnetii associada à presença de anticorpos para o Vírus da Rinotraqueíte infecciosa bovina (BoHV) e da Diarreia Viral Bovina, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii e T. vivax em bovinos. Ainda, trata-se do primeiro estudo a mostrar evidência sorológica de exposição à C. burnetii em cervídeos na América Latina. Conclui-se então que há evidências da circulação de Coxiella burnetii entre cervídeos de vida livre e bovinos no Brasil. Coxiella burnetii is an obligate intracellular Gram-negative bacterium, which, in addition to being considered a zoonotic agent that causes Q fever in several countries of the world, has been classified as a potential bioterrorism agent. Cattle, sheep and goats represent the most frequent sources of infection associated with the occurrence of the disease in humans, however, wild animals can also act as important sources of infection. In this way, the present study aims to investigate the occurrence of Coxiella burnetii in domestic and wild ruminants in Brazil. To this end, 188 cervus blood samples (143 Blastocerus dichotomus, 11 Ozotocerus bezoarticus, 27 Mazama gouazobira, 4 M. bororo and 3 M. americanum), captured in the states of MS, SP and MG, were subjected to DNA extraction and , subsequently to the nested (n) PCR for C. burnetii based on the heat shock protein (htpAB) gene IS1111 insertion element. In addition, 169 cervical serum samples were submitted to Immunofluorescence Reaction for the detection of anti-C. burnetii IgG antibodies. Adicionaly, samples of bovine sera presenting reproductive disorders were submitted to the Virus Reaction Neutralization for BoHV-1 and BVD, Microscopic Soroagglutination for Leptospira spp., Indirect Immunofluorescence Reaction for C. burnetii and T. gondii, and Indirect Enzyme Immunoabsorption Assay for N caninum and T. vivax. All blood samples were negative in nPCR, evidencing absence of circulating DNA of C. burnetii in the sampled cervids. Alternatively, the DNA concentration of the agent could be below the threshold of the nPCR technique used. In IFAT, 5.32% (9/169) of cervids (7 B. dichotomus and 2 M. gouazoubira sampled in MS) were positive against C. burnetii antigen, with titers varying between 256 and 16384. Seropositivity for C. burnetii in cattle was 13.7%, with titers from 128 to 131,072; 57.8% for BoHV-1, with titres ranging from 2 to 1,024; 47.1% for BVDV-1a, with titers from 10 to 5,120; 89.2% for N. caninum; 50% for T. vivax; 52.0% for Leptospira spp., with titres ranging from 100 to 800 (serovars: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona and Iterotoemorrhagiae); and 19.6% for T. gondii with a titer of 40. This is the first study to show the seropositivity to C. burnetii associated with the presence of antibodies to bovine infectious rhinotracheitis virus (BoHV) and Bovine Viral Diarrhea, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii and T. vivax in cattle. Still, this is the first study to show serological evidence of exposure to C. burnetii in cervids in Latin America. It is concluded that there is evidence of Coxiella burnetii circulation between free-living cervids and cattle in Brazil. 132674/2017-3

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de anticorpos contra a Coxiella burnetii em bovinos de explorações leiteiras da ilha Terceira e investigar os fatores de risco que contribuem para a infeção e disseminação da febre Q no rebanho. As amostras de leite de tanque (BTM) foram obtidas, a partir de 132 explorações leiteiras selecionadas aleatoriamente e analisadas utilizando um kit ELISA. A prevalência aparente foi de 75,8 % (IC 95%: 67,8-82,3). A proporção de rebanhos negativos e duvidosos foi de 18,2 % (12,5-25,6%) e 6% (3,1-11,5%), respetivamente. Os resultados demonstraram uma distribuição uniforme dos casos positivos pelos dois concelhos da ilha Terceira. Na análise univariada, três fatores foram identificados por apresentarem uma associação significativa com a presença de anticorpos anti-C. burnetii em BTM, nomeadamente o tamanho do rebanho (> 50 animais), o contacto dos animais com bovinos de outras explorações e a convivência direta dos animais com cães ou gatos dentro da exploração. Pelo que sabemos, este é o primeiro estudo a relatar a infeção por C. burnetii em bovinos leiteiros na Região Autónoma dos Açores, mostrando que a febre Q é bastante prevalente na ilha Terceira. ABSTRACT - Prevalence and risk factors for Coxiella burnetii in Terceira Island dairy cattle herds. - The main goal of this study was to determine the prevalence of antibodies against Coxiella burnetii in cattle from dairy farms in Terceira Island and investigate the risk factors which contribute to the infection and dissemination of Q fever in the herd. Bulk tank milk (BTM) samples were obtained from 132 randomly selected dairy farms and analyzed using an ELISA kit. The apparent prevalence was of 75,8% (IC 95%: 67,8- 82,3). The proportion of negative and inconclusive herds was of 18,2% (12,5-25,6%) and 6% (3,1-11,5%) respectively. The results demonstrated a uniform distribution of positive cases in both counties of Terceira Island. In the univariate analyses, three factors were identified as presenting a significant association with the presence of anti- C. burnetii antibodies in BTM, namely the size of the herd (>50 animals), the contact of the animals with bovines from other farms and the direct interaction of the animals with dogs or cats within the farm. As much as we know, this is the first study reporting the infection by C. burnetii in dairy cattle in Região Autónoma of the Azores, showing that Q fever is quite prevalent in Terceira Island. N/A

Submitted by Mateus de Souza Ribeiro Mioni (mateusmioni@fmvz.unesp.br) on 2019-02-18T16:23:44Z No. of bitstreams: 1 SOROLOGIA E DETECÇÃO MOLECULAR DE Coxiella burnetii EM BOVINOS NO ESTADO DE SÃO PAULO, BRASIL.pdf: 2586633 bytes, checksum: d0a8b8194cdf1a60ac98ef94abbd1e4c (MD5) Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2019-02-19T12:27:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mioni_msr_dr_bot_par.pdf: 238859 bytes, checksum: 4634a742bf992235b00186b2bf9a46d7 (MD5) Made available in DSpace on 2019-02-19T12:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mioni_msr_dr_bot_par.pdf: 238859 bytes, checksum: 4634a742bf992235b00186b2bf9a46d7 (MD5) Previous issue date: 2018-12-20 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Coxiella burnetii é uma bactéria intracelular obrigatória responsável por causar a febre Q em humanos, mas também é conhecida como coxielose em animais. No Brasil, pouco é sabido a respeito da epidemiologia da enfermidade. O presente estudo objetiva estabelecer a prevalência do patógeno em bovinos abatidos no estado de São Paulo, além da detecção molecular em soro e fetos de bovinos. A sorologia de 1515 amostras de bovinos coletadas em frigoríficos foi realizada por reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para anticorpos anti-C. burnetii. Reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) visando detectar o gene IS1111, foi utilizada para o diagnóstico molecular de C. burnetii em amostras de soro e fetos de bovinos. A prevalência aparente para anticorpos anti-C. burnetii em bovinos foi de 23,8% [IC95%=21,7% – 25,9%] (n=360), e a prevalência real de 20,0% [IC95%=17,8 – 22,3%]. A qPCR foi realizada nas 360 amostras soropositivas e apresentou resultado positivo em 92 amostras (25,6% [IC95%=20,1% – 28,8%]), demonstrando a presença do micro-organismo na corrente sanguínea dos bovinos amostrados. Entre as 28 amostras de fetos bovinos analisados, 10,7% (n=3) foram positivas na qPCR, confirmado por sequenciamento. A análise por qPCR quantitativo das amostras de abortamentos indicaram concentração entre 500 – 104 células por grama de tecido. Análise de multilocus de repetições em tandem de número variável (MLVA) e Multispacer Sequence Typing (MST) das amostras de fetos e do controle positivo revelaram novas estirpes de C. burnetii circulando no Brasil e na Argentina. Os resultados aqui apresentados evidenciam a circulação da bactéria alertando para o risco para saúde pública. Coxiella burnetii is an obligate intracellular bacterium responsible for causing Q fever in humans but is also known as coxiellosis in animals. In Brazil, little is known about the epidemiology of the disease. The present study aims to establish the prevalence of the pathogen in cattle slaughtered in the state of São Paulo, in addition to molecular detection in bovine serum and fetuses. The serology of 1515 bovine samples collected in slaughterhouses was performed by indirect immunofluorescence reaction (IFA) for anti-C. burnetii antibodies. Real-time polymerase chain reaction (qPCR) to detect the IS1111 gene was used for the molecular diagnosis of C. burnetii in bovine serum and fetal samples. The apparent prevalence of anti-C. burnetii antibodies in cattle was 23.8% [95% CI = 21.7% - 25.9%] (n = 360) and the true prevalence was 20.0% [95% = 17.8 - 22.3%]. The qPCR was performed in the 360 seropositive samples and presented a positive result in 92 samples (25.6% [95% CI = 20.1% - 28.8%]), demonstrating the presence of the microorganism in the blood stream of the sampled cattle. Among the 28 samples of bovine fetuses analyzed, 10.7% (n = 3) were positive in qPCR, confirmed by sequencing. Quantitative qPCR analysis of the abortion samples indicated concentration between 500-104 cells per gram of tissue. Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis (MLVA) and Multispacer Sequence Typing (MST) from fetal samples and positive control revealed new strains of C. burnetii circulating in Brazil and Argentina. The results presented here evidenced the circulation of the bacterium alerting to the risk to public health. CAPES PROEX: 88882.180556/2018-01 CAPES PGCI: 88887.137563/2017-00

Coxiella burnetii is a zoonotic agent transmitted mainly by small ruminants. In Brazil the disease has been classified as a notifiable disease since 2013, when human cases were reported. This study aimed to identify risk factors associated with the presence of anti- Coxiella burnetii antibodies in goats and sheep in a semiarid region of Northeastern Brazil. Sera of 412 goats and 403 sheep from municipality of Petrolina, Pernambuco, were examined by the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) against antigens of C. burnetii. Information about management variables (independent variables) that could be associated with the presence of the microorganism (dependent variables) were obtained from the supervisor of each farm. It was determined that 2.2% (9/412) of the goats and 2.1% (9/403) of the sheep had antibodies reactive to C. burnetii. The presence of anti-C. burnetii antibodies was associated with the dry area of the Sequeiro (a region in the northern part of the municipality of Petrolina) (P = 0.025), male sheep (P = 0.020), and intensive goat breeding (P = 0.005). This study therefore showed the presence of anti-C. burnetii antibodies in goat and sheep, confirming for the first time that this agent is likely circulating among goat herds in the Caatinga Biome, semi-arid of Brazil. Resumo Coxiella burnetii é um agente zoonótico transmitido principalmente por pequenos ruminantes. No Brasil, a doença foi classificada como de notificação compulsória desde 2013, quando casos humanos foram relatados. O objetivo deste estudo foi identificar os fatores de risco associados à presença de anticorpos anti-Coxiella burnetii em caprinos e ovinos em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Este estudo envolveu um inquérito sorológico de 412 caprinos e 403 ovinos em fazendas do município de Petrolina, no estado de Pernambuco. Os soros foram examinados pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) contra antígenos de C. burnetii . Informações sobre variáveis de manejo (variáveis independentes) que poderiam estar associadas à presença do microrganismo (variáveis dependentes) foram obtidas do proprietário de cada fazenda. Foi determinado que 2,2% (9/412) dos caprinos e 2,1% (9/403) dos ovinos tinham anticorpos reativos a C. burnetii. A presença de anticorpos anti-C. burnetii foram associados com a área seca do Sequeiro (região no norte do município de Petrolina) (P = 0,025), ovinos machos (P = 0,020) e criação intensiva de caprinos (P = 0,005). Este estudo, portanto, observou a presença de anticorpos anti-C. burnetii em pequenos ruminantes, confirmando pela primeira vez que este agente pode estar circulando em rebanhos caprinos no bioma Caatinga, semiárido do Brasil.

This is a cross-sectional study to assess the presence of antibodies in ruminants against selected pathogens associated with reproductive disorders in cattle in four Brazilian states, including the zoonotic agent Coxiella burnetii. The used tests were Virus Neutralization Assay for IBR and BVD, Microscopic Agglutination Test for Leptospira spp., Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) for C. burnetii and Toxoplasma gondii, and Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Neospora caninum and Trypanosoma vivax. Seropositivity for C. burnetii was 13.7% with titers from 128 to 131,072; 57.8% for BoHV-1, with titers between 2 and 1,024; 47.1% for BVDV-1a, with titers from 10 to 5,120; 89.2% for N. caninum; 50% for T. vivax; and 52.0% for Leptospira spp., with titers between 100 to 800 (the following serovars were found: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona and Icterohaemorrhagiae); 19.6% for T. gondii with titer of 40. This is the first study that has identified C. burnetii in cattle associated with BoHV and BVDV, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii and T. vivax. Thus, future studies should be conducted to investigate how widespread this pathogen is in Brazilian cattle herds. Resumo Este é um estudo transversal para avaliar a presença de anticorpos em ruminantes contra patógenos selecionados e associados a distúrbios reprodutivos em bovinos de quatro estados brasileiros, incluindo o agente zoonótico Coxiella burnetii. Os testes utilizados foram Teste de Vírus-Neutralização para BoHV e BVDV, teste de Aglutinação Microscópica para Leptospira spp., Reação de Imunofluorescência Indireta for C. burnetii e Toxoplasma gondii, e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática para Neospora caninum e Trypanosoma vivax. A soropositividade para C. burnetii foi de 13,7% com títulos de 128 a 131.072; 57,8% para BoHV-1, com títulos entre 2 a 1.024; 47,1% para BVDV-1a, com títulos de 10 a 5.120; 89,2% para N. caninum; 50% para T. vivax; e 52,0% para Leptospira spp., com títulos entre 100 a 800 (sorovares encontrados: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona e Icterohaemorrhagiae) 19,6% para T. gondii com título de 40. Este é o primeiro estudo que evidencia a participação de C. burnetii em bovinos associada ao Vírus da Rinotraqueíte bovina infecciosa e da diarreia viral bovina, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii e T. vivax em bovinos. Desta forma, futuros estudos devem ser conduzidos a fim de investigar o quão disseminado se encontra este patógeno em rebanhos bovinos brasileiros.

Submitted by Michele Mologni (mologni@unoeste.br) on 2019-02-06T17:06:34Z No. of bitstreams: 1 Maykon Ramos Brasileiro.pdf: 195879 bytes, checksum: 8506daf0073cf47f0b9ce3020a93c843 (MD5) Made available in DSpace on 2019-02-06T17:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maykon Ramos Brasileiro.pdf: 195879 bytes, checksum: 8506daf0073cf47f0b9ce3020a93c843 (MD5) Previous issue date: 2018-10-31 . A coxielose é uma zoonose associada à bactéria intracelular Coxiella burnetii sendo uma infecção comum em ruminantes e humanos de países asiáticos e europeus. No Brasil estudos epidemiológicos sobre a enfermidade são escassos. O presente estudo avaliou a presença de anticorpos anti-Coxiella (fase II) em 231 amostras de soro bovino provenientes de doze fazendas de leite e corte da região Oeste do estado de São Paulo, colhidas entre os anos de 2012-2018, que estavam mantidas em estoque sob congelamento a -25oC, utilizadas em outras rotinas diagnósticas. As amostras foram testadas pelo método ELISA, utilizando kit comercial importado (Bio-X - Diagnostics®). Do total avaliado, 176 (76,2%) animais foram sorologicamente positivos. Onze (91,6%) das 12 propriedades apresentaram ao menos um animal positivo, com prevalências variando entre 20 e 100%. Os resultados denotam alta prevalência da coxielose em bovinos de leite e corte na região Oeste Paulista, sugerindo que a enfermidade deve ser avaliada com relação aos potencias impactos na reprodução dos animais, incluindo diagnóstico diferencial com patógenos abortivos. Considerando-se o risco de transmissão zoonótica e o desconhecimento acerca da doença, as autoridades de saúde locais devem estar atentas a possíveis casos humanos subdiagnosticados ou confundidos com outras enfermidades similares.

Coxiella burnetii is a zoonotic pathogen with a worldwide distribution that is responsible for Q fever in humans. It is a highly infectious bacterium that can be transmitted from cattle to humans through the consumption of unpasteurized milk. We report the molecular identification of C. burnetii in raw cow's milk being sold directly for human consumption in Brazil without official inspection or pasteurization. One hundred and twelve samples of raw milk were analysed by real-time quantitative PCR (qPCR), and C. burnetii was detected in 3.57% (4/112) of the samples at a concentration ranging from 125 to 404 bacteria per millilitre. The identification of this zoonotic pathogen in raw milk sold directly for human consumption is a public health concern since C. burnetii can be transmitted through the oral route. This result indicates that health education and other preventive measures should be officially implemented in Brazil to prevent the spread of infection. To our knowledge, this is the first qPCR-based detection of C. burnetii in raw milk samples from cows sold in Brazil that do not undergo official inspection or pasteurization.

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2018 Submitted by Sofia Amador (sofiamador@fm.ul.pt) on 2020-03-10T14:15:43Z No. of bitstreams: 1 JoaoBorralho.pdf: 923617 bytes, checksum: 3611e85da144bc7cfb8302a960baa99d (MD5) Made available in DSpace on 2020-03-10T15:17:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoaoBorralho.pdf: 923617 bytes, checksum: 3611e85da144bc7cfb8302a960baa99d (MD5) Previous issue date: 2018

RESUMO Introdução: O modo de fabricar o queijo Minas artesanal (QMA) na microrregião do Serro foi considerado patrimônio histórico imaterial da humanidade desde 2008. Mesmo produzido a partir de leite cru, foi autorizado para consumo. OBJETIVOS: Estimar a prevalência de Coxiella burnetii em QMA produzido na microrregião de Serro. Métodos: Foram avaliadas as evidências do patógeno (presença de DNA) em queijos de produtores cadastrados no Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA), com tempos de maturação de 4 e 8 dias à temperatura ambiente. Resultados: Os resultados da reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento de DNA mostraram que as prevalências de Coxiella burnetii no QMA do Serro foram de 5 (9,43%, IC95% 3,1 a 20,7%) positivas entre as 53 analisadas. Conclusões: Essa foi a primeira vez que esse patógeno, considerado padrão histórico na definição do binômio tempo-temperatura, foi pesquisado nesses queijos de leite cru no Brasil, mas ainda não há legislação nacional específica ou controle para o patógeno no leite cru e seus derivados. Como essa alta prevalência de Coxiella burnetii em queijos analisados pode implicar riscos potenciais à saúde pública, medidas de controle mais rigorosas direcionadas à saúde animal, leite cru e agroindústrias produtoras de leite cru são necessárias para garantir a segurança do alimento. Made available in DSpace on 2019-12-18T00:37:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ArtigoCnpglRevMedMGScafuttoOcorrencia.pdf: 202919 bytes, checksum: 1a6d2d22d1c632a19ed3b4c36155cf00 (MD5) Previous issue date: 2018

O objetivo desse trabalho foi estimar a prevalência de Coxiella burnetii em Queijo Minas Artesanal da microrregião do Serro e identificar os fatores associados à presença desse microrganismo nas propriedades estudadas. Foram sorteados aleatoriamente 55 produtores cadastrados no Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA) para participar da pesquisa. Os produtores responderam a um questionário e foi coletada uma amostra de queijo de cada propriedade para representá-la. Nas amostras de queijo coletadas, foram realizadas as análises de Reação de Cadeia da Polimerase (PCR) para C. burnetii e sequenciamento dos produtos de DNA amplificados. Os dados provenientes das entrevistas e resultados das análises laboratoriais, uma vez sistematizados, formaram a base de dados do trabalho. A presença de DNA de C. burnetii foi considerada a variável dependente e as variáveis explicativas foram divididas em três grupos hierárquicos: distal (socioeconômicas e demográficas), intermediário (produção de queijo) e proximal (características do rebanho, produção de leite e ordenha). Os fatores associados à presença de C. burnetii nos queijos foram identificados por análises de regressão logística univariada e multivariada. Do total de amostras analisadas (n = 53), cinco (9,43%) apresentaram DNA de C. burnetii confirmado por sequenciamento. Os fatores associados com a presença de DNA de C. burnetii nos queijos foram: uso do pingo (soro- fermento) para a fabricação dos queijos (OR= 12,09), tipo de ordenha (OR= (16,45) e número de vacas em lactação (OR= 1,05). As variáveis que permaneceram no modelo final como explicativas para presença de C. burnetii nos queijos foram: número de vacas em lactação, tipo de ordenha e uso do pingo. A presença de DNA de C. burnetii nos queijos artesanais enfatiza, por um lado, a necessidade de medidas de controle mais rigorosas para que essa bactéria não esteja presente nos rebanhos de propriedades produtoras de queijos artesanais. Por outro lado, o conhecimento dos fatores associados à presença de C. burnetii nos queijos artesanais poderá auxiliar no estabelecimento de medidas preventivas e na criação de novas normas e legislação para a produção de queijos artesanais, já que essa lacuna na legislação seria algo para reflexão, dada a importância da febre Q para a saúde pública. The objective of this study was to estimate the prevalence of Coxiella burnetii in Artisan Minas cheese of region of Serro and identify the factors associated with the presence of this organism in the properties studied. Were drawn at random 55 registered producers in the Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA) to participate in the research. The producers responded to a questionnaire and was collected a sample of cheese at a property to represent her. The cheese samples collected, the analysis of reaction of polymerase chain reaction (PCR) to C. burnetii and sequencing of amplified DNA products. Data from the interviews and results of laboratory tests, once organized, form the basis of work data. The presence of DNA of C. burnetii was considered as the dependent variable and the explanatory variables were divided into three groups: hierarchical distal (socioeconomic and demographic), intermediate (cheese production) and proximally (characteristics of the herd, milk production and milk). The factors associated with the presence of C. burnetii in cheeses were identified by analysis of univariate and multivariate logistic regression. Of the total samples analyzed (n = 53), five (9.43%) presented DNA of C. burnetii confirmed by sequencing. The factors associated with the presence of DNA of C. burnetii in cheeses were: use of the pingo (serum- baking) for the manufacture of the cheeses (OR = 12.09), type of milking (OR = (16.45) and number of lactating cows (OR = 1.05). The variables that remained in the final model as explanatory for the presence of C. burnetii in cheeses were: number of lactating cows, milking and type use the pingo. The presence of DNA of C. burnetii in artisanal cheeses emphasizes, on the one hand, the need for more stringent control measures so that this bacteria is not present in flocks of artisanal cheese-producing properties. On the other hand, the knowledge of the factors associated with the presence of C. burnetii in artisanal cheeses may assist in establishing preventive measures and the creation of new standards and legislation for the production of artisanal cheeses, since this gap in the legislation would be something for reflection, given the importance of Q fever to public health.

RESUMO: As doenças causadas por bactérias dos gêneros Rickettsia e Coxiella possuem como vetores artrópodes hematófagos, na sua maioria carrapatos, que atuam diretamente na transmissão de patógenos responsáveis por enfermidades de grande impacto na medicina veterinária e humana. O presente estudo objetivou realizar uma investigação sorológica de Rickettsia rickettsii e Coxiella burnetii em caprinos e ovinos criados no entorno do Parque Nacional da Serra das Confusões (PNSC), localizado no estado do Piauí, região nordeste do Brasil. Amostras de soro de 202 caprinos e 153 ovinos foram testadas pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos anti-R. rickettsii e anti-C. burnetii, sendo consideradas positivas quando apresentaram títulos ≥ 64. Carrapatos em fase de parasitismo foram coletados e identificados. Todas as amostras de caprinos e ovinos foram soronegativas para antígenos de R. rickettsii. Foi verificado soropositividade em 2% (3/153) das amostras de ovinos para C. burnetii, com títulos variando de 64 a 4.096. As amostras de caprinos não foram reagentes ao referido antígeno. Não foi observado parasitismo em caprinos por carrapatos. No total, foram coletados 56 carrapatos parasitando 15 ovinos (9,8%), todos identificados como Rhipicephalus microplus. O estudo demonstrou a ausência de anticorpos anti-R. rickettsii nas amostras de caprinos e ovinos, ausência de anticorpos anti-C. burnetii em caprinos; e possibilitou o primeiro relato da ocorrência sorológica de C. burnetii em ovinos nesta região do Brasil. ABSTRACT: The diseases caused by bacteria from the genera Rickettsia and Coxiella have hematophagous arthropods as vectors, mostly by ticks, which act directly on the transmission of pathogens that are responsible for diseases with major impact on veterinary and human medicine. The present study aimed to survey the infection of Rickettsia rickettsii and Coxiella burnetii in sheep and goats surrounding in the National Park of Serra das Confusões (NPSC), located in the state of Piauí, Northeast of Brazil. Serum samples from 202 goats and 153 sheep were tested by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) for the detection of antibodies against R. rickettsii and C. burnetii. The samples were considered positive when they showed titers ≥ 64. Ticks in parasitic stage were collected and identified. All samples from sheep and goats were seronegative for R. rickettsii. Seropositivity was verified in 2% (3/153) of the samples of sheep for C. burnetii, with titers ranging from 64 to 4096. The serum samples obtained from goats were seronegative to the above antigens. In total, 56 ticks were collected from 15 sheep (9.8%) all identified as Rhipicephalus microplus. The study demonstrated absence of infection by R. rickettsii in samples of sheep and goats, absence of infection of C. burnetii in goats; and the first report of serological occurrence of C. burnetii in sheep in this region of Brazil.

RESUMO: As doenças causadas por bactérias dos gêneros Rickettsia e Coxiella possuem como vetores artrópodes hematófagos, na sua maioria carrapatos, que atuam diretamente na transmissão de patógenos responsáveis por enfermidades de grande impacto na medicina veterinária e humana. O presente estudo objetivou realizar uma investigação sorológica de Rickettsia rickettsii e Coxiella burnetii em caprinos e ovinos criados no entorno do Parque Nacional da Serra das Confusões (PNSC), localizado no estado do Piauí, região nordeste do Brasil. Amostras de soro de 202 caprinos e 153 ovinos foram testadas pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos anti-R. rickettsii e anti-C. burnetii, sendo consideradas positivas quando apresentaram títulos ≥ 64. Carrapatos em fase de parasitismo foram coletados e identificados. Todas as amostras de caprinos e ovinos foram soronegativas para antígenos de R. rickettsii. Foi verificado soropositividade em 2% (3/153) das amostras de ovinos para C. burnetii, com títulos variando de 64 a 4.096. As amostras de caprinos não foram reagentes ao referido antígeno. Não foi observado parasitismo em caprinos por carrapatos. No total, foram coletados 56 carrapatos parasitando 15 ovinos (9,8%), todos identificados como Rhipicephalus microplus. O estudo demonstrou a ausência de anticorpos anti-R. rickettsii nas amostras de caprinos e ovinos, ausência de anticorpos anti-C. burnetii em caprinos; e possibilitou o primeiro relato da ocorrência sorológica de C. burnetii em ovinos nesta região do Brasil.

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária A febre Q é uma zoonose provocada pelo agente Coxiella burnetii. Os ruminantes domésticos são considerados a mais importante fonte de contaminação de Febre Q do Homem. Contudo, e em particular no caso dos bovinos, não é fácil o diagnóstico de Febre Q ou coxielose nestas espécies, pois de forma geral a doença evolui de uma forma assintomática e existem numerosas estirpes. O decréscimo de fertilidade, e por conseguinte as alterações na eficiência reprodutiva das explorações, têm sido apontadas como uma das consequências da ocorrência de coxielose nas explorações. Partindo de um despiste serológico realizado a 50 explorações de bovinos de leite no sul do Concelho de Barcelos (Estudo 1) por iniciativa do Veterinário Assistente, propusemo-nos realizar a análise dos índices reprodutivos em 5 dessas explorações (Estudo 2), amostradas de forma a formar dois grupos: explorações negativas (n=2) e positivas (n=3). No estudo 1, a seroprevalência de C. burnetii no leite do tanque foi averiguada durante o mês de Junho de 2014. Este trabalho revelou uma prevalência de 62% do agente ao nível das explorações, das quais 30% possuíam baixa titulação de anticorpos, 20% moderada e 12% elevada. Para o estudo 2 recolheram-se os dados necessários à determinação dos índices reprodutivos em 5 vacarias amostradas de entre as testadas no estudo 1, cobrindo o período de janeiro de 2012 e Dezembro de 2014. Não se encontraram diferenças significativas no intervalo entre partos entre explorações positivas e negativas, e a análise do intervalo mínimo entre partos projetado revelou que ambos os grupos de explorações têm problemas na eficiência reprodutiva que necessitam de atenção. O intervalo médio entre o parto e a primeira IA foi significativamente maior (p=0,025) nas explorações positivas (90,41±50,87 dias) do que nas negativas (81,55±33,99), sugerindo que o retorno à ciclicidade possa estar afetado quando C. burnetti está presente na exploração. No global, considerando os três trimestres de gestação, a prevalência das perdas de gestação é maior nas explorações positivas do que nas negativas (p=0,047). Esta diferença está associada a uma tendência para acréscimo das perdas de gestação no primeiro terço de gestação (p=0,062), possivelmente devidas a uma maior prevalência de mortalidade embrionárias tardia e de morte fetal precoce. Nas explorações positivas a duração do período de gestação foi inferior (p=0,06), em 4 dias, à duração registada em explorações negativas, o que sugere a possibilidade de ocorrerem um maior número de partos prematuros nas primeiras. IV A associação entre a seropositividade para a C. burnetti e o aumento da ocorrência de perda de gestação por aborto ou a alteração dos indicadores reprodutivos tem sido controversa, o que poderá ser devido não só às dificuldades no diagnóstico de Febre Q mas sobretudo às particularidades de maneio reprodutivo e às características fisiológicas e genéticas das vacas de raça Holstein-Frísia utilizadas na produção de leite. Apesar de o número de explorações amostradas ser reduzido, e de vários indicadores reprodutivos estudados não apresentarem diferenças com significância estatística, observa-se uma tendência de menor performance reprodutiva em explorações com coxielose endémica. Q fever is a zoonotic disease originated by Coxiella burnetii. Domestic ruminants are the most important source of contamination for Humans. However, the diagnosis of Q fever or coxiellosis is not easy, particularly in cattle, in which species the disease evolves asymptomatically. The decrease in fertility has been appointed as a main consequence of Q fever in dairy farms. Beginning with a serologic survey performed in 50 dairy farms located in the south area of Barcelos (Study 1), requested by veterinarian practitioner of those farms, we planned to analyse the reproductive indexes in five of those farms (Study 2), sampled from the initial farms to form two groups: the farms negative (n=2) and positive (n=3) for C. burnetii. In the study 1, the C. burnetii prevalence was tested in bulk milk tank, during the month of June 2014. This study revealed a global prevalence at farm level of 62%; from the positive farms, 30% had low antibody titles, 20% showed moderate antibody titres and 12% had a high antibody titre. In the study 2, data used to study the reproductive indexes in the five dairy farms was retrieved from the records of the 5 of the farms sampled from study 1, representing the records for the period between January of 2012 and December of 2014. For that period, no statistic differences were found in the calving intervals between positive or negative farms. Also, the analysis of the minimal expected calving intervals showed that both farm groups (positive or negative) have problems in the reproductive efficiency needing some attention. The average calving to first insemination interval was significantly higher (p=0.025) in the positive farms (90.41±50.87 days) compared to the negative ones (81.55±33.99 days), suggesting that the return into cyclicity may be affected by C. burnetii positivity. Overall, considering all the three pregnancy semesters, the prevalence of pregnancy loss was higher in positive farms (p=0.047). This difference was associated to a tendency to an increase on the pregnancy losses in the first trimester of pregnancy (p=0.062), which might be related to a higher prevalence of late embryonic mortality or an early foetal death. Positive farms have also tend to present a 4 day-shorter pregnancy length (p=0.06), suggesting the occurrence of a higher number of premature births comparative to the negative farms. The association between the seropositivity to C. Burnetti and an increase in pregnancy losses by abortion or a change in the reproductive indexes has been controversial, which might be explained by the difficulties on diagnosing Q fever and by the characteristic reproductive management in dairy herds as wells as the physiological and genetic characteristics of Holstein-Friesian cows used for milk production. In spite most reproductive indices analysed in the present study failed to differ between positive and negative herds, a tendency was observed for a lower reproductive performance in farms with endemic coxiellosis.

Resumo: A tuberculose miliar é a forma de doença progressiva resultante da disseminação hematogénea maciça do Mycobacterium tuberculosis (MT). Afecta imunode-primidos e idosos e tem manifestações clínicas insi-diosas e inespecíficas. O caso clínico descrito refere-se a um homem adulto, sem imunodeficiência, com in-fecção simultânea por Coxiella burnetti e MT.A raridade desta associação e a sua forma de apresen-tação sublinham a necessidade de alto grau de suspei-ção clínica para a formulação dos diagnósticos, sendo este o segundo caso descrito na literatura.Rev Port Pneumol 2009; XV (2): 325-329 Abstract: Miliary tuberculosis is a progressive disease resulting from the massive hematogeneous dissemination of Mycobacterium tuberculosis. Immunocompromised and elderly patients are the most affected. A case of an immunocompetent 45 year old man, with miliary tuberculosis and a simultaneous infection by Coxiella burnetti is presented.The clinical presentation demands a high awareness for the presence of tuberculosis. The rarity of this association, only one case reported in literature, appears to be a fortuity coincidence.Rev Port Pneumol 2009; XV (2): 325-329 Palavras-chave: Tuberculose miliar, febre Q, tratamento, Key-words: Miliary tuberculosis, Q fever, treatment

Q fever is a zoonosis of worldwide distribution that is caused by Coxiella burnetii. However, reports of this disease in Brazil are rare. Seroepidemiological studies have shown relatively high frequencies of antibodies against Coxiella burnetii in populations with occupational exposure. In humans, it can be manifested clinically as acute or chronic disease. Endocarditis is the most frequent chronic form of Q fever and the form with the greatest morbidity and mortality. We report a severe case of endocarditis due to Coxiella burnetii acquired in Brazil that had a fatal outcome, despite specific antibiotic therapy and valve surgery treatment.

Objetivo: A escassa informação disponível sobre o panorama etiológico e padrão epidemiológico nacional da febre Q, face ao seu crescente interesse no contexto europeu, levou à submissão de um projeto de investigação sobre o tema, que teve início em abril de 2011 com o apoio da Fundação para a Ciência e a Tecnologia (refª PTDC/SAUSAP/115266/2009). Constituíram objetivos principais do estudo: 1) analisar os casos de febre Q para melhor caraterizar o contexto epidemiológico e clínico da doença aguda e crónica; 2) caraterizar a diversidade genética do agente etiológico como potencial fator de virulência; 3) obter uma coleção de isolados de C. burnetii da população portuguesa e caraterizar o padrão de suscetibilidade aos antibióticos; 4) averiguar potenciais fatores de risco associados à transmissão de C. burnetii em Portugal. Neste artigo são resumidos os principais resultados obtidos até ao momento. Fundação para a Ciência e a Tecnologia

Background: Q fever is a zoonotic disease caused by Coxiella burnetii. In Colombia it is not a notifiable disease in humans and is most likely under diagnosed. There are no studies about its prevalence in important reservoir species, such as cattle. Objective: the aim of this study was to investigate the frequency of C. burnetii infection in cattle farms and determine the frequency of antibodies in farm workers at risk in rural areas of Montería, Córdoba (Colombia). Methods: eleven cattle farms were randomly chosen to investigate the infection by C. burnetii. Bulk tank milk samples of each farm were analyzed by conventional PCR for DNA detection of transposase gene IS1111 of C. burnetii. Serum samples from 61 apparently healthy people living in eight farms were analyzed by indirect inmunofluorescence against phase II IgG antibodies to C. burnetii. Results: we report the presence of C. burnetii DNA in 45% of bulk tank milk samples from cattle farms and a 61% frequency of antibodies (IgG phase II ≥1/64) in farm workers at risk. Conclusion: our results demonstrate the circulation of this bacterium in the studied farms in Montería, Colombia, showing that at-risk farm workers have a high antibody frequency. Antecedentes: la fiebre Q es una zoonosis causada por Coxiella burnetii. En Colombia no es una enfermedad notificable en humanos y probablemente es subdiagnosticada. De otro lado, no se han realizado estudios acerca de su prevalencia en importantes reservorios como los bovinos. Objetivos: el objetivo de este estudio fue determinar la frecuencia de infección por C. burnetii en fincas de ganado bovino y determinar la frecuencia de la presencia de anticuerpos en trabajadores de fincas en riesgo en áreas rurales del municipio de Montería, Córdoba (Colombia). Métodos: once fincas de ganado bovino fueron aleatoriamente seleccionadas para investigar la frecuencia de infección por C. burnetii. Muestras de leche de tanque de cada finca fueron analizadas mediante PCR convencional para detección del gen transposasa IS1111 de C. burnetii. Asimismo, se colectaron muestras de suero sanguíneo de 61 personas aparentemente saludables que vivían en ocho de las fincas estudiadas, las cuales fueron analizadas mediante el ensayo de inmunofluorescencia indirecta para detección de anticuerpos IgG contra fase II de C. burnetii. Resultados: en este estudio se reporta la presencia de ADN de C. burnetii en 45% de las muestras de leche de tanque de las fincas ganaderas estudiadas y una frecuencia de anticuerpos contra C. burnetii (IgG Fase II ≥1/64) del 61% en trabajadores de fincas en riesgo. Conclusiones: los resultados de este estudio demuestran la circulación de C. burnetii en las fincas estudiadas de un área de Montería, Colombia. También, los trabajadores de fincas en situación de riesgo presentan una alta frecuencia de anticuerpos contra este patógeno. Antecedentes: a febre Q é uma zoonose causada por Coxiella burnetii. Na Colômbia não é uma doença de notificação obrigatória em seres humanos e é provavelmente subdiagnosticada. Além disto, não há estudos sobre sua prevalência nas principais espécies de reservatórios, como os bovinos. Objetivos: determinar a frequência de infecção por C. burnetii em fazendas de gado de leite e determinar a frequência de anticorpos em trabalhadores rurais em risco do município de Montería, Córdoba (Colômbia). Métodos: 11 fazendas de gado leiteiro foram selecionadas aleatoriamente para investigar a frequência de infecção por C. burnetii. Amostras de leite do tanque de cada fazenda foram analisadas por PCR convencional para a detecção do gene IS1111 transposase de C. burnetii. Além disso, amostras de soro de 61 pessoas aparentemente saudáveis que vivem em oito das propriedades estudadas foram analisadas por imunofluorescência indireta para a detecção de anticorpos IgG contra C. burnetii fase II. Resultados: neste estudo, o DNA de C. burnetii foi encontrado em 45% das amostras de leite do tanque, e uma frequência de anticorpos contra C. burnetii (fase II IgG ≥ 1/64) de 61% em trabalhadores rurais em risco. Conclusões: os resultados deste estudo demonstram a circulação de C. burnetii em algumas fazendas de gado em uma área de Montería, Colômbia. Além disso, os trabalhadores rurais em situação de risco têm uma alta frequência de anticorpos contra este patógeno.

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária A nível Europeu, vários estudos têm sido realizados e os resultados têm mostrado ser alarmantes, apontando para uma prevalência considerável de febre Q. Esta zoonose, em que os ruminantes são a principal fonte de infecção para o Homem, pode ter uma grande importância a nível de Saúde Pública. O primeiro passo para controlar a febre Q em Portugal, consiste na realização de estudos epidemiológicos que caracterizem o estado da doença no país nos diferentes efectivos animais. Com este objectivo, foram recolhidas aleatoriamente, em Novembro de 2013, amostras de leite do tanque de 90 explorações, correspondentes a um total de 9610 vacas leiteiras em produção, não vacinadas, com o objectivo de avaliar a prevalência da Febre Q em todo o Concelho de Barcelos, Distrito de Braga. Estas amostras foram analisadas recorrendo a um Kit ELISA comercial para detecção de anticorpos frente a Coxiella burnetti de fase I e fase II (CHEKIT® Q-Fever Antibody ELISA Test Kit (IDEXX, Liebefeld-Bern, Switzerland). Os resultados obtidos revelaram uma prevalência de 61,11% de explorações positivas (95% IC: 50,78-70,53%; n=55), 4,44 % de explorações duvidosas (95% IC: 1,74-10,88%; n = 4) e 34,45% de explorações negativas (95% IC: 25,45-44,72%; n = 31). Importa agora recolher dados complementares para avaliar o estado de evolução da doença, nesta população, de modo a propor um programa de controlo/erradicação da doença em cada exploração e para esta região. Terá então relevância a realização de estudos equivalentes noutras regiões do país, de modo a compreender a dispersão da doença e adequar as medidas de luta a esta zoonose. At European level, several studies have been conducted and the results have shown to be alarming, pointing to a considerable prevalence of Q fever. This zoonosis, in which ruminants are the main source of infection for humans, can be of great importance in terms of public health. The first step in controlling Q fever in Portugal, consists in performing epidemiological studies that characterize the disease state in the country in different herds. With this objective, were randomly collected in November 2013, bulk tank milk samples from 90 farms , corresponding to a total of 9610 milk production in cows, not vaccinated, with the aim of assessing the prevalence of Q fever in the whole county Barcelos, Braga District. These samples were analyzed using a commercial ELISA kit for detection of antibodies against Coxiella burnetii phase I and phase II (CHEKIT ® Q-Fever Antibody ELISA Test Kit (IDEXX, Liebefeld-Bern, Switzerland). Results indicate a prevalence of 61.11% positive herds (95% CI: 50.78 to 70.53%, n = 55), 4.44% of intermediate herds (95% CI: 1.74 to 10.88%, n = 4) and 34.45% negative herds (95% CI: 25.45 to 44.72%, n = 31). The next step is collect additional data to assess the status of the disease in this population, in order to propose a program of control / eradication of the disease in each farm and for this region. It will be important to conduct similar studies in other regions of the country in order to understand the spread of the disease and tailor the measures to combat this zoonosis that characterize the disease state in the country.

La febre Q és una zoonosis re-emergent endèmica mundialment, causada per Coxiella burnetii, un bacil Gram negatiu intracel.lular. Els remugants domèstics són el reservori principal per als humans. La infecció és principalment asimtomàtica en boví, però se l’ha relacionat amb desordres reproductius. L’objectiu d’aquesta tesis ha estat proporcionar informació per millorar el seu control a les explotacions bovines. S’han estudiat la serologia, els patrons d’excreció de C. burnetii i la seua relació amb el rendiment reproductiu de les vaques lleteres. A més, s’ha evaluat la bioseguretat d’una vacuna inactivada contra C. burnetii fase I aplicada en vaques gestants i la seua capacitat per millorar el rendiment reproductiu. Les conclusions són que no s’han detectat anticossos precalostrals en vedells de mares infectades, l’excreció i la seropositivitat no es relacionen negativament amb el rendiment reproductiu i que la vacunació de vaques en gestació avançada no redueix l’excreció però millora el rendiment reproductiu., La fiebre Q es una zoonosis re-emergente endémica mundialmente, causada por Coxiella burnetii, un bacilo Gram negativo intracelular. Los rumiantes domésticos son el reservorio principal para los humanos. La infección es principalmente asintomática en bovino, pero se la ha relacionado con desórdenes reproductivos. El objetivo de esta tesis fue proporcionar información para mejorar su control en las explotaciones bovinas. Se estudiaron la serología, los patrones de excreción de C. burnetii y su relación con el rendimiento reproductivo de las vacas lecheras. Además, se evaluó la bioseguridad de una vacuna inactivada contra C. burnetii fase I aplicada en vacas gestantes y su capacidad para mejorar el rendimiento reproductivo. Las conclusiones son que no se detectaron anticuerpos precalostrales en terneros de madres infectadas, excreción y seropositividad no se relacionaron negativamente con el rendimiento reproductivo y que la vacunación de vacas en gestación avanzada no reduce la excreción pero mejora el rendimiento reproductivo., Q fever is a worldwide re-emerging zoonosis caused by an intracellular Gram negative bacillus, Coxiella burnetti. Domestic ruminants are the main reservoir to humans. Despite the infection is mainly asymptomatic in cattle, is has been linked with reproductive disorders. Therefore, the aim of this thesis was to provide information about C. burnetii infection to improve its control in dairy herds. A study of serological profiles, shedding patterns and its relationship with reproductive performance has been performed. In addition, a C. burnetii inactivated phase I vaccine has been tested evaluating the biosafety for use in pregnant cows and in assessing its ability to improve reproductive performance in dairy herds. The results indicate no detectable precolostral antibody response in calves born from infected dams, seropositivity and shedding are not related to reproductive disorders and vaccination of advanced pregnant cows was not able to reduce bacterial shedding but improves reproductive performance.

Tese de mestrado. Biologia (Microbiologia Aplicada). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2013 Submitted by Lurdes Saramago (lurdes.saramago@fc.ul.pt) on 2014-01-10T18:08:55Z No. of bitstreams: 1 ulfc103212_tm_aminata_cumbassa.pdf: 1076282 bytes, checksum: ca5a3ef88846aff35f02ae0d32036478 (MD5) Made available in DSpace on 2014-01-10T18:09:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc103212_tm_aminata_cumbassa.pdf: 1076282 bytes, checksum: ca5a3ef88846aff35f02ae0d32036478 (MD5) Previous issue date: 2013

A tuberculose miliar é a forma de doença progressiva resultante da disseminação hematogénea maciça do Mycobacterium tuberculosis (MT). Afecta imunodeprimidos e idosos e tem manifestações clínicas insidiosas e inespecíficas. O caso clínico descrito refere-se a um homem adulto, sem imunodeficiência, com infecção simultânea por Coxiella burnetti e MT. A raridade desta associação e a sua forma de apresentação sublinham a necessidade de alto grau de suspeição clínica para a formulação dos diagnósticos, sendo este o segundo caso descrito na literatura. Miliary tuberculosis is a progressive disease resulting from the massive hematogeneous dissemination of Mycobacterium tuberculosis. Immunocompromised and elderly patients are the most affected. A case of an immunocompetent 45 year old man, with miliary tuberculosis and a simultaneous infection by Coxiella burnetti is presented. The clinical presentation demands a high awareness for the presence of tuberculosis. The rarity of this association, only one case reported in literature, appears to be a fortuity coincidence.

A febre Q é uma zoonose de distribuição mundial causada por Coxiella burnetii, sendo raros os registros da doença no Brasil. Estudos soroepidemiológicos mostraram uma freqüência relativamente elevada de anticorpos contra Coxiella burnetii em populações com exposição ocupacional. Em humanos, pode se manifestar clinicamente como doença aguda ou crônica, sendo que a endocardite é a forma crônica mais freqüente da febre Q e de maior morbi-mortalidade. Relatamos um caso grave de endocardite por Coxiella burnetii adquirida no Brasil com desfecho fatal, apesar de antibioticoterapia adequada e tratamento cirúrgico valvar. Q fever is a zoonosis of worldwide distribution that is caused by Coxiella burnetii. However, reports of this disease in Brazil are rare. Seroepidemiological studies have shown relatively high frequencies of antibodies against Coxiella burnetii in populations with occupational exposure. In humans, it can be manifested clinically as acute or chronic disease. Endocarditis is the most frequent chronic form of Q fever and the form with the greatest morbidity and mortality. We report a severe case of endocarditis due to Coxiella burnetii acquired in Brazil that had a fatal outcome, despite specific antibiotic therapy and valve surgery treatment.

Dissertação de Mestrado em Saúde Pública Veterinária Foi realizado um rastreio para determinar a seroprevalência do agente da Febre Q, Coxiella burnetii, nos rebanhos de ovinos do concelho de Montemor-o-Novo, de forma a: i) calcular prevalência de explorações positivas; ii) a prevalência animal por exploração. Foi seleccionada uma amostra aleatória de 35 explorações, num total de 726 animais, aos quais foram recolhidas amostras de sangue para serem analisadas através de um teste de ELISA comercial para detecção de anticorpos anti C. burnetii em fase I e fase 11.Foram identificadas 20 explorações (57,1%) com pelo menos um animal positivo. A prevalência intra-exploração variou entre 3% ei50%. Os estudos epidemiológicos e a investigação sobre surtos ocorridos nos últimos anos em vários países da Europa mostram que a Febre Q deve ser considerada um problema de saúde pública crescente, sendo os ruminantes identificados como a principal fonte de infecção para o Homem. o conhecimento desta zoonose através de estudos seroepidemiológicos é um passo inicial importante para o seu controlo em Portugal, uma vez que a existência de casos humanos indica a presença do agente no nosso País, mas são escassos os dados relativos à sua ocorrência em espécies animais. ABSTRACT: A survey on seroprevalence of Q fever agent, Coxiella burnetii, in sheep flocks in the Montemor-o-Novo district was performed in order to: i) estimate the prevalence of positive flocks; ii)the animal prevalence within the flock. Thirty-five flocks were randomly selected, comprising a total of 726 sheep. Blood samples were collected to be tested by an ELISA commercial kit for the detection of phase I and phase II anti-C. burnetii antibodies. Twenty flocks (57.1%) were identified with at least one positive animal. The prevalence within the flocks ranged between 3% and 50%. The epidemiological surveys and the investigation of outbreaks that occurred in the last years in several European countries show that Q fever must be considered an increasing public health concem, being the ruminants identified as the main source of infection for Man. The study of this zoonosis through seroepidemiological survey is an important step for its control in Portugal because, although human cases indicate that the agent is present in the country, data on animal disease are scarce.

Tese de mestrado em Doença Infecciosas Emergentes, apresentada à Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa, 2008 Nível de preservação: critical, Criado em: 2008-12-31 15:17:10, Criado por: super:MARTA, Alterado em: 2009-08-03 11:35:05, Modificado por: super:MARTA Made available in DSpace on 2010-07-22T08:48:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 16858_Estudo%20da%20preval00EAncia%20de%20anticorpos.pdf: 1038718 bytes, checksum: 4b2a0bea06d46e5d8a494e0839a70eaa (MD5) 16858.xml: 9903 bytes, checksum: 0610716f3394347792c1f7923d725e77 (MD5) Previous issue date: 2008

BACKGROUND: Coxiella burnetii is a highly clonal microorganism which is difficult to culture, requiring BSL3 conditions for its propagation. This leads to a scarce availability of isolates worldwide. On the other hand, published methods of characterization have delineated up to 8 different genomic groups and 36 genotypes. However, all these methodologies, with the exception of one that exhibited limited discriminatory power (3 genotypes), rely on performing between 10 and 20 PCR amplifications or sequencing long fragments of DNA, which make their direct application to clinical samples impracticable and leads to a scarce accessibility of data on the circulation of C. burnetii genotypes. RESULTS: To assess the variability of this organism in Spain, we have developed a novel method that consists of a multiplex (8 targets) PCR and hybridization with specific probes that reproduce the previous classification of this organism into 8 genomic groups, and up to 16 genotypes. It allows for a direct characterization from clinical and environmental samples in a single run, which will help in the study of the different genotypes circulating in wild and domestic cycles as well as from sporadic human cases and outbreaks. The method has been validated with reference isolates. A high variability of C. burnetii has been found in Spain among 90 samples tested, detecting 10 different genotypes, being those adaA negative associated with acute Q fever cases presenting as fever of intermediate duration with liver involvement and with chronic cases. Genotypes infecting humans are also found in sheep, goats, rats, wild boar and ticks, and the only genotype found in cattle has never been found among our clinical samples. CONCLUSIONS: This newly developed methodology has permitted to demonstrate that C. burnetii is highly variable in Spain. With the data presented here, cattle seem not to participate in the transmission of C. burnetii to humans in the samples studied, while sheep, goats, wild boar, rats and ticks share genotypes with the human population. Grant support for this work was from FIS PI10/00165, FUNCIS 26/03 from the Gobierno de Canarias “Diagnóstico directo de rickettsiosis prevalentes en nuestro medio (fiebre Q y tifus murino)”, from the “Departamento de Agricultura y Pesca, Gobierno Vasco” “Ensayo de control de la fiebre Q en la cabaña ovina lechera de la CAPV”, INIA FAU2006-00002-C04-01 to -04 “Ecología y control de la fiebre Q: Epidemiología molecular de Coxiella burnetii”, and AGL2010-21273-C03-01-GAN from CICYT “Interacciones-inmuno endocrinas materno-fetal y con Coxiella burnetii en vacas lecheras de alta producción”. Sí

Contém, gráficos e fotografias. This report was prepared in collaboration with Prof. Fernando Fonseca and Drs. António P. Franco and J. Carvalho de Sousa and, in part, it is based on results obtained during experimental work carried out under the orientation of Prof. Fonseca. We wish to discuss three aspects of Q fever – clinical, immunological and epidemiological – which are linked to a certain extent. From the clinical point of view we maintain the classification of the Q fever that we presented in January 1949: a) febrile illness without localization; b) febrile illness with pulmonary or pleuro-pulmonary localization; c) illness progressing in a form that we had not seen referred to in literature, as we wrote in literature, as we wrote in 1949 with agent attacking at different points in the organism. Medical literature is rich to – day in descriptions of clinical cases belonging to group; d) and the most varied localizations have been presented with the corresponding symptomatology. Already at that time we were struck by the prolonged course of the illness in some patients in group; e) with successive localizations of the agent, such as we observe in the cyclic diseases as, for example, brucellosis. Este relatório foi elaborado em colaboração com o Prof. Fernando Fonseca e Drs. António P. Franco e J. Carvalho de Sousa e, em parte, é baseado em resultados obtidos durante o trabalho experimental realizado sob a orientação do Prof. Fonseca. Desejamos discutir três aspectos da febre Q- Clínicos, imunológicos e epidemiológicos – que estão ligados em certa medida. Do ponto de vista clínico mantemos a classificação da febre Q que apresentamos em Janeiro de 1949: a) doença febril sem localização; b) doença febril com localização pulmonar ou pleuro-pulmonar; c) a doença progride de uma forma que não tínhamos visto na literatura, como escrevemos em 1949, com o agente atacando em diferentes pontos do organismo. A literatura médica é hoje rica em descrições de casos clínicos pertentes ao grupo; d) e as mais variadas localizações têm sido apresentadas com a sintomatologia correspondente. Já naquela época ficamos impressionados com o curso prolongado da doença em alguns pacientes em grupo; e) com sucessivas localizações do agente, como observamos nas doenças cíclicas como, por exemplo, a brucelose. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

O relatório é constituído por um capítulo com a casuística, assistida durante o estágio, por um capítulo com uma revisão bibliográfica sobre Febre Q e apresentação de um caso clínico. Foram acompanhadas diversas explorações de ruminantes, de produção de carne e leite. Muita da casuística acompanhada, corresponde aos serviços de clínica e consultoria numa exploração de caprinos de leite em regime de estabulação e pastoreio reduzido. A Febre Q é uma zoonose causada por Coxiella burnetii. As vias de excreção são as fezes, o muco vaginal e o leite. A antibioterapia poderá reduzir os sinais clínicos, porém não reduz a excreção do agente. As medidas de profilaxia sanitária e a vacinação diminuem a contaminação ambiental. Através de análises PCR de produtos de aborto, estabeleceu-se que Coxiella burnetii era o agente etiológico responsável por um surto de abortos em caprinos. Administrou-se oxitetraciclina para evitar novos abortos e iniciou-se a vacinação; ABSTRACT: Clinical of livestock species This report consist of a chapter ofa casuistry assisted during the traineeship, for a chapter about literature review of Fever Q and presentation of a clinical case. Several ruminants farms producing meat and milk were followed. Much of the farm livestock that were followed over the stage, corresponds to clinical and consulting services in a dairy goats farm with animals permanently stabling with a reduced time of grazing. Q fever is a zoonotic disease caused by Coxiellaburnetii. Excretion routes are feces,vaginal mucus and milk. Antibiotics may reduce the clinical signs, however does not reduce agent excretion. Prophylaxis and vaccination decrease environmental contamination. By PCR analysis of abortion products, it was established that Coxiella burnetii was the causative agent responsible for an abortion outbreak in goats. Oxytetracycline was administered to prevent new abortions and vaccination began.