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Se desarrolló un protocolo para la inducción de callos en dos accesiones no tóxicas de J. curcas. Para ello, se realizaron dos experimentos. En el primer experimento se determinó el método de desinfección de semillas para la obtención de explantes asépticos. Para ello se evaluó el efecto de cuatro concentraciones de hipoclorito de sodio (0%, 10%, 15% y 30%) y tres tiempos de exposición (15, 20 y 30 minutos) en dos accesiones no toxicas de J. curcas (I-27 y I-34) en un experimento factorial por duplicado, utilizando 10 repeticiones. En un segundo experimento se evaluó el efecto de cuatro concentraciones de 2,4-D (0.00, 2.2, 3.3 y 4.5 µM) sobre la inducción de callo. En los tratamientos de desinfección, los mejores resultados se encontraron en la accesión I-34 expuesta al 30% de hipoclorito de sodio durante 15 minutos debido a que se logró obtener un 75% de embriones axénicos. El mejor tratamiento para inducir callos viables se observó cuando los hipocótilos de la accesión I-34 se expusieron a 4,5 μM de 2,4-D. Nuestros resultados mostraron una respuesta diferencial en la formación de callos entre las accesiones evaluadas. I-34 fue la accesión con mayor tasa de formación de callos. Los resultados de la prueba GLM mostraron la existencia de significancia estadística en la interacción de 3 niveles. Se encontró que el uso de 4,5 M de 2,4-D en hipocótilos de adhesión I-34 fue el tratamiento más eficaz para la inducción de callo. La concentración de 2,4-D fue el factor más influyente para la inducción de callos, ya que fue el único factor principal significativo en las interacciones de 2 niveles. Por lo que se recomienda utilizar estos resultados en los programas de fitomejoramiento que se están desarrollando en este importante cultivo.