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Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2021-08-26T15:41:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_camila_ribeiro_carvalho_de_brito.pdf: 1163177 bytes, checksum: 502d76351531eb1ec30ad4c075373a73 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2021-08-27T14:42:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_camila_ribeiro_carvalho_de_brito.pdf: 1163177 bytes, checksum: 502d76351531eb1ec30ad4c075373a73 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2021-08-27T14:42:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_camila_ribeiro_carvalho_de_brito.pdf: 1163177 bytes, checksum: 502d76351531eb1ec30ad4c075373a73 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2019-02-21 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A grande expansão e transformação da produção de suínos durante o século XX deve ser atribuída principalmente ao uso de diversas tecnologias no manejo dos animais além da segmentação da produção em subáreas. Um dos setores que mais empregaram distintas tecnologias foi o da reprodução. Atualmente, reprodutores machos e fêmeas são mantidos em instalações separadas, sendo os primeiros alocados em centrais de produção de doses de sêmen. Tais centrais são dotadas de tecnologias que intensificam o uso de automação da coleta e produção de doses, que não seriam possíveis sem a obtenção informatizada de dados para a sua realização. Além disso, estudos em que são reportadas as características de manejo e produtividade são responsáveis por identificar tanto os pontos críticos quanto os pontos referências para a cadeia produtiva como um todo, o que é conhecido como ‘benchmarking’. O primeiro trabalho demonstrou o perfil quantitativo e qualitativo de mais de vinte mil doses de sêmen produzidas durante um ano em onze centrais brasileiras em termos dos parâmetros espermáticos (concentração, motilidade, volume, coloração, etc.) e produtividade dos ejaculados coletados (p.ex., quantidade de doses produzidas) além das razões de descarte tanto dos ejaculados coletados quanto dos animais alojados nas granjas. Foi possível também compreender algumas características dos manejos adotados das granjas em termos das rotinas de trabalho adotadas (p.ex., dias de coleta, n° de funcionários, intervalo entre coletas, etc.). Por último, no segundo trabalho foi relatada uma inovação na metodologia de obtenção de diluente para o congelamento de sêmen suíno: a ultracentrifugação acompanhada ou não da sonicação. A ultracentrifugação do plasma de gema foi benéfica para os parâmetros de cinética espermática. Por outro lado, a aplicação da sonicação, com o objetivo de diminuir as partículas de LDL do diluente, isolada ou combinada com a ultracentrifugação foi deletéria a esses mesmos parâmetros. Portanto, o primeiro trabalho foi importante para determinar os pontos de referência da produção comercial de sêmen suíno em centrais brasileiras e o segundo forneceu uma alternativa viável e benéfica para o congelamento de doses de sêmen suíno. The great expansion and transformation of pig production during the 20th century must be attributed mainly to the use of different technologies in the management of animals in addition to the segmentation of production in sub-areas. One of the sectors that most used different technologies was reproduction. Currently, sires and dams are kept in separate facilities, with the first allocated into boar studs. Such plants are equipped with technologies that intensify the use of automation of the collection and production of doses, which would not be possible without obtaining computerized data for their realization. In addition, studies in which management and productivity characteristics are reported are responsible for identifying both critical points and reference points for the production chain as a whole, which is known as ‘benchmarking’. The first study demonstrated the quantitative and qualitative profile of more than twenty thousand doses of semen produced during one year in eleven Brazilian boar studs in terms of sperm parameters (i.e., concentration, motility, volume, color, etc.) and productivity of the ejaculates collected (i.e., amount of doses produced) in addition to the reasons fordiscarding both the collected ejaculates and the animals housed in the farms. It was also possible to understand some characteristics of the management of the farms in terms of the work routines adopted (i.e., collection days, number of employees, interval between collections, etc.). Finally, in the second study, an innovation in the methodology for obtaining diluent for freezing swine semen was reported: ultracentrifugation, with or without sonication. The ultracentrifugation of the yolk plasma was beneficial for the parameters of sperm kinetics. On the other hand, the application of sonication, with the objective of reducing LDL particles in the diluent, isolated or combined with ultracentrifugation, was deleterious to these same parameters. Therefore, the first study was important to determine the reference points for the commercial production of swine semen in Brazilian plants and the second one provided a feasable and beneficial alternative for freezing boar semen doses.

RESUMO Foram estudados diferentes diluentes no processo de refrigeração do sêmen da garoupa-verdadeira. Inicialmente, a taxa e a duração da motilidade e a concentração espermática foram avaliadas, caracterizando a qualidade do sêmen fresco. Para os testes de refrigeração a 4ºC, diferentes diluentes foram testados em atmosfera normal e modificada (100% oxigênio). O sêmen fresco apresentou concentração espermática de 3,1±0,2 x 109 células mL-1, motilidade média de 90%, permanecendo móvel, em média, por 3.060 segundos. No experimento de refrigeração, a taxa e a duração média da motilidade foram mantidas adequadas durante 144 horas para o diluente A (70%; 3100 segundos) em atmosfera normal. Na atmosfera modificada, a qualidade do sêmen caiu drasticamente durante as primeiras 24 horas, independentemente do diluente empregado, não propiciando vantagem em sua utilização. A refrigeração do sêmen da garoupa-verdadeira permite manter por até 144 horas uma apropriada qualidade espermática. ABSTRACT This study aimed to evaluate different extenders in refrigerated storage of dusky grouper sperm. Initially, motility rate, motility time, and sperm density were analyzed to characterize the fresh sperm quality. Different diluents were used in the refrigerated storage sperm at 4ºC in normal atmosphere and modified atmosphere (100% oxygen). The fresh sperm has a spermatozoa density of 3.1±0.2 x 109 spermatozoa mL-1, motility rate 90% and motility time of 3,060 seconds. In the experiment of refrigerated storage, the motility rate and the motility time were maintained appropriate for 144 hours for the extender A (70%; 3,100 seconds) in normal atmosphere. In the modified atmosphere, the sperm quality decreased drastically during the first 24 hours, independently of the diluent used, not propitiating advantages. The refrigerated sperm of dusky grouper is a viable alternative for the short-term storage, being possible, to maintain for up to 144 hours an appropriate sperm viability.

O trabalho constou de 5 experimentos efetuados com o intuito de avaliar o efeito da incubacao previa, da taxa de resfriamento, da temperatura de armazenamento e de diluentes sobre a viabilidade de semen suino resfriado. Em todos os experimentos, as doses de semen de 100 mL, contendo 3 bilhoes deespermatozoides, foram mantidas sob resfriamento por um periodo de 120h. Nos experimentos I, II, III e IV o diluente utilizado foi o BTS. No experimento V, alem do BTS utilizou-se tambem o Androhep. Os parâmetros de avaliacao da qualidade do semen foram os percentuais de motilidade (MOT), de acrossomas normais (NAR) e de membranas espermaticas integras (MI). Foram coletados de 5 a 7 ejaculados de 2, 6, 4, 8 e 4 machos nos experimentos I, II, III, IV e V, respectivamente. No experimento I, foram comparados tres tratamentos: armazenamento a 17oC (T1); armazenamento a 5oC com incubacao de 24h a 17oC (T2) e armazenamento a 5oC com queda rapida de temperatura (T3). Houve uma diminuicao (P 0,05) para MOT, NAR e MI entre T2 e T3. Nao houve diferenca (P>0,05) no NAR entre os tratamentos. No experimento III, foram avaliados 4 tratamentos: armazenamento a 17oC (T1); 5°C com incubacao de 24h a 17oC (T2); 17oC com incubacao previa de 8h a 22oC (T3) e armazenamento a 5oC (T4) com duas temperaturas e periodos de incubacao (22oC por 8h e 17oC por 16h). Nao houve diferenca (P>0,05) na MOT, NAR e MI entre T1 e T3; e entre T2 e T4. O armazenamento a 17oC (T1 e T3) apresentou maiores MOT e MI (P 0,05) entre T1 e T3 nem entre T2 e T3 para MOT, NAR e MI. O semen armazenado a 5oC (T4) apresentou menores (P 0,05) em nenhum dos parâmetros analisados. Nao foi observada diferenca (P>0,05) para MOT, NAR e MI entre as temperaturas de 17 e 12°C. O semen armazenado a 5oC apresentou uma viabilidade inferior (P

Introdução: A partição de comprimidos é uma prática extensivamente realizada, principalmente com a finalidade de ajuste de dose dos fármacos. Essa prática está associada a riscos sanitários devido a eventual administração equivocada de doses diferentes daquelas clinicamente recomendadas. Até o momento, poucos estudos tem investigado a influência da composição quali e quantitativa de adjuvantes sobre a qualidade da partição de comprimidos Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar, pela aplicação de planejamento de mistura combinado, a precisão da partição de comprimidos produzidos por granulação via úmida e contendo diferentes diluentes (celulose microcristalina - MCC e fosfato de cálcio dibásico dihidratado – FCD) e aglutinantes (hidroxipropilcelulose -HPC e povidona K-30 - PVP), no intuito de propor uma composição ótima que possibilite alcançar resultados satisfatórios pós-partição. Metodologia: Os grânulos foram obtidos por granulação via úmida usando solução hidroetanólica como líquido aglutinante. Os materiais foram secos em estufa de circulação de ar e então caracterizados quanto ao tamanho médio, distribuição de tamanho, densidade aparente e compactada, índice de Carr e fator de Hausner. Os comprimidos placebo foram obtidos em máquina rotativa utilizando jogo de punção circular não sulcado de 11,5 mm de diâmetro. Diferentes forças de compactação foram empregadas, de forma a manter constante a dureza e espessura dos comprimidos obtidos a partir das diferentes formulações. A partição dos comprimidos foi realizada utilizando partidor de comprimidos comercial e os resultados de perda e variação de massa e de friabilidade foram estatisticamente analisados. Resultados e Discussão: A dureza média dos comprimidos foi 64N (± 2N) e a espessura média foi de 4,46mm (±0,03mm). A friabilidade de todas as formulações foi menor que 1,5%, atendendo as especificações da Farmacopeia Brasileira. Os testes de partição mostraram que o uso da MCC como diluente esteve relacionado aos maiores valores médios de perda e variação de massa (2,85% e 11,03%, respectivamente). Por outro lado, as formulações contendo apenas FCD, apresentaram perda e variação de massa de 1,82% e 8,18%, respectivamente. A aplicação do planejamento de mistura mostrou que o tipo de diluente afetou significativamente as respostas estudadas. O tipo de aglutinante também afetou significativamente a perda e a variação de massa, mas apenas nos comprimidos preparados com MCC, os quais foram negativamente influenciados pela presença de PVP. A menor variação de friabilidade foi observada nos comprimidos contendo FCD e a mistura de HPC e PVP (0,47%). Essa composição (100% FCD e mistura de PVP-HPC, 1:1) foi definida como sendo ótima para partição de acordo com a análise de desejabilidade. Fotomicrografias da secção transversal dos diferentes comprimidos sugeriram que a presença de fibras de celulose reduziu a uniformidade da matriz o que pode estar relacionado às maiores variações observadas durante a partição. Conclusões: Comprimidos placebo obtidos por granulação via úmida apresentaram melhor comportamento de partição e formaram metades menos friáveis quando preparados com FCD. A mistura de diluentes e a interação entre diluente e aglutinante afetou significativamente o comportamento de partição. A aplicação da função desejabilidade permitiu sugerir as proporções de diluentes e aglutinantes com maior potencial para obtenção de comprimidos com bom comportamento de partição. Introduction: Tablet splitting is an extensively performed practice mainly for the purpose of dose adjustment. This practice is associated with significant health risks due to administration of doses that are different from those clinically recommended. Few studies have investigated the influence of the qualitative and quantitative composition of adjuvants on the quality of the tablet splitting. Objective: The objective of this study was to evaluate the accuracy of the tablet splitting produced by wet granulation and containing different diluents (microcrystalline cellulose - MCC and calcium phosphate dibasic dihydrate - CPD) and binders (hydroxypropyl cellulose - HPC and povidone K-30 - PVP), using a combined mix design, in order to suggest an optimum formulation that allows to achieve satisfactory post-splitting results. Methodology: The granules were obtained by wet granulation using hydroethanolic solution as a binder liquid. The materials were dried in an air circulating oven and then had their average particle size, size distribution, apparent density and tapped density, Carr index and Hausner factor determined. Next, the tablets were obtained on a rotary machine using an 11.5 mm diameter unscored round punch set. Different compaction forces were used to keep tablet hardness and thickness at the same level for all formulations. Tablet splitting was performed using a commercial tablet splitter and the results of loss and variation of mass and friability were statistically analyzed. Results and discussion: The average hardness and thickness of the tablets were 64N (± 2N) and 4.46mm (± 0.03mm), respectively. The friability of all formulations was less than 1.5%, in accordance with the specifications of the Brazilian Pharmacopoeia. Splitting tests showed that the use of MCC as a diluent led to loss and mass variation of 2.85% and 11.03%,respectively. On the other hand, formulations containing only CPD as diluent showed 1.82% and 8.18% of loss and mass variation, respectively. The type of diluent had a significant effect on these responses according to the mix design used. The type of binder significantly affected the mass loss and mass variation only in the MCC tablets, which were negatively influenced by the presence of PVP. The lowest friability variation was observed in the tablets containing CPD and the mixture of HPC and PVP (0.47%). This composition (100% CPD and PVP-HPC mixture, 1:1) was defined as optimum for splitting according to the desirability analysis. Cross-sectional photomicrographs of the different tablets suggested that the presence of cellulose fibers reduced matrix uniformity, and this may be related to the greater variations observed in the splitted halves. Conclusions: Placebo tablets obtained by wet granulation presented better splittability and generated less friable halves when prepared CPD. The filler mixture and the interaction between diluent and binder affected tablet splitting. The desirability function allowed to suggest the filler : binder ratios with higher potential to produce tablets with good splitabillity. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Foram avaliados os efeitos da centrifugação associada ao uso de dois diluentes na manutenção da viabilidade espermática em tatus-peba (Euphractus sexcinctus) ao longo do teste de termorresistência (TTR). Amostras de sêmen (n=12), oriundas de 04 machos adultos coletados por eletroejaculação, foram divididas em quatro alíquotas, sendo duas imediatamente diluídas em Tris ou água de coco em pó (ACP-119(r)), e as outras duas centrifugadas (800g10min-1) previamente à diluição. As amostras foram incubadas a 34°C por 3h, e os parâmetros seminais avaliados em intervalos de 1h. Em termos gerais, verificou-se uma redução da viscosidade espermática imediata à diluição em ambos os diluentes, independente do uso da centrifugação. Aos 60 minutos, verificou-se uma redução dos parâmetros avaliados (P0,05). Ainda, verificou-se um efeito deletério da centrifugação sobre a qualidade do sêmen de tatus-peba durante todo o teste de termorresistência. Nas condições do presente estudo, conclui-se que o diluente Tris mostrou-se superior ao ACP-119(r) para a manutenção da viabilidade do sêmen de tatus-peba, sendo desnecessária a realização de centrifugação prévia à diluição. The effects of the centrifugation associated to the use of two extenders on the viability of six-banded armadillo's (Euphractus sexcinctus) sperm were evaluated during a thermo resistance test (TRT). Semen samples (n=12) derived from 04 stud males collected by electroejaculation were divided in four aliquots; two of that were immediately diluted in Tris or powdered coconut water (ACP-119(r)); the two others were centrifuged (800g10min-1) prior to the dilution. Samples were incubated at 34ºC per 3h, and the semen parameters were evaluated at each hour. In general, dilution promoted a reduction in semen viscosity in the use of both diluents using centrifugation or not. At 60min, a decrease was verified for all semen parameters (P

Submitted by CRISTIAN DURÇO PAÇO null (cristianpaco@hotmail.com) on 2016-09-08T12:15:35Z No. of bitstreams: 1 Cristian Durco Paco (pós-defesa doutorado).pdf: 1129309 bytes, checksum: a23761cf3f0c84f447267f7746b86036 (MD5) Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-09-12T19:34:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 paco_cd_dr_bot.pdf: 1129309 bytes, checksum: a23761cf3f0c84f447267f7746b86036 (MD5) Made available in DSpace on 2016-09-12T19:34:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 paco_cd_dr_bot.pdf: 1129309 bytes, checksum: a23761cf3f0c84f447267f7746b86036 (MD5) Previous issue date: 2016-08-16 O propofol é um dos fármacos mais utilizados na prática clínica do anestesiologista. O principio ativo do propofol é insolúvel em água, portanto, para permitir sua difusão nos compartimentos biológicos sem o comprometimento das propriedades anestésicas, utilizou-se, inicialmente, como veículo, óleo vegetal. Nesta emulsão o propofol fica dissolvido na fase- óleo sob a forma de pequenas partículas formando uma dispersão coloidal. As complicações resultantes são: dor a injeção, acidose metabólica, hipertrigliceridemia, e possível rabdomiólise com insuficiência renal. Uma nova formulação do propofol com finalidade de proporcionar maior conforto ao paciente, na busca de superar ou minimizar estes efeitos indesejáveis, principalmente o da dor à injeção, foi proposta, baseada em microemulsões, em substituição à emulsão lipídica. Objetivos: Comparar a incidência de inflamação após a infusão de propofol em dose única e em infusão contínua com o diluente emulsão lipídica (EL) ou com diluente em microemulsão (ME). Estudar o efeito do propofol com ambos os diluentes sobre os aspectos bioquímicos, a pressão arterial média (PAM), a pressão venosa central (PVC), o Sódio e o Potássio plasmáticos além de variáveis teciduais através da microscopia ótica e microscopia eletrônica. Método: Os animais foram divididos em sete grupos de 6 animais, sendo: Grupo SHA – 6 coelhos que receberam apenas o tratamento cirúrgico; Grupo Controle-Infusão em bolus (CRB) – 6 coelhos que receberam solução fisiológica 3mL EV; Grupo ControleInfusão Contínua (CRI) – 6 coelhos que receberam 3 mL de solução fisiológica, seguida da infusão contínua no volume de 0,05 mL/kg/min, por 60 minutos EV; Grupo Propofol EL em bolus (PEB) – 6 coelhos que receberam propofol em emulsão lipídica (3 mg/kg) em bolus EV; Grupo Propofol ME em bolus (PMB) – 6 coelhos que receberam propofol em microemulsão (3 mg/kg) em bolus EV; Grupo Propofol EL contínuo (PEC) – 6 coelhos que receberam propofol em emulsão lipídica, 3 mg/kg em bolus, e em seguida infusão contínua de 0,2 mg/kg/min EV por 60 minutos; Grupo Propofol ME contínuo (PMC) – 6 coelhos que receberam propofol em microemulsão, 3 mg/kg em bolus, e em seguida infusão contínua de 0,2 mg/kg/min EV por 60 minutos. Foram estudados atributos hemodinâmicos e sanguíneos, durante 4 momentos: M0, 15 minutos após o término da preparação cirúrgica; M1, 5 minutos após a infusão em bolus do propofol ou do soro fisiológico nos grupos CRB, CRI, PEB e PMB ou 5 minutos após o início da infusão contínua nos grupos PEC e PMC; M2,15 minutos após a infusão em bolus do propofol ou do soro fisiológico nos grupos CRB, CRI, PEB e PMB ou 15 minutos após o início da infusão contínua nos grupos PEC e PMC; M3,60 minutos após a infusão em bolus do propofol ou do soro fisiológico nos grupos CRB, CRI, PEB e PMB ou 60 minutos após o início da infusão contínua nos grupos PEC e PMC, momento que correspondeu ao término do estudo e sacrifício dos animais por sobredose de anestésicos. A análise estatística dos resultados foi efetuada utilizando-se programa computacional em linguagem BASIC, empregando-se a Análise de Perfil (MORRISON, 1967), com os testes das hipóteses. Para as variáveis que apresentaram distribuição normal e homogeneidade de variâncias será utilizada a análise de perfil, caso contrário será realizado o teste de Friedman para comparação dos momentos em cada grupo e o teste de Kruskal Wallis para comparação dos grupos em cada momento. Resultados: Os grupos foram homogêneos quanto aos parâmetros estudados, diferindo apenas na quantidade de IL-6 plasmática quando se utilizou diluente microemulsificado. Os achados de microscopia eletrônica tiveram comportamento muito próximo ao observado na microscopia ótica, com tendência de maior reação inflamatória com o uso do diluente micro-emulsificado. Conclusões: Nas condições experimentais empregadas no presente estudo, não foi observada diferença estatisticamente significante entre os grupos com o uso de diluentes com emulsão lipídica, microemulsão ou soro fisiológico. Houve, apenas, uma tendência do grupo submetido ao propofol microemulsificado de ter uma maior intensidade de células inflamatórias. Propofol is currently the agent of choice for both induction and maintenance of general anesthesia. This study compared the incidence of endothelial injury after single-dose or continuous propofol infusion in conventional lipid-based emulsion (EL) versus microemulsion (ME), and also assessed the inflammatory effects caused by both propofol formulations. Method: Forty-two rabbits (2.5- 4.5 Kg) were randomly allocated into 7 groups of 6 animals each and treated as follows: SHAM– surgical treatment alone; Bolus Control Group –3 mLintravenous (IV) bolus of saline; Continous Infusion Control Group–3 mL- IV bolus of saline followed by a continuous infusion of 0.2 ml/kg/min for 60 min; Bolus LE Propofol Group –IV bolus of LE propofol (3 mg/kg); Bolus ME Propofol Group–IV ME propofol bolus (3 mg/kg); Continuous LE Propofol Group– IV LE propofol bolus (3 mg/kg) followed by a continuous infusion of 0.2 ml/kg/min for 60 min; Continuous ME Propofol Group– IV ME propofol bolus (3 mg/kg) followed by a continuous infusion of 0.2 ml/kg/min for 60 min. Hemodynamic and blood parameters were recorded at 4 time points. Results: The groups investigated were found to be homogeneous with regard to the parameters assessed, except for IL-6 plasma concentration, which differed among them when propofol microemulsion was used. The findings of electron microscopy were very close to the behavior observed in optical microscopy , with a trend towards greater inflammatory reaction with the use of micro- emulsified diluent. Conclusions: Under the experimental conditions of this study, no statistically significant difference was observed among groups when saline, lipid emulsion or microemulsion solvents were used. However, the group receiving propofol in microemulsion tended to show a greater number of damaged cells.

Submitted by ANDRÉS ARMANDO MENDIBURU ZEVALLOS (andresmendiburu@yahoo.es) on 2016-07-15T12:31:49Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado - Andrés Mendiburu Zevallos.pdf: 10122540 bytes, checksum: 27e9d42c96010bdf65e82963bba965ac (MD5) Rejected by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: No campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” foi informado que seria disponibilizado o texto completo porém no campo “Data para a disponibilização do texto completo” foi informado que o texto completo deverá ser disponibilizado apenas 12 meses após a defesa. Caso opte pela disponibilização do texto completo apenas 12 meses após a defesa selecione no campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” a opção “Texto parcial”. Esta opção é utilizada caso você tenha planos de publicar seu trabalho em periódicos científicos ou em formato de livro, por exemplo e fará com que apenas as páginas pré-textuais, introdução, considerações e referências sejam disponibilizadas. Se optar por disponibilizar o texto completo de seu trabalho imediatamente selecione no campo “Data para a disponibilização do texto completo” a opção “Não se aplica (texto completo)”. Isso fará com que seu trabalho seja disponibilizado na íntegra no Repositório Institucional UNESP. Por favor, corrija esta informação realizando uma nova submissão. Agradecemos a compreensão. on 2016-07-18T13:13:42Z (GMT) Submitted by ANDRÉS ARMANDO MENDIBURU ZEVALLOS (andresmendiburu@yahoo.es) on 2016-07-18T13:25:08Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado - Andrés Mendiburu Zevallos.pdf: 10122540 bytes, checksum: 27e9d42c96010bdf65e82963bba965ac (MD5) Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-07-18T17:59:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 zevallos_aam_dr_guara_par.pdf: 1108974 bytes, checksum: bd69d1179e3699dee9c3fee12fa8a7c4 (MD5) Made available in DSpace on 2016-07-18T17:59:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 zevallos_aam_dr_guara_par.pdf: 1108974 bytes, checksum: bd69d1179e3699dee9c3fee12fa8a7c4 (MD5) Previous issue date: 2016-07-01 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O presente trabalho é um estudo dos limites de inflamabilidade em ar de compostos que apresentam carbono e hidrogênio na sua molécula; e, de compostos que apresentam carbono, hidrogênio e oxigênio na sua molécula, chamados de compostos C–H e C–H–O, respectivamente. Os limites de inflamabilidade são de importância para a operação com segurança de uma grande variedade de processos industriais. Os limites dependem de diferentes variáveis como a temperatura inicial da mistura, a pressão inicial da mistura e a presença de diluentes, entre outros. Foram desenvolvidos métodos para determinar os limites de inflamabilidade em ar e na pressão atmosférica para três configurações: (a) quando a mistura combustível–ar se encontra na temperatura de referência; (b) quando a mistura combustível–ar se encontra a diferentes temperaturas e, (c) para misturas combustível–diluente–ar na temperatura de referência. Todos os métodos demonstraram exatidão na comparação com dados experimentais. Os limites de inflamabilidade de misturas de dois ou mais compostos inflamáveis em ar, são determinados aplicando a Lei de Le Chatelier. É apresentada uma dedução original para a dita Lei, assim como a sua validação. A Lei de Le Chatelier apresenta bons resultados para os limites inferiores de inflamabilidade. Os limites de inflamabilidade do etanol anidro e hidratado foram determinados experimentalmente a baixas temperaturas e pressões de 100, 80, 60, 40 e 20 kPa. Obtiveram-se equações empíricas para determinar os limites de inflamabilidade do etanol a diferentes temperaturas e pressões iniciais da sua mistura com ar. The present work is a study of the flammability limits in air of compounds which have carbon and hydrogen in their molecules; and, of compounds which have carbon, hydrogen and oxygen in their molecules, called C–H and C–H–O compounds, respectively. The flammability limits are of importance for the safety operation of a great variety of industrial processes. The limits depend upon different variables such as the initial temperature of the mixture, the initial pressure of the mixture and the presence of diluents, among others. Methods for the determination of the flammability limits in air at atmospheric pressure were developed for three different configurations: (a) when the fuel–air mixture is at the reference temperature; (b) when the fuel–air mixture is at different temperatures and, (c) for fuel–diluent–air mixtures at the reference temperature. All the methods showed to be accurate when compared with experimental data. The flammability limits of mixtures of two or more flammable compounds in air, are determined by the Law of Le Chatelier. An original deduction of that Law is presented, as well as its validation. The Law of Le Chatelier presents accurate results for the lower flammability limits. The flammability limits of anhydrous and hydrated ethanol were experimentally determined at low temperatures and at pressures of 100, 80, 60, 40 and 20 kPa. Empirical equations were obtained for the determination of the flammability limit of ethanol at different initial temperatures and pressures in air.

O trabalho constou de 3 experimentos com a finalidade de avaliar a influencia de tres diluentes sobre a motilidade e a integridade da membrana espermatica e de dois diluentes sobre o desempenho de femeas inseminadas com semen armazenado, no maximo, por 48h. Nos experimentos I e II, as doses de semen de 100 e 80 mL, contendo 3 e 2,5 bilhoes de espermatozoides, respectivamente, foram mantidas sob resfriamento a 17oC por um periodo de 144h. No experimento III, os diluentes utilizados foram o BTS e Androhep ® Enduraguard ™ . Os parâmetros de avaliacao da qualidade do semen foram os percentuais de motilidade (Mot) e de membranas integras (MI), no experimento I, e Mot no experimento II. No experimento III, foram avaliados as taxas de retorno ao estro (TRE), de parto (TP), de parto ajustada (TPA), numero de leitoes nascidos totais (NT), nascidos vivos (NV), natimortos (NM) e mumificados (MM). Foram coletados 5 ejaculados de 5 machos para o experimento I e 3 a 18 ejaculados de 18 machos para os experimentos II e III. No experimento III, foram inseminadas 882 femeas com ordem de parto entre 1 e 8. No experimento I, foram comparados tres diluentes: BTS (T1); Androhep ® Enduraguard ™ (T2) e Androhep ® (T3). Houve uma diminuicao (P ® Enduraguard ™ (T2). Nao houve diferenca (P>0,05) para Mot entre T1 e T2, em nenhum momento de avaliacao. No experimento III, foram avaliados dois diluentes: BTS (T1) e Androhep ® Enduraguard ™ (T2). Nao houve diferenca (P>0,05) na TRE, TP, TPA, NT, NV, NM e MM entre os tratamentos. Apesar do semen diluido em BTS ter apresentado motilidade inferior aos outros dois diluentes, no experimento I, isto nao ocorreu no experimento II. O desempenho das femeas inseminadas com semen armazenado ate 48h nao foi influenciado pelo diluente utilizado (BTS ou Androhep ® Enduraguard ™ ).

Street drugs when in great demand in an illicit market become not only more expensive but are also subject to extensive adulteration and dilution. These fraudulent practices may also contribute to the amplification of toxic effects observed in the abuse of certain drugs including cocaine hydrochloride. The number of seizures reflects the increase of illicit use of cocaine powder in the city of S.Paulo, where the identity of the suspected drug is its hydrochloride form. Routine analytical procedures in enforcement laboratories in Brazil now comprise techniques involving thin layer chromatography for presumptive identification of the drug and eventually gas chromatography for its confirmation or quantification whenever required. The determination of cocaine content, adulterants and diluents in street samples is not only of clinical value but also important for enforcement activities, recognition of its geographical distribution and allocation. So, the aim of this study was to continue examining the quality of cocaine hydrochloride in the illicit market of the city of S.Paulo. Cocaine and adulterant contents were determined as well as the identification of several diluents in 389 out of 1958 samples of "white powder" seized in the city of São Paulo. Thin-layer and gas-liquid chromatography (FID) and GC-MS were used for the determination of cocaine and adulterant contents. Spot-tests and thin-layer chromatography were the techniques applied for the identification of diluents. The results were as follows: neither cocaine nor adulterants were detected in 17 samples (4.4%); of all positive samples (95.6 %) for cocaine, 14% consisted of no more than 200 mg/g; in 70% cocaine purity ranged from 201 to 550 mg/g and in 16% it was not greater than 700 mg/g. The local anesthetics lidocaine and procaine were detected in 19 samples (4,9%) in a range from 10 to 602 mg/g. Caffeine was present in only two samples (179 and 356 mg/g). The main diluents detected were carbonates and bicarbonates (19.2%); silicates (13.8%), sugars (9.59%); starch (5.6%), borate (3.8%) and sulphates(2.8%). Contaminants (secondary products) originated from coca paste refining or decomposition processes were not analysed.Teores de cocaína e adulterantes bem como vários diluentes foram determinados em 389 amostras de pó branco apreendidas na cidade de São Paulo, no ano de 1997. Cocaína e seus adulterantes foram analisados por cromatografia em camada delgada, cromatografia em fase gasosa (detetor de ionização de chama) e cromatografia em fase gasosa acoplado a espectrometria de massa (CG/MS). Diluentes foram analisados através de "spot tests" e da cromatografia em camada delgada. Foram obtidos os seguintes resultados: em 4,4% das amostras não foram detectados cocaína e adulterantes; de todas as amostras positivas para cocaína, 14% não continham mais que 200 mg/g de pó; em 70% a pureza da cocaína variou de 201 a 550 mg/g e em 16% não foi maior que 700 mg/g. Os anestésicos locais lidocaína e procaína foram detectados em 19 amostras em concentrações que variaram de 10 a 602 mg/g de pó. Cafeína foi encontrada em duas amostras. Os principais diluentes detectados foram: carbonatos e bicarbonatos, silicatos, açúcares, amido, borato e sulfatos. Contaminantes (produtos secundários) originários do refino da pasta de coca ou de processos de decomposição não foram analisados.

O aumento populacional, urbanização e atividades industriais e agrícolas têm aumentado o aporte de poluentes em ecossistemas aquáticos. Para avaliar a qualidade da água e os efeitos dos poluentes na biota utiliza-se o biomonitoramento. Uma espécie de peixe nativa, vivípara e de pequeno porte potencialmente utilizável como biomonitora e modelo ecotoxicológico para espécies dulcículas e estuarinas no país é a Jenynsia multidentata (Anablepidae, Ciprinodontiforme). Como a reprodução é uma das funções biológicas que podem ser afetadas pela poluição, e a qualidade dos espermatozoides pode contribuir para o sucesso reprodutivo, testes que avaliem sua qualidade produzem bioindicadores sensíveis e seguros de poluição aquática. Um dos parâmetros utilizados para medir a qualidade espermática é a motilidade, sendo esta influenciada principalmente pela osmolalidade do meio. Como não se encontrou estudos determinando a osmolalidade ideal para a J. multidentata, foi testado os efeitos de diferentes osmolalidades (240-460 mOsm/kg) da Solução Balanceada de Hanks (HBSS), na motilidade e outros parâmetros de qualidade espermática (potencial de membrana mitocondrial e integridade de membrana plasmática e DNA) em J. multidentata. Além disso, foi coletado sangue da artéria caudal e medida a osmolalidade plasmática. A osmolalidade plasmática em J. multidentata foi de 326 ± 3,9 mOsm/Kg. Osmolalidades entre 240 e 320 ativaram mais de 50% dos espermatozoides, sendo que as taxas de motilidade mais constantes e duradouras foram entre 300 e 320 mOsm/Kg (isosmoticidade), por até 7 dias. As maiores taxas de integridade de membrana foram entre 280-360 mOsm/Kg, potencial de membrana mitocondrial 300-460 mOsm/Kg, e as maiores taxas de integridade de DNA entre 260-380 mOsm/Kg no 4° dia de avaliação. Em 4 dias de avaliação, tanto a hipo (240 mOsm/Kg) ou hiperosmolalidade (460 mOsm/Kg) apresentaram as menores taxas de motilidade, integridade de membrana plasmática e integridade de DNA. O potencial de membrana mitocondrial foi reduzido somente na hipo-osmolalidade (240 mOsm/Kg) que também foi mais prejudicial a integridade de membrana plasmática. É provável que o estresse oxidativo gerado pelo choque osmótico seja um dos fatores que está reduzindo a qualidade espermática em meio não isosmótico, como relatada em mamíferos. Tendo definido a osmolalidade adequada do meio de armazenamento, foram avaliado os efeitos do cobre na reprodução em machos de J. multidentata. O cobre é um metal essencial para os seres vivos, mas em concentrações elevadas torna-se tóxico. Uma das características conhecidas do cobre é a sua capacidade de provocar estresse oxidativo, e por suas características intrínsecas, os espermatozoides são suscetíveis a danos oxidativos. Como os mecanismos de toxicidade do cobre no sistema reprodutivo em peixes não estão elucidados, é possível que o estresse oxidativo seja um desses mecanismos. Sendo assim, avaliou-se os efeitos de concentrações ambientalmente de cobre presentes nos ecossistemas aquáticos de água doce (0, 4.5, 9 e 18 µg L-1), de forma aguda (4 dias) e crônica (21 dias), em parâmetros de qualidade espermática (motilidade, potencial de membrana mitocondrial e integridade de membrana plasmática e DNA) e espermatogênese (concentração espermática) em J. multidentata. O ensaio bioquímico de lipoperoxidação foi utilizado como marcador de estresse oxidativo. Verificou-se aumento significativo (0,4907 µmol TMP/mg de peso seco) (p

Utilizaram-se 36 ejaculados de três cachaços, diluídos em partes iguais, com os diluentes Beltsville Thawing Solution (BTS), Zorlesco-modificado (ZOR) e BTZOR (desenvolvido na Universidade Estadual de Maringá), para avaliar as características do sêmen e o período de conservação até 25% de motilidade progressiva (MP) para cada diluente. O modelo estatístico foi de blocos inteiramente casualizados, bloqueando cachaço/mês. O período de conservação foi maior no BTZOR (4,94±0,30 dias), seguido pelos ZOR (4,62±0,29 dias) e BTS (3,27±0,30 dias). Análises de regressão mostraram comportamento quadrático na MP para os meios BTS e ZOR e cúbico para o BTZOR, com o decorrer dos dias de conservação. O vigor (V) apresentou comportamento linear para BTS e ZOR e quadrático para BTZOR. O grau de aglutinação apresentou comportamento linear para todos os diluentes. O BTZOR conservou sêmen por maior período de tempo, mantendo melhores médias de motilidade progressiva e vigor, seguido pelos ZOR e BTS. Thirty-six ejaculates from three boars, equally diluted in the diluents Beltsville Thawing Solution (BTS), Modified Zorlesco (ZOR) and BTZOR (developed at Universidade Estadual de Maringá), were used to evaluate the characteristics of each ejaculate and the semen conservation period until 25% of progressive motility (PM) for each diluents. The experimental design was completely randomized blocks, blocking boar/month. The better conservation period was BTZOR (4.94±0.30 days), followed by ZOR (4.62±0.29 days) and BTS (3.27±0.30 days). Regression analyses showed a quadratic behavior for BTS and ZOR and cubic behavior for BTZOR to PM, as the days for conservation go through. Vigor (V) showed linear behavior to BTS and ZOR and quadratic behavior for BTZOR. Degree agglutination showed linear behavior for all diluents. The BTZOR maintained the quality for more days, maintaining the best averages of PM and V, followed by ZOR and BTS.

The performances of the diluents TES and CEBRAN II were compared as cryopreservatives of semen from non human primates of the genus Ateles. The experiment was carried out using one Ateles marginatus and two Ateles paniscus specimens, males and adults, maintained in the same captivity conditions at the National Center of Primates (CENP-SVS/MS). The animals were subjected to clinical and andrological examinations - testicular biometry - before the semen collection by eletroejaculation. Evaluations of motility and forward movement in the fresh semen were made. Semen were made dilution was made with the diluents TES and CEBRAN II. The ejaculates were diluted with the diluents (2:1proportion), packed in 0.25mL plastic straws and cryopreserved in liquid nitrogen. After thawing, the packed ejaculates were appraised in thermo resistance test (TTR). The averages of volume and concentration were, respectively, 1.94mL (0.83) and 3,020,000 sptz/mL (275.97). The pH 8 and seminal coagulation were observed in all samples. The results suggest that the TES diluent presents better efficiency in the preservation of Ateles semen than CEBRAN II.

Minist?rio da Sa?de. Secretaria de Vigil?ncia em Sa?de. Instituto Evandro Chagas. Centro Nacional de Primatas. Ananindeua, PA, Brasil. Universidade Federal Rural da Amaz?nia. Instituto de Sa?de e Produ??o Animal. Bel?m, PA, Brasil. Universidade de S?o Paulo. Faculdade de Medicina Veterin?ria e Zootecnia. S?o Paulo, SP, Brasil. Universidade Federal do Par?. Central de Biotecnologia e Reprodu??o Animal. Bel?m, PA, Brasil. Sem Afilia??o The performances of the diluents TES and CEBRAN II were compared as cryopreservatives of semen from non human primates of the genus Ateles. The experiment was carried out using one Ateles marginatus and two Ateles paniscus specimens, males and adults, maintained in the same captivity conditions at the National Center of Primates (CENP-SVS/MS). The animals were subjected to clinical and andrological examinations - testicular biometry - before the semen collection by eletroejaculation. Evaluations of motility and forward movement in the fresh semen were made. Semen were made dilution was made with the diluents TES and CEBRAN II. The ejaculates were diluted with the diluents (2:1proportion), packed in 0.25mL plastic straws and cryopreserved in liquid nitrogen. After thawing, the packed ejaculates were appraised in thermo resistance test (TTR). The averages of volume and concentration were, respectively, 1.94mL (0.83) and 3,020,000 sptz/mL (275.97). The pH 8 and seminal coagulation were observed in all samples. The results suggest that the TES diluent presents better efficiency in the preservation of Ateles semen than CEBRAN II.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThiberioSC_DISSERT.pdf: 700205 bytes, checksum: 7a5563445307116480b9ce4be88608c4 (MD5) Previous issue date: 2010-03-05 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior We evaluated the effect of centrifugation and the use of Tris-based extender supplemented with different sugars as well as different rates of thawing on the kinematic pattern of motility and other characteristics of frozen-thawed semen from captive collared peccaries. Semen from 13 collared were collected by electroejaculation and evaluated subjectively for motility, vigor and by computer analysis (CASA). Other features such as sperm viability, membrane integrity and morphology of spermatozoa were also evaluated. Semen was divided into four portions: two were subjected to centrifugation and then diluted in a tris plus fructose and the other in tris supplemented with glucose, the other two forms were immediately diluted in the same way. Egg yolk (20%) and glycerol (6%) were added to all groups. The samples were frozen in liquid nitrogen and thawed using two thawing rates (37ºC/1min and 55°C/7s). The results showed a reduction in total motility immediately after the dilution using both extenders and interference in some kinematic parameters such as BCF, LIN and STR for the samples centrifuged, , in addition, an increase in the number of total and secondary morphological defects were observed in centrifuged samples, independent to the sugar used (P 0.05). Furthermore, no interaction between the supplementation of sugar and thawing rates were observed for any semen parameter evaluated (P> 0.05). In conclusion, it is not necessary to centrifuge the semen from collared prior to the procedure of freezing and thawing, which can be achieved through a Tris-based extender supplemented with either fructose or glucose, as well as using different thawing rates (37ºC/1min and 55°C/7s). Avaliou-se o efeito da centrifugação e da utilização de diluentes a base Tris suplementados com diferentes açúcares além de diferentes taxas de descongelação sobre os padrões cinemáticos de motilidade e outras características do sêmen congeladodescongelado de catetos em cativeiro. O sêmen de 13 catetos foi coletado por eletroejaculação e avaliados subjetivamente e através de análise computadorizada (CASA) para motilidade, vigor. Outras características como viabilidade espermática, integridade da membrana e morfologia dos espermatozóides também foram avaliadas. O sêmen foi dividido em quatro alíquotas: duas foram submetidas à centrifugação e em seguida diluídas, uma em tris acrescido de frutose e a outra em tris acrescido de glicose, as outras duas forma imediatamente diluídas da mesma forma. Gema de ovo (20%) e glicerol (6%) foram adicionados para todos os grupos. As amostras foram congeladas em nitrogênio líquido e descongeladas usando duas taxas de descongelação (37ºC/1min e 55ºC/7s). Os resultados demonstraram uma redução na motilidade total imediatamente após a diluição em ambos diluentes para as amostras centrifugadas, bem como em alguns parâmetros cinemáticos como BCF, LIN e STR além do aumento no número de alterações morfológicas totais e secundarias independente do açúcar utilizado (P 0,05). Além disso, nenhuma interação entre a suplementação de açúcar e as taxas de descongelação foi observada para qualquer parâmetro seminal avaliado (P> 0,05). Em conclusão, não é necessário centrifugar o ejaculado de catetos antes dos procedimentos de congelação e descongelação, para os quais pode-se utilizar um diluente a base de Tris suplementado tanto com frutose ou glicose, bem como utilizando taxas de descongelação diferentes (37ºC/1min e 55ºC/7s).

A pesquisa foi conduzida com o objetivo de avaliar diferentes tipos e volumes de diluentes por meio do desempenho reprodutivo de 72 fêmeas suínas inseminadas artificialmente. Utilizou-se o delineamento em blocos ao acaso, em esquema fatorial 3 × 2, com três diluentes e dois volumes inseminantes. O sêmen utilizado foi obtido de três machos de fertilidade comprovada. Os ejaculados foram diluídos em partes iguais com os diluentes comerciais A, B e C, constituindo doses com 1,5 bilhão de espermatozoides em volumes de 15 ou 30 mL. As variáveis analisadas foram taxa de parto, índice de retorno ao estro, número total de leitões nascidos, número de leitões nascidos vivos, mumificados e natimortos e peso da leitegada ao nascimento. Não foram observadas diferenças entre as taxas de parto e as taxas de retorno ao estro. As maiores médias de número total de nascidos, nascidos vivos e peso de leitegada foram de fêmeas inseminadas com doses contendo os diluentes B e C. Não houve diferenças entre os volumes inseminantes dentro dos diluentes B e C para nenhuma das variáveis. Para o diluente A, o volume que proporcionou maior tamanho de leitegada e número de leitões nascidos vivos foi o de 15 mL. O número de leitões natimortos e mumificados não diferiu entre os tipos e volumes de diluentes. A inseminação intrauterina de fêmeas suínas de ordem de parto 2 a 5 com doses inseminantes de 15 mL diluídas em diluentes de curta duração (diluentes B ou C) permite índices de desempenho reprodutivo satisfatórios. The study was conducted with the objective of evaluate different types and volumes of diluents through the reproductive performance of 72 artificially inseminated sows. A randomized complete design was used in a 3 × 2 factorial arrangement, with three diluents and two semen volumes. The semen used was obtained from three boars of known fertility. The ejaculates were diluted in equal parts, with the commercial diluents A, B and C, constituting semen doses of 1.5 billion spermatozoids in volumes of 15 or 30 mL. The analyzed variables were farrowing rate, indexes of return to estrus, total number of piglets born, number of piglets born alive, mummified and stillborn piglets, and litter weight at birth. Differences were not observed between the farrowing rates and indexes of return to estrus. The greatest means of total number of piglets born, piglets born alive and litter weight at birth were from females inseminated with semen doses containing diluents B and C. There were no differences among the inseminating volumes within the diluents B and C for any of the variables. For diluent A, the volume that provided the largest litter size and number of piglets born alive was 15 mL. The number of stillborn and mummified piglets did not differ between the treatments. The intrauterine insemination of sows from two to five parities, with inseminating doses of 15 mL diluted in short term diluents (diluents B or C) give satisfactory indexes of reproductive performance.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_guilherme_van_der_laan.pdf: 723829 bytes, checksum: 399e8e1ec5f5ec9b7f77f1ffa1d0af80 (MD5) Previous issue date: 2007-11-30 Adding extenders to poultry semen is currently used in artificial insemination programs to optimize the management of genetically superior males. Fresh semen fertility usually declines after 1 hour of collection, raising the need to use diluents and low temperatures to store semen for longer periods. Low density lipoprotein (LDL), extracted from the egg yolk, is used as a component of various mammalian semen diluents, however its application on poultry semen has not been evaluated. Regarding cryopreservation, different methodologies have been developed during the past years. One alternative is to use dimethylacetamide (DMA) as a cryoprotectant. The best results with DMA are obtained when semen is subjected to ultra-fast freezing, in pellets, and to a fast thawing at 60ºC. The objective of this work was to establish protocols to preserve rooster sperm, focusing on the use of LDL as a component of the refrigeration diluent, and on DMA as a internal cryoprotectant for freezing. To reach these objectives, the effect of adding different levels of LDL liposomes to the cooling diluent, upon the quality characteristics of semen refrigerated at 5 °C, was evaluated. The quality of semen frozen with DMA, packed in straws or pellets, and thawed in three different temperatures was also evaluated. The results obtained allow to conclude that: adding 6% of LDL liposomes to the cooling diluent preserves the general sperm quality, suggesting that improvements on fertility could be obtained if a limit in lipoprotein supplementation is imposed; body temperature (40°C) is most suitable for thawing sperm frozem with DMA; and packing sperm in straws is more efficient than packing in pellets. This last observation is of great value, since storing semen in straws is more appropriate due to sanitary reasons, and more convenient for ejaculates identification, especially for field application of genetic banks. A adição de diluentes ao sêmen de aves é uma prática rotineiramente empregada em programas de inseminação artificial para melhorar o manejo de machos geneticamente superiores. A fertilidade do sêmen fresco normalmente decai 1 hora após a coleta, por isso a necessidade do uso de diluentes e temperaturas hipotérmicas para o armazenamento do sêmen por períodos mais prolongados. A Lipoproteína de Baixa Densidade (LDL), extraída da gema de ovo, tem sido utilizada na composição de diversos diluentes de sêmen para mamíferos, porém, ainda não tinha sido avaliada a sua aplicação em diluentes de resfriamento para sêmen de aves. Em relação ao congelamento, diversos métodos foram desenvolvidos ao longo dos anos. Uma das alternativas é o uso da Dimetilacetamida (DMA) como crioprotetor. Os melhores resultados obtidos com DMA ocorrem quando o sêmen é submetido ao congelamento ultra-rápido na forma de pellets e a um rápido descongelamento à 60ºC. O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de protocolos de preservação de sêmen de galos, enfocando o uso de Lipoproteínas de Baixa Densidade (LDL) como um componente do diluente para resfriamento, e a Dimetilacetamida (DMA) como crioprotetor interno para o congelamento. Para isto, foi verificado o efeito da adição de diferentes níveis de lipossomas de LDL na composição do diluente de resfriamento, sobre as características de qualidade do sêmen resfriado à 5 °C. Também foi avaliada a qualidade do sêmen congelado utilizando DMA como crioprotetor, envasado em palhetas ou pellets, e descongelados em três diferentes temperaturas. Os resultados obtidos nestes estudos nos permitiram concluir que: a adição de lipossomas de LDL ao diluente de resfriamento mantém a qualidade geral dos espermatozóides quando adicionado na proporção de 6%; sugerindo que melhorias na fertilidade podem ser obtidas desde que seja respeitado um limite de adição desta lipoproteína ao diluente; a temperatura corporal (40°C) foi a mais apropriada para descongelamento de sêmen criopreservado com DMA; e ainda, o envase em palhetas é mais eficiente em relação ao pellet. Esta última observação é de grande valor, visto que o armazenamento do sêmen em palhetas é mais adequado por razões sanitárias, e mais conveniente para a identificação dos ejaculados, especialmente para a aplicação a campo de bancos genéticos.

Atualmente, tem-se dado maior atenção ao desenvolvimento de tecnologias para estocagem de sêmen de peixes em curto prazo, por dias ou semanas, utilizando diluentes de sêmen que não ativem a motilidade espermática. Essa técnica é indicada em piscicultura para facilitar a reprodução artificial ou aumentar sua eficiência. Conduziu-se este trabalho com o objetivo de verificar o efeito do diluidor BTS (Beltsville Thawing Solution - MINITUB®) na qualidade do sêmen de pacu, após a coleta, enriquecido com iodeto de potássio e com citrato de sódio. Foram utilizados seis reprodutores de pacu (Piaractus mesopotamicus) submetidos à indução hormonal e liberação dos gametas, manualmente. O sêmen coletado de cada macho foi dividido em três frações, as quais receberam diluição (1:3) com o diluidor 1 (BTS 5% + iodeto de potássio 0,16%), diluidor 2 (BTS 5% + citrato de sódio 1,28%) e uma fração não diluída (controle). A ativação espermática foi realizada com água destilada, e, a seguir, foram avaliadas as taxas e duração da motilidade espermática, cujos valores médios respectivos foram de 95,00 ± 3,16% e 486,83 ± 314,55 segundos para o sêmen in natura, 80,00 ± 9,49% e 221,50 ± 207,89 segundos para o sêmen com o diluidor 1 e 80,00 ± 11,40% e 320,66 ± 181,14 segundos para o sêmen no diluidor 2. Em seguida, foram coletadas amostras para a avaliação da concentração espermática, que obteve um valor médio de 13,89 ± 1,26 x 10(9)/mL. Pelas análises estatísticas, verificou-se que não houve diferença significativa na duração da motilidade (P>0,05) entre o sêmen “in natura” e os diluidores 1 e 2. A motilidade espermática foi estatisticamente melhor (P0,05) and ranged from 221,50 ± 207,89 seconds (semen diluted in extender 1) to 486,83 ± 314,55 seconds (semen in natura). After that samples for the evaluation of the sperm concentration were collected, with an average value of about 13,89 ± 1,26 x 10(9)/mL. One can conclude, that BTS may be used to preserve pacu semen, as long as the salts used may be added on a higher concentration, in order to increase the BTS solution osmolarity. It is also suggested that other salts should be tested.

Twenty-four ejaculates were collected from five boars for the conventional freezing procedure at the Veterinary School of Hannover (group 1A-1B) and for an extended holding time procedure (group 2A-2B and 3A-3B). The semen were prediluted in two different diluents, coconut water in natura and Merck I medium before freezing (experiment A) and prediluted only with Merck I, but cooling and freezing with coconut water in natura or lactose (experiment B). The semen were arranged into three groups according to the different holding periods before freezing, group 1A-1B (sperm-rich phase, preserved for 4 hours by 15°C), group 2A-2B (sperm-rich phase, preserved for 16 hours by 18°C) and group 3A-3B (total semen, preserved for 16 hours by 18ºC). The quality of the thawed boar spermatozoa was evaluated by subjective motility (SMOT), computerassisted motility (Cell Motion Analyser, Strömberg-Mica - CMOT) and morphology of acrosomal ridges (NAR) after fixation in formol citrate. The acrosomal integrity (NAR) was 65% (group 1A), 71% (group 2A) and 75% (group 3A) for semen prediluted with coconut water and 60% (group 1A), 68% (group 2A) and 68% (group 3A) for semen prediluted with Merck I medium, respectively (experiment A); and 56% (group 1B), 68% (group 2B) and 73% (group 3B) for semen freezing with coconut water diluent, and 60% group 1B), 68% (group 2B and 3B) for semen freezing with lactose (experiment B). Thus, did not differ significantly (p Foram utilizados vinte e quatro ejaculados de cinco diferentes cachaços na congelação de sêmen suíno, sendo doze deles pré-diluídos em água de coco in natura e em Merck I, utilizando a lactose como diluidor de refrigeração e de congelação (experimento A) e doze pré-diluídos apenas com Merck I. Após três diferentes pré-tratamentos, a água de coco in natura foi utilizada como diluidor de refrigeração e de congelação, sendo a lactose utilizada como controle (experimento B). Seguiu-se a metodologia convencional de congelação de sêmen desta espécie -Tierärztliche Hochschule Hannover (grupo 1A-1B) e um novo processo com longo período de equilíbrio (grupos 2A-2B e 3A-3B). A qualidade do sêmen descongelado foi avaliada pela motilidade subjetiva (SMOT), motilidade computadorizada (CMOT) e morfologia das células com borda apical normal (NAR), após fixação em formol citrato. As porcentagens de espermatozóides com NAR foram 65% (grupo 1A), 71% (grupo 2A) e 75% (grupo 3A) para o sêmen pré-diluído em água de coco e 60% (grupo 1A), 68% (grupo 2A) e 68% (grupo 3A) para aquele pré-diluído com Merck I (experimento A); e 56% (grupo 1B), 68% (grupo 2B) e 73% (grupo 3B) para o sêmen congelado em água de coco e 60% (grupo 1B), 68% (grupo 2B e 3B) para o sêmen congelado em lactose (experimento B). Não havendo, portanto, diferença estatística entre os dois pré-diluentes e os dois diluentes de refrigeração e de congelação (p

Foram colhidos seis ejaculados de seis diferentes cachaços e diluídos com Androhep e Merck III, utilizando-se diferentes temperaturas de refrigeração. Após avaliação (aparência, volume, concentração, motilidade e morfologia), o ejaculado foi fracionado em porções de 100 ml (2 bilhões/ml) e diluído na proporção 1 + 1. As porções de sêmen foram resfriadas lenta (32ºC ;Þ; 20ºC ;Þ; 17ºC ;Þ; 5ºC) ou rapidamente (32ºC ;Þ; 5ºC) durante 2, 24 ou 48 horas. Após cada intervalo de refrigeração, 5 ml de sêmen foram incubados a +38ºC e avaliados quanto à aparência, volume, concentração, motilidade e morfologia4. A refrigeração das diferentes porções foi medida por um termômetro eletrônico (Therm Typ 2280-8, Fa. Minitüb - from -200,0 until + 600,0ºC) introduzindo-se o eletrodo no sêmen. A refrigeração lenta mostrou maior motilidade e NAR (p

From February to June 1992, were made 85 semen collections from adult male goats, belonging to the following breeds: Alpine, Saanen, Toggemburg and Anglonubian. Seminal material was divided into 193 samples frozen in TRIS and fat-free milk diluents, through two freezing methods, that is, with and without seminal plasma. Physical and morphologic characteristics were evaluated soon after collections, having been found individual variations in volume, progressive motility, and sperm pathology. In thawed samples, new evaluations of progressive motility were made, as well as thermorresistance tests (TRT) and ratio of intact acrosomal caps. Samples diluted in TRIS with 2.6% of egg-yolk were more efficient in freezing process than those in fat-free milk diluent. Withdraw of seminal plasma did not affect the results of freezing. Relatively to acrosomal caps there were no noted differences. Three months later, samples diluted in TRIS without seminal plasma had lost progressive motility. Foram colhidos 85 ejaculados de 4 reprodutores caprinos das raças Alpina, Saanen, Toggemburg e Anglonubiana, que foram divididos em 193 amostras de sêmen com o objetivo de proceder à congelação nos diluidores à base de TRIS e à base de leite desnatado, usando 2 métodos de congelação: com presença e ausência do plasma seminal. Analisaram-se as características físicas e morfológicas do sêmen logo após a colheita. Foi observada variação individual no volume, motilidade retilínea e progressiva e patologia espermática dos ejaculados dos animais estudados. Após a congelação, foi feita avaliação da motilidade retilínea e progressiva, do teste de termorresistência e da porcentagem de acrossomos intactos dos espermatozóides. O diluidor à base de TRIS com 2,6% de gema de ovo mostrou-se mais eficiente na congelação do sêmen de caprinos em relação ao diluidor à base de leite desnatado. A retirada do plasma seminal não alterou os resultados de congelação do sêmen de caprinos. Após 3 meses de estocagem em nitrogênio líquido, realizou-se uma nova análise da motilidade retilínea e progressiva dos espermatozóides, quando os ejaculados submetidos à retirada do plasma seminal e congelados em diluidor à base de TRIS apresentaram perda da motilidade retilínea e progressiva.

Semen was collected from six stud dogs to compare five extenders in the semen freezing process. Each ejaculate was divided in five parts and added to tris-fructose-citric acid, glicine, lactose, skim milk and tris-fructose-citrate extenders. The semen was diluted at 37°C in extenders without glycerol, in the ratio 1:1 and cooled for 60 minutes to reach a 5°C temperature. Then, extenders with glycerol in the ratio of 2:1 were added to give the final prefreezing concentration of 4% of glycerol. The diluted semen with the cryoprotectant was maintained for a further 60 minutes in refrigeration to equilibrate the spermatozoa in the glycerol and packaged in 0.5 ml plastic straws. The straws were maintained for 30 minutes in vapor, plunged and stored in liquid nitrogen. Sperm morphology was evaluated before and after freezing, whereas progressive motility (%) and velocity of forward progression (0-5) were appraised in different periods of the freezing process. The extender tris-fructose-citric acid showed the best post thaw progressive motility and velocity of forward progression compared to the others extenders. Semen freezing increased major sperm morphological abnormalities, regardless of the extender. Foram utilizados ejaculados de 6 cães para comparar cinco diluidores no processo de congelação de sêmen. Cada ejaculado foi dividido em 5 partes e adicionadas aos diluidores tris-fructose-ácido cítrico, glicina, lactose, leite desnatado e tris-fructose-ácido cítrico. O sêmen foi diluído a 37°C sem adição de glicerol na proporção 1:1 (fração A) e refrigerado durante 60 minutos até atingir a temperatura de 5ºC, quando foi adicionada a fração dos diluidores contendo glicerol (fração B) na proporção 2:1, atingindo a concentração final de 4% de glicerol. O sêmen diluído permaneceu por 60 minutos em refrigeração para equilíbrio no glicerol, sendo envasado em palhetas de 0,5 ml, mantido por 30 minutos no vapor de nitrogênio e imerso e armazenado em nitrogênio líquido. Foram avaliados a motilidade progressiva retilínea, o vigor e os defeitos espermáticos antes da congelação e após a descongelação do sêmen em água a 37°C. Os resultados mostraram que os diluidores tris-fructose-ácido cítrico e glicina apresentaram as melhores médias de motilidade progressiva retilínea e de vigor espermático após a descongelação. A congelação aumentou a freqüência dos defeitos espermáticos maiores independente do diluidor.

A trealose é um dissacarídio com potencial emprego como crioprotetor quando adicionada aos meios para congelamento de sêmen ovino. Este experimento foi realizado para verificar os efeitos da temperatura de adição (30°C e 4°C) e da concentração de trealose (2%, 4% e 6%) sobre o sêmen ovino congelado em palhetas, utilizando como base as formulações INRA e TRIS/FRUTOSE. Os efeitos estudados em ambos experimentos foram medidos através da avaliação da motilidade espermática (MOT) e da integridade de acrossomas (INTA) em diferentes momentos após o descongelamento (0h, 2h e 5h). Os presentes resultados não recomendam a inclusão da trealose visando incrementar a qualidade in vitro do sêmen ovino congelado em palhetas nas concentrações e diluentes testados, porém, sugerem maiores estudos quanto a sua toxidade e possíveis interações com outros constituintes dos diluentes já formulados para o congelamento de sêmen ovino. This study was aimed to evaluate the possible effects of the addition of trehalose to extenders developed for freezing ram semen in straws. The effects of addition temperature (30°C and 4°C) and concentration of trehalose (2, 4 and 6%) on INRA and TRIS/FRUTOSE diluents was evaluated. Their effects were studied through motility rate and by acrosome integrity at different incubation times after thawing (0, 2 and 5h). The results do not recommend the inclusion of trehalose in these diluents. However, it would be interesting to learn more about toxicity and interactions between the components of the extenders and trehalose in ram sperm frozen in straws.

RESUMO Foram estudados diferentes diluentes no processo de refrigeração do sêmen da garoupa-verdadeira. Inicialmente, a taxa e a duração da motilidade e a concentração espermática foram avaliadas, caracterizando a qualidade do sêmen fresco. Para os testes de refrigeração a 4ºC, diferentes diluentes foram testados em atmosfera normal e modificada (100% oxigênio). O sêmen fresco apresentou concentração espermática de 3,1±0,2 x 109 células mL-1, motilidade média de 90%, permanecendo móvel, em média, por 3.060 segundos. No experimento de refrigeração, a taxa e a duração média da motilidade foram mantidas adequadas durante 144 horas para o diluente A (70%; 3100 segundos) em atmosfera normal. Na atmosfera modificada, a qualidade do sêmen caiu drasticamente durante as primeiras 24 horas, independentemente do diluente empregado, não propiciando vantagem em sua utilização. A refrigeração do sêmen da garoupa-verdadeira permite manter por até 144 horas uma apropriada qualidade espermática.