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A meningoencefalite bacteriana é uma afecção neurológica que acomete cães e gatos e se dá pela migração de bactérias de focos infecciosos próximos ou distantes do sistema nervoso central através da corrente sanguínea, atravessando a Barreira hemato-encefálica e atingindo o encéfalo e meninges. Nesse contexto, o presente trabalho tem por objetivo relatar um caso de Meningoencefalite bacteriana secundária à vaginite em um canino, fêmea, sem raça definida, de 3 anos de idade, atendida no Hospital Veterinário Dr. Vicente Borelli localizado em Aracaju, Sergipe. O animal apresentava incoordenação motora, inclinação da cabeça para o lado direito e andar em círculos. Foram realizados exame físico, hemograma, perfil renal, perfil hepático e fração proteica, cistocentese guiada por ultrassom, análise físico-química, cultura da urina, coleta de LCR para realização de citologia e cultura bacteriana e coleta da secreção vaginal para cultura bacteriana e antibiograma. Por fim realizou-se laparotomia exploratória para descarte de coto uterino. Ao exame físico constatou-se presença de nistagmo horizontal bilateral, rigidez cervical, ausência de resposta a dor profunda, ausência de reflexo tibial cranial, déficit proprioceptivo no membro posterior direito além de secreção vulvar enegrecida. No hemograma, constatou-se discreta anemia normocítica normocrômica, trombocitopenia e monocitopenia. Os perfis renal e hepático e a fração proteica não apresentaram alterações. A urianálise apresentou aspecto turvo, pH alcalino, presença de hemácias e leucócitos, além de cristais como fosfato amorfo e triplo. Na urocultura obteve-se crescimento, isolamento e identificação do microrganismo Streptococcus spp. Os resultados encontrados no exame citológico do líquor foram pequena quantidade de material proteico eosinofílico, amorfo, finamente granular, densidade e proteínas pouco aumentados. A ultrassonografia e laparotomia exploratória auxiliaram no descarte dos diagnósticos diferenciais da vaginite. Quanto aos exames microbiológicos das amostras de LCR e secreção vaginal obteve-se em ambas o crescimento do gênero de bactérias gram-positivas Staphylococcus. Dessa forma o presente relato permitiu concluir que a vaginite pode desencadear meningoencefalite por conta da translocação bacteriana através da circulação sanguínea.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq O conhecimento de novos compostos antimicrobianos capazes de atuar contra microrganismos merece atenção na atualidade. Diversas moléculas têm sido estudadas por suas atividades antibacterianas e, dentre elas, estão os inibidores de tripsina, com destaque para o inibidor de tripsina purificado de sementes de tamarindo (ITTp). O presente trabalho objetivou apresentar os mecanismos de ação antibacteriana de inibidores de tripsina por meio de uma revisão sistemática (RS) e um estudo in silico de simulação de dinâmica molecular (DM). Para a revisão, reuniu-se estudos publicados na literatura, visando responder à pergunta: quais são os mecanismos de ação antibacteriana dos peptídeos e proteínas inibidores de tripsina? Inicialmente, foi elaborado e registrado, no Registro Prospectivo Internacional de Revisões Sistemáticas (PROSPERO), um protocolo de RS sob número: CRD42020189069. Dessa forma, a lista de verificação Preferred Reporting Items Checklist for Systematic Review and Meta-Analysis Protocols (PRISMA-P) foi utilizada para delinear o protocolo e PRISMA para a revisão sistemática. Os artigos foram selecionados de acordo com critérios de elegibilidade, conforme o PICOS (população, intervenção, controle, resultados e tipos de estudos). As bases de dados utilizadas foram PubMed, ScienceDirect, Scopus, Web of Science, BVS e EMBASE. Foram incluídos artigos originais resultantes de estudos com ratos e/ou camundongos, estudos in vitro (cultura bacteriana) e em células, que descreveram os tratamentos, efeitos e os mecanismos antibacterianos de peptídeos ou proteínas do tipo inibidores de tripsina. Os artigos foram selecionados e os dados foram extraídos por dois revisores independentes. A avaliação da qualidade metodológica foi realizada por meio da ferramenta OHAT (Office of Health Assessment and Translation). Na RS, foram resgatados 2382 artigos, sendo, ao final da busca, 17 elegíveis para a revisão. Constatou-se que grande parte dos inibidores de tripsina foram capazes de gerar efeito bacteriostático ou bactericida, dependendo das concentrações utilizadas. Foi visto que apenas quatro estudos se aprofundaram no mecanismo diretamente na membrana das bactérias, em três estudos os autores utilizaram S. aureus, E. coli. Um quarto estudo avaliou a ação antibacteriana sobre as proteases endógenas extraídas das próprias bactérias (S. enterica e S. aureus). Para o estudo de simulação de DM, utilizou-se o modelo número 56, na conformação número 287 do ITTp (ITTp 56/287) e o modelo de bicamada lipídica gerado pelo servidor CHARMM-GUI, para avaliar o comportamento estrutural e as interações por simulações de DM foram realizadas usando o pacote Gromacs 5.1.2. Foi observada maior interação do ITTp 56/287 com a membrana GP, apresentando energia potencial de interação (EPI) de –1094.97 kcal.mol1 quando comparada à interação com a membrana Gram-negativa (GN), -444.337 kcal.mol1. Foi possível identificar que, na interação ITTp 56/287-GP, os resíduos de aminoácidos de arginina apresentaram maior EPI, enquanto na interação ITTp 56/287-GN, foram com os resíduos de glutamina. Este estudo primeiramente esclarece e sistematiza a ação antibacteriana dos inibidores de tripsina, sendo de grande relevância e gerando informações para possíveis pesquisas futuras sobre essas vias. Adicionalmente, o estudo por simulação de DM aponta o ITTp como candidato para futuros estudos que o consolide como uma opção no tratamento mais eficaz de infecções bacterianas. The knowledge of new antimicrobial compounds capable of acting against microorganisms deserves attention today. Several molecules have been studied for their antibacterial activities and, among them, are trypsin inhibitors, especially the purified trypsin inhibitor from tamarind seeds (ITTp). The present work aimed to present the antibacterial action mechanisms of trypsin inhibitors through a systematic review (SR) and an in silico study of molecular dynamics (DM) simulation. For the review, studies published in the literature were gathered in order to answer the question: what are the antibacterial action mechanisms of trypsin inhibitor peptides and proteins? Initially, a SR protocol under number: CRD42020189069 was prepared and registered in the International Prospective Registry of Systematic Reviews (PROSPERO). Thus, the Preferred Reporting Items Checklist for Systematic Review and Meta-Analysis Protocols (PRISMA-P) was used to delineate the protocol and PRISMA for the systematic review. The articles were selected according to eligibility criteria, according to the PICOS (population, intervention, control, results and types of studies). The databases used were PubMed, ScienceDirect, Scopus, Web of Science, BVS and EMBASE. Original articles resulting from studies with rats and/or mice, in vitro studies (bacterial culture) and in cells were included, which described the treatments, effects and antibacterial mechanisms of peptides or proteins of the trypsin inhibitor type. Articles were selected and data were extracted by two independent reviewers. The assessment of methodological quality was performed using the OHAT (Office of Health Assessment and Translation) tool. In RS, 2382 articles were retrieved, and at the end of the search, 17 were eligible for review. It was found that most trypsin inhibitors were able to generate bacteriostatic or bactericidal effects, depending on the concentrations used. It was seen that only four studies delve into the mechanism directly in the bacterial membrane, in three studies the authors used S. aureus, E. coli. A fourth study evaluated the antibacterial action on endogenous proteases extracted from the bacteria themselves (S. enterica and S. aureus). For the DM simulation study, model number 56 was used, in conformation number 287 of the ITTp (ITTp 56/287) and the lipid bilayer model generated by the CHARMM-GUI server, to evaluate the structural behavior and interactions by DM simulations were performed using the Gromacs package 5.1.2. A greater interaction of ITTp 56/287 with the GP membrane was observed, presenting a potential energy of interaction (EPI) of –1094.97 kcal.mol1 when compared to the interaction with the Gram-negative membrane (GN), -444,337 kcal.mol1. It was possible to identify that, in the interaction ITTp 56/287-GP, the arginine amino acid residues showed higher EPI, while in the interaction ITTp 56/287-GN, they were with the residues of glutamine. This study firstly clarifies and systematizes the antibacterial action of trypsin inhibitors, being of great relevance and generating information for possible future research on these pathways. Additionally, the DM simulation study points the ITTp as a candidate for future studies that consolidate it as an option in the most effective treatment of bacterial infections.

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária A mastite clínica (MC) é uma das doenças mais prevalentes na exploração leiteira, sendo caracterizada por elevados custos e prejuízos para o produtor. A este prejuízo está associado principalmente a utilização de antibióticos, tanto pelo seu valor, quanto pelo descarte de leite proveniente da sua utilização. O objetivo deste estudo foi analisar o benefício clínico e económico da realização de culturas bacterianas no apoio à implementação de um tratamento seletivo nos casos de MC. O estudo foi realizado numa exploração leiteira localizada no Ribatejo, onde um total de 332 casos de MC no período de 2018/2019 contribuíram para a análise de dados. Após a realização da cultura realizada na exploração pelos tratadores, e a interpretação do seu resultado, os casos de MC foram distribuídos por dois grupos: tratamento com antibiótico e sem tratamento antibiótico. As amostras que levaram a multiplicação de agentes Gram-positivos determinaram o tratamento com antibióticos, e amostras com multiplicação de agentes Gram-negativos ou ausência de multiplicação, determinaram a ausência de tratamento antibiótico. Os casos tratados com antibiótico tiveram um custo médio de 146,03€/caso enquanto os casos do grupo sem tratamento tiveram um custo médio de 48,59€/caso. A realização da cultura bacteriana demonstrou que 68% dos casos de MC não eram elegíveis para utilização de antibiótico. Portanto, o produtor ao utilizar a cultura bacteriana na sua exploração pode se beneficiar economicamente ao reduzir em 60% o impacto global da doença na sua exploração. Além disso, não foram encontradas diferenças clínicas estatisticamente significativas nas taxas de cura e refugo entre os grupos tratados com antibiótico e sem tratamento. ABSTRACT - ANALYSIS OF THE CLINICAL AND ECONOMIC BENEFIT OF BACTERIAL CULTURE IN COWS IN SUPPORTING THE TREATMENT OF CLINICAL MASTITIS - Clinical mastitis (CM) is one of the most prevalent diseases on the dairy farm and is characterized by high costs and losses for the farmer. This damage is mainly associated with the use of antibiotics, both for their value and for the disposal of milk from their use. The objective of this study was to analyze the clinical and economic benefit of using a bacterial culture system to support the implementation of selective treatment in CM cases. The study was conducted at a dairy farm located in Ribatejo, where a total of 332 cases of CM in the period 2018/2019 contributed to the data analysis. After culture and interpretation of the results, the CM cases were distributed in two groups: antibiotic treatment and no antibiotic treatment. The samples that led to the growth of Gram-positive agents determined the treatment with AB, and samples with growth of Gram-negative agents or no growth, determined the absence of antibiotic treatment. Cases treated with antibiotics had a mean cost of 146.03€/case while cases in the untreated group had a mean cost of 48.59€/case. Bacterial culture demonstrated that 68% of CM cases were not eligible for antibiotic use. Therefore, the producer by using the bacterial culture on his farm could benefit economically by reducing the overall impact of the disease on his farm by 60%. Furthermore, no statistically significant clinical differences were found in cure and cull rates between antibiotic treated and no antibiotic treatment groups. N/A