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[SPA] Esta tesis doctoral se presenta bajo la modalidad de compendio de publicaciones. El sector de la acuicultura es un sector relativamente reciente que ha superado en producción a la pesca extractiva. Como consecuencia de la creciente demanda de alimentos para la población mundial, la producción de pescado ha tenido que evolucionar rápidamente y aumentar sus producciones mediante la acuicultura. Por parte de la investigación y de la empresa se han realizado progresos en el ámbito de la reproducción, de la alimentación, del manejo de los lotes, de la prevención de enfermedades y de las instalaciones. Sin embargo, han sido muy escasas las estrategias dirigidas a la mejora genética de las especies acuícolas. Dentro de los programas de mejora genética, el primer criterio de selección se ha centrado en los caracteres de crecimiento. En la actualidad, están empezando a considerarse otros caracteres como la calidad del pescado íntegro y de la carne, y está adquiriendo mayor relevancia la resistencia a enfermedades debido a las grandes pérdidas económicas que ocasiona. En este sentido, la presente tesis doctoral se centra en la propuesta de programas de mejora genética en dorada (Sparus aurata) y corvina (Argyrosomus regius) que mejoren la competitividad del sector. Por un lado, en el caso de la dorada, que es una especie en la que se ha avanzado más en el estudio de la componente genética para los caracteres de crecimiento, la tesis se centra en la propuesta de selección para caracteres más innovadores como es la resistencia a enfermedades y el perfil de ácidos grasos del filete. Por otro lado, en la corvina se ha comenzado con el estudio de parámetros genéticos para caracteres productivos como el crecimiento o composición del filete ya que al ser una especie emergente se carece de esta información. El estudio de resistencia a enfermedades en dorada se realizó mediante un reto a juveniles de dorada que fueron inoculados mediante una inyección intraperitoneal con el patógeno Photobacterium damselae subsp. Piscicida. Previa a la inoculación se realizó una extracción de sangre en la que se determinaron marcadores inmunológicos innatos (nivel de peroxidasa y actividad bactericida) y adquiridos (inmunoglobulinas M). El objetivo del estudio fue determinar si estos marcadores inmunológicos en condiciones nativas podían ser considerados como criterio de selección. Los resultados nos mostraron una correlación genética positiva y alta del peso corporal de los peces frente a la resistencia al patógeno y los días a la muerte, por lo que los peces de mayor peso ofrecían mayor resistencia al patógeno y tardaban más tiempo en morir. Por otro lado, marcadores inmunes como la actividad peroxidasa mostraron heredabilidades medias y una tendencia a una correlación genética positiva con el peso corporal de los peces. Por lo que la actividad peroxidasa se podría incluir en un programa de mejora genética junto con el peso del pez dando lugar a lo que se ha llamado un pez “coping style”, más resistentes no solo a enfermedades sino también a condiciones ambientales, y con mejores caracteres de crecimiento. El estudio de parámetros genéticos para el perfil de ácidos grasos en el filete de dorada se realizó en una población que fue criada hasta peso comercial en una jaula en el mar Mediterráneo. Dichos individuos fueron muestreados al inicio y al final del engorde para peso corporal y longitud total. Tras el sacrificio de los peces se analizaron diferentes variables de calidad de la carne (proteína, colágeno, grasa y humedad) y el perfil de ácidos grasos del filete. El filete de dorada mostró un elevado porcentaje de ácidos grasos monoinsaturados (MUFA, 44,4%), destacando el 18:1n9c (33,6%), seguido por el porcentaje de ácidos grasos polinsaturados (PUFA, 29,8%), destaca el 22:6n3 (6,8%) y finalmente el porcentaje de ácidos grasos saturados fue 28,3%, siendo el mayoritario el 16:0. Se observó una heredabilidad media para los caracteres de crecimiento y las variables de calidad de la carne, excepto para el colágeno que mostró una heredabilidad baja. Respecto al perfil de ácidos, se observó una heredabilidad media para el ácido graso 18:1n9c, para MUFA y para el ratio n3/n6; y baja para el 22:6n3. Además, se observó una correlación fenotípica negativa entre el contenido en grasa del filete y el porcentaje de PUFA. Por tanto, una selección para incrementar el peso de la dorada acompañada de un incremento del contenido de grasa del filete puede conducir a una disminución del porcentaje de PUFA. El poder incluir el perfil de ácidos grasos del filete como criterio de selección puede ser interesante desde el punto de vista del consumidor por el papel de estos en las enfermedades cardiovasculares y desde el punto de vista del animal por su relación con su sistema inmune. Para poder llevar a cabo el estudio de parámetros genéticos en la corvina (Argyrosomus regius), fue previamente necesario el desarrollo de un test de parentesco mediante un panel de marcadores moleculares microsatélites, ya que no se contaba con él como sucedía en el caso de la dorada. Los paneles de microsatélites son una herramienta robusta y muy eficaz en la realización del pedigrí. El estudio se llevó a cabo con una población de reproductores de corvina y sus descendientes, procedente del grupo Avramar S.L. Inicialmente se probaron 21 marcadores microsatélites, pero tras su ensayo por mala calidad de amplificación, ser poco polimórficos, patrón de bandas poco claro y alelos intermedios nos quedamos con un panel con 8 marcadores microsatélites específicos e interespecíficos de corvina, el cual se denominó Super Multiplex Argyrosomus regius (SMAr). Con este panel se mostraron unos resultados de asignación del 95% a una única pareja posible de progenitores. Finalmente, el estudio en corvina se centró en analizar caracteres de interés comercial, como variables de crecimiento (peso y longitud), caracteres morfológicos (longitud estándar y altura en el punto medio y en el pedúnculo de la aleta caudal) obtenidos mediante análisis de imágenes y calidad de la carne (contenido de grasa, proteína, humedad y colágeno). Se realizó en la población de corvina procedente de un lote de reproductores de la empresa Alevines del Sureste, del grupo Avramar S.L., que fueron criadas en dos ambientes diferentes (jaula y tanque). Los resultados mostraron que los peces criados en la jaula presentaban mayores valores de caracteres de crecimiento, morfológicos y un mayor porcentaje de grasa, en cuanto al porcentaje de proteína este fue menor que en los peces procedentes del tanque. Además, se obtuvieron heredabilidades medias para caracteres de crecimiento, caracteres morfológicos y porcentaje de grasa, lo que nos indican que son criterios que se pueden incluir en un programa de mejora genética, para obtener individuos mejorados para dichas variables. El análisis de imágenes se mostró de gran utilidad para evaluar variables de crecimiento y morfológicas, nos aporta gran cantidad de información y valores más objetivos, ya que evitamos los errores de las mediciones manuales. Por los resultados expuestos, podemos concluir que la selección para resistencia a enfermedades va a ser uno de los objetivos de mayor interés en la dorada en concreto, y en las especies acuícolas en general. En otros caracteres de calidad, como el contenido en grasa y su perfil de ácidos grasos, hay que seguir investigando para ver cómo pueden ser implementados en los esquemas de selección. Finalmente, el desarrollo de nuevas especies y tecnologías es otro de los objetivos en acuicultura y sobre ellas se debe comenzar a estudiar en programas de mejora genética. [ENG] This doctoral dissertation has been presented in the form of thesis by publication. The aquaculture sector is a relatively recent sector and which has overtaken extractive fishing in terms of production. As a consequence of the growing demand for food for the world’s population, fish production has had to evolve rapidly and increase its production through aquaculture. Research and companies have advanced in the areas of breeding, feeding, herd management, disease prevention, and facilities. However, there have been very few strategies aimed at genetic improvement of aquaculture species. Within genetic improvement programs, the first selection criterion has focused on growth traits. Nowadays, other traits are starting to be considered, such as whole fish and meat quality, and disease resistance is becoming more relevant since it can cause major economic losses. In this sense, this doctoral thesis focuses on the proposal of possible genetic improvement programs in gilthead sea bream (Sparus aurata) and meagre (Argyrosomus regius) to improve the competitiveness of the sector. On the one hand, in the case of sea bream, a species in which more progress has been made in the study of the genetic component for growth traits, the thesis focuses on the proposal of selecting for more innovative traits such as disease resistance and the fatty acid profile of the fillet. On the other hand, the study of genetic parameters for productive traits such as growth or fillet composition has been initiated in meagre, as it is an emerging species and such information is lacking. The study of disease resistance in gilthead sea bream was conducted by challenging juvenile gilthead sea bream that were inoculated by intraperitoneal injection with the pathogen Photobacterium damselae subsp. piscicida. Before inoculation, blood was drawn and innate (peroxidase level and bactericidal activity) and acquired (immunoglobulin M) immune markers were determined. The aim of the study was to determine whether these immunological markers under native conditions could be considered selection criteria. The results showed a positive and high genetic correlation of fish body weight with pathogen resistance and days to death, whereby heavier fish offered greater resistance to the pathogen and took longer to die. On the other hand, immune markers, such as peroxidase activity, showed a medium heritability and a tendency for positive genetic correlation with fish body weight. Therefore, peroxidase activity could be included in a genetic improvement program along with fish weight, resulting in what has been termed a “coping style” fish, more resistant not only to disease but also to environmental conditions, and with better growth traits. The study of the genetic parameters of the fatty acid profile in sea bream fillet was carried out in a population that was reared to commercial weight in a cage in the Mediterranean Sea. Samples were taken from those individuals at the beginning and at the end of fattening to determine body weight and total length. After the fish had been slaughtered, different meat quality variables (protein, collagen, fat, and moisture) and the fatty acid profile of the fillet were analyzed. Gilthead sea bream fillet showed a high percentage of monounsaturated fatty acids (MUFA, 44.4%), with 18:1n9c (33.6%) standing out, followed by the percentage of polyunsaturated fatty acids (PUFA, 29.8%), with 22:6n3 (6.8%) standing out, and finally the percentage of saturated fatty acids was 28.3%, with 16:0 being the majority. Medium heritability was observed for growth traits and meat quality variables, except for collagen, which showed low heritability. Regarding the acid profile, medium heritability was observed for 18:1 fatty acid, for MUFA and for ration3/n6; and low for 22:6n3. In addition, a negative phenotypic correlation was observed between fillet content and percentage of PUFA. Therefore, a selection for increased gilthead sea bream weight accompanied by an increase in fillet fat content may lead to a decrease in PUFA. From the consumer’s point of view, it may be interesting to include the fatty acids profile of the fillet as a selection criterion because of their role in cardiovascular diseases and from the animal’s point of view because of their relationship with its immune system. To carry out the study of genetic parameters in meagre (Argyrosomus regius), it was necessary to previously develop a parentage test using a microsatellite molecular marker panel, since none was available unlike in gilthead sea bream. Microsatellite panels are a robust and very effective tool for parentage testing. The study was conducted with a population of meagre broodstock and their offspring from the Avramar S.L. group. Initially, 21 microsatellite markers were tested, but after testing them for poor amplification quality, low polymorphism, unclear banding pattern and intermediate alleles, we were left with a panel with eight meagre-specific and interspecific microsatellite markers, which was named Super Multiplex Argyrosomus regius (SMAr). The results of the 95% assignment to a single pair of possible parents, using the exclusion method implemented in Vitassing software (v.8_2.1), are shown. Finally, the study in meagre focused on the analysis of characteristics of commercial interest, such as growth variables (weight and length), morphological characteristics (standard length and height at the midpoint and peduncle of the caudal fin) obtained by image analysis, and meat quality (fat, protein, moisture, and collagen content). The study was carried out on a population of 616 meagre from a batch of broodstock from the company Alevines del Sureste, belonging to the Avramar S.L. group, which were reared in two different environments (cage and tank). The results showed that the fish reared in the cage presented higher values of growth and morphological characteristics and a higher percentage of fat, while the percentage of protein was lower than in the fish in the tank. In addition, mean heritabilities were obtained for growth characteristics, morphological characteristics and fat percentage, indicating that these are criteria that can be included in a genetic improvement program to obtain improved individuals for these variables. Image analysis proved very useful for evaluating growth and morphological variables, providing us with a large amount of information and more objective values, since this avoided possible errors in the case of manual measurements. From the results presented, we can conclude that selection for disease resistance will be one of the most interesting targets in gilthead sea bream in particular, and in aquaculture species in general. In other quality traits, such as fat content and fatty acid profile, further research is needed to see how these can be implemented in selection schemes. Finally, the development of new species and technologies is another objective in aquaculture that should be studied in breeding programs. European Maritime and Fisheries Fund (EMFF) through the PROGENSA III project (Mejora de la Competitividad del Sector de la Dorada a Través de la Selección Genética, JACUMAR program), These studies were also funded by Fondo Europeo Marítimo y de Pesca (FEMP) code PR.FEM.PPA201700.14. Fundación Séneca through the GENECOR project (Desarrollo de un programa piloto de Mejora Genética en corvina (Argyrosomus regius), 21002/PI/18), I was founded by a pre-doctoral research fellow 20716/FPI/18. Fundación Séneca. Cofinanciado por grupo Avramar, Alevines del Sureste S.L. Región de Murcia (Spain)”. Esta tesis doctoral se presenta bajo la modalidad de compendio de publicaciones. Está formada por un total de cuatro artículos: Paper 1.-: Antonio Vallecillos, Elena Chaves-Pozo, Marta Arizcun, Rubén Pérez, Juan M. Afonso, Concepción Berbel, Jaume Pérez-Sánchez, Emilio María-Dolores y Eva Armero, 2021. Genetic Parameters for Photobacterium damselae subsp. piscicida Resistance, Immunological Markers and Body Weight in Gilthead Seabream (Sparus aurata). Aquaculture 543, 736892. https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2021.736892 Paper 2.-: Antonio Vallecillos, María Marín, Martina Bortoletti, Javier López, Juan M. Afonso, Guillermo Ramis, Marta Arizcun, Emilio María-Dolores y Eva Armero, 2021. Genetic Analysis of the Fatty Acid Profile in Gilthead Seabream (Sparus aurata). Animals 11, 2889. https://doi.org/10.3390/ani11102889 Paper 3.-: Antonio Vallecillos, Emilio María-Dolores, Javier Villa, Francisco Rueda, José Carrillo, Guillermo Ramis, Mohamed Soula, Juan M. Afonso y Eva Armero, 2022. Development of the first microsatellite multiplex PCR panel for meagre (Argyrosomus regius), a commercial aquaculture species. Fishes-17201632022, Cuartil Q2. (ISSN 2410-3888). Paper 4.-: Antonio Vallecillos, Emilio María-Dolores, Javier Villa, Francisco Miguel Rueda, José Carrillo, Guillermo Ramis, Mohamed Soula, Juan Manuel Afonso y Eva Armero, 2021. Phenotypic and Genetic Components for Growth, Morphology and Flesh-Quality Traits of Meagre (Argyrosomus regius) Reared in Tank and Sea Cage. Animals 11, 3285. https://doi.org/10.3390/ani11113285 Escuela Internacional de Doctorado de la Universidad Politécnica de Cartagena Universidad Politécnica de Cartagena Programa de Doctorado en Técnicas Avanzadas en Investigación y Desarrollo Agrario y Alimentario (TAIDA)

The present study aims to solve the problem related to the difficulty in measuring the bluefin tuna (Thunnus thynnus L.) larval length when the larvae curl for several reasons (freezing, fixing, handling or in notochord flexion phase). To do that, the relationship between the horizontal eye diameter and the notochord length has been studied in 1143 bluefin tuna larvae from the eye pigmentation up to the full notochord flexion (between 2 and 15 days post hatching) reared in the facilities of the Marine Aquaculture Plant in Mazarrón (Murcia, SE Spain) belonging to the Spanish Institute of Oceanography (IEO). Our results shown that the horizontal eye diameter (ED) could be used to estimate the notochord length (NL) of bluefin tuna larvae up to complete notochord flexion (around 15 days old), using the equation: NL= 1.81953 + 6.5031 ED (r2 = 89.79%, p, El presente estudio intenta resolver la problemática asociada a la dificultad de medir la longitud de larvas de atún rojo (Thunnus thynnus L.) cuando éstas se curvan debido a varios factores (al congelarlas, fijarlas, debido a la manipulación o en la fase de flexión de la notocorda). Para ello, se ha estudiado la relación existente entre el diámetro ocular (que usualmente no se ve afectada por los citados factores) y la longitud estándar en 1143 larvas de atún rojo desde la pigmentación del ojo hasta la completa flexión de la notocorda (entre dos y quince días después de la eclosión) cultivadas en las instalaciones de la Planta de Cultivos Marinos de Mazarrón (Murcia), del Instituto Español de Oceanografía (IEO). Nuestros resultados muestran que la medida horizontal del diámetro ocular (LO) puede ser utilizada para la estimación de la longitud de la notocorda (LN) de larvas de atún rojo que han completado la flexión de la notocorda (alrededor de 15 días de vida) usando la ecuación LN= 1,81953 + 6,5031 LO (r2 = 89,79%, p

Being bigger is not always the best option to survive and mortality rates do not always decline with increasing larval size. Smaller size at a given age could under certain condition and at certain stages of development confer a survival advantage on individual members of a larval cohort. References

En este trabajo se presenta un mecanismo para el control del hinchado de la vejiga natatoria de las larvas de dorada mediante el uso de una ecosonda científica de 200 kHz. Esta técnica tiene como finalidad conocer la cantidad de larvas que han realizado el hinchado de la vejiga, este dato nos ayudará a determinar la calidad de un cultivo larvario por métodos acústicos, que no resultan invasivos para las larvas ni interfieren en su crecimiento. Además, esta técnica permitirá realizar el control del crecimiento larvario en fases posteriores.

Hasta el momento actual, el cultivo integral de atún rojo se inicia con la recogida de puestas de huevos embrionados procedentes de reproductores ubicados en jaulas flotantes en el mar. Uno de los graves problemas que plantea esta técnica es que los huevos vienen acompañados de huevos de otras especies que también se están reproduciendo en el área. Algunas de estas especies tienen fases larvarias piscívoras y alcanzan dicha fase antes que el propio atún, y por tanto depredan sobre él. La presencia de algunas de estas especies en los cultivos larvarios de atún rojo supone una mortalidad por depredación que reduce en gran medida la producción de juveniles de esta especie. En este trabajo se ha testado la posibilidad de eliminar estos huevos separándolos por flotabilidad ya que en la mayoría de los casos es menor que la de los huevos de atún rojo, ya que estos tienen una flotabilidad especialmente elevada. Justificación, Until present time, Atlantic bluefin tuna full life cycle aquaculture in Europe has started with the collection of fertilized eggs from breeders located in floating cages in the sea. One of the most relevant issues of that technique is the presence of eggs of not desired fish species with concomitant reproduction season mixed with tuna, which due to their fast development can be able to predate bluefin tuna larvae at their earlier stages. This fact seriously threatens the survival of bluefin tuna larvae and juveniles production. In the present study, the possibility of doing away with these undesirable eggs by using a differential buoyancy technique has been tested, which in most cases it has been proved to be inferior to the buoyancy of bluefin tuna eggs.

Larvae of Sardina pilchardus were obtained in captivity from fertilized eggs captured in the wild and grown in a 10000-L tank. Isochrysis galbana, Artemia franciscana nauplii and live zooplankton were used as prey during the first two weeks; afterwards, the animals were fed on Artemia metanauplii enriched with Isochrysis galbana. A dry feed (Gemma 0.4 and 0.8) from Skretting S.A. (Burgos, España) was supplied from the 3rd to the 18th month. The total length reached by sardines at one year of life was 162.02±9.49 mm, corresponding to a wet weight of 36.12±10.82 g. Total length of the last survivor individual at 18 months was 182.37 mm. An 18-month experiment of sardine culture is described for the first time, and the growth data reported can help to determine its potential as a candidate for marine aquaculture. Larvas de Sardina pilchardus fueron obtenidas en cautividad a partir de huevos fecundados capturados en el mar y cultivadas en un tanque de 10000 L. Isochrysis galbana, nauplios de Artemia franciscana y zooplancton vivo fueron utilizados como presa durante las dos primeras semanas; a partir de ahí, las sardinas fueron alimentadas con metanauplios de Artemia enriquecidos con la microalga Isochrysis galbana. Los piensos secos (Gemma 0.4 and 0.8) de la compañía Skretting S.A. (Burgos, España) fueron suministrados desde el tercer mes hasta el final de la experiencia (18 meses). La longitud media total alcanzada por las sardinas al año de vida fue de 162.02±9.49 mm, correspondiendo a un peso húmedo de 36.12±10.82 g. La longitud total a los 18 meses fue 182.37 mm. En este trabajo se describe por primera vez un experimento de larga duración (18 meses) de crecimiento de sardina cultivada y los datos aportados pueden contribuir a determinar su interés potencial como candidata para la acuicultura marina.

Después de casi veinte años investigando sobre el cultivo del atún rojo, se ha conseguido cerrar su ciclo en cautividad, aunque es necesario reducir la alta mortalidad larvaria para que su producción llegue a ser rentable. Dos posibles soluciones serían: mejorar el perfil nutricional de los rotíferos utilizados, enriqueciéndolos con minerales o vitaminas, o mejorar el cultivo de copépodos para abaratar los costes de su producción. En el experimento 1, se enriquecieron rotíferos con selenio o vitamina E a corto y largo plazo. Se estudió su efecto en el crecimiento poblacional y la cantidad que pueden llegar a retener. Se observó que ninguno de los enriquecedores utilizados influyeron en el crecimiento de los rotíferos y que la concentración de Se retenida tras 3 horas de enriquecimiento aumentaba de forma lineal con la cantidad administrada, obteniéndose valores entre 0,04 ± 0,048 y 25,57 ± 12,34 mg/kg PS. Por último, se vio que al añadir diariamente la misma cantidad de selenio (0,33 mg/106rot.) al medio de cultivo, la concentración de este elemento en los rotíferos se mantenía constante (0,85 ± 0,15 mg/kg PS). En el experimento 2, se alimentaron copépodos con distintas microalgas y una pasta comercial de Chlorella. A pesar de que se obtuvieron datos muy dispares, se podría decir que utilizando el alga Rhodomonas baltica se obtuvo un mayor número de huevos y una mayor supervivencia. After almost twenty years researching about the bluefin tuna cultivation, it has been possible to complete its life cycle in captivity, although it is necessary to reduce the high larval mortality to make its production profitable. Two possible solutions would be: improve the nutritional profile of the rotifers, enriching them with minerals or vitamins, or improve copepod culture to reduce the costs of their production. In the experiment 1, rotifers were enriched with selenium or vitamin E during a short and long term. It was studied its effect on population growth and the amount they can retain. It was observed that none of the enrichers used influenced rotifer´s growth, and that the concentration of Se retained after 3 hours of enrichment increased linearly with the amount administrated, obtaining values between 0,04 ± 0,048 and 25,57 ± 12,34 mg/kg DW. Finally, It also was observed that the concentration of Se in the rotifers was maintained constant (0,85 ± 0,15 mg/kg DW) when the same amount of this element (0,33 mg/106rot.) was added daily to the culture medium. In the experiment 2, copepods were fed with different microalgae and a commercial paste of Chlorella. Despite the disparity of the data obtained, it could be said that a higher number of eggs and a higher survival rate was obtained using the alga Rhodomonas baltica.

This is the first time that closing the life cycle of ABFT in captivity is reported. Egg size, larval size and hatching rate were similar to those observed in wild broodstock in last five years. This milestone will enable faster development of integrated aquaculture of this species, consolidating the leadership that the IEO and Murcia Region have in the domestication of bluefin tuna, at European and global scale.

These findings indicate that protein synthesis increase in proportion to the flexion stage which is strongly associated with the development of the digestive system and therefore the increase in the nutritional condition. Ontogenetic differences in the RNA and DNA content will be discussed in more detail. Also, the pattern obtained for Atlantic bluefin tuna larva will be compared with those of other species.

El objetivo de este estudio fue el cultivo y la reproducción de tellinas (Donax trunculus) en condiciones contraladas de laboratorio. Para ello se trabajó con dos sistemas de estabulación distintos donde se alimentó a los reproductores con una mezcla de tres especies fitoplanctónicas (Isochrysis galbana, Chaetoceros gracilis y Tetraselmis chuii)y se establecieron controles rutinarios diarios de calidad físico-química del agua. Tras una aclimatación de aproximadamente un mes, se indujo el desove en los organismos en numerosos intentos, intercalados con descansos semanales, a través de distintas técnicas: choque térmico, una de las más eficaces y exposición en seco, que no fue tan fructífera. Además se efectuó extracción forzada, donde se consiguieron los mejores resultados pero a costa de la vida de los individuos reproductores. Cuando se consiguió ambos gametos (masculinos y femeninos), y por tanto huevos fecundados, se realizó un cultivo larvario preliminar de 48h en oscuridad. Las altas densidades de huevos obtenidas en el desove se redujeron drásticamente durante el cultivo larvario, The aim of this study was the cultivation and reproduction of tellinas (Donax trunculus) in checked laboratory conditions. For this we worked with two different stabling systems where organisms were fed with a mixture of three phytoplankton species (Isochrysis galbana, Chaetoceros gracilis and Tetraselmis chuii) and were established a daily routine of physico-chemical quality controls of water. After an acclimation of about a month, spawning was induced in organisms in numerous attempts, interspersed with weekly breaks through different techniques: thermal shock, one of the most effective and dry exposure, which was not so fruitful. In addition it forced extraction, where the best results were achieved but at the cost of life of breeding individuals. When both gametes (male and female) was achieved, and therefore fertilized eggs, a preliminary larviculture of 48 hours in darkness was performed. High densities of eggs obtained from spawning dropped sharply during larval culture

Effects of different microalgal diets on the growth and on the survival of Anomalocardia brasiliana larvae between trochophore and pediveliger stages were evaluated. Diets were evaluated in two separate experiments. The first tested the microalgae Isochrisys galbana (Ig), Phaeodactylum tricornutum (Phaeo), Chaetoceros calcitrans (Cca) and the combinations (Ig+Cca), (Ig+Phaeo) and (Cca+Phaeo). The second tested the microalgae C. calcitrans (Cca), Pavlova lutheri (Pl) and the combination (Cca+Pl). When provided alone, I. galbana resulted in survival and growth rates lower than the rest of the diets, and the best results achieved were obtained with P. tricornutum and C. calcitrans supplied alone or combined with other microalgae. However, in the second experiment the diet Cca+Pl resulted in better growth and survival rates (261.67 ± 9.64 pm and 31.50 ± 0.87%) than all diets tested in both experiments, therefore it is recommended for A. brasiliana larvae. RESUMEN. Se evaluó el efecto de diferentes dietas de microalgas en el crecimiento y supervivencia de larvas de Anomalocardia brasiliana entre etapas trocófera y pedivelíger. Las dietas se evaluaron en dos experimentos separados. En el primero se probaron la microalgas Isochrisys galbana (Ig), Phaeodactylum tricornutum (Phaeo), Chaetoceros calcitrans (Cca) y las combinaciones (Ig+Cca), (Ig+Phaeo) y (Cca+Phaeo). En el segundo, se probaron las microalgas C. calcitrans (Cca), Pavlova lutheri (Pl) y la combinación (Cca+Pl). Cuando I. galbana se administró sola, dió menor supervivencia y crecimiento que el resto de las dietas, y los mejores resultados se obtuvieron con P. tricornutum y C. calcitrans suministradas solas o combinadas con otras microalgas. Sin embargo, en el segundo experimento la dieta Cca+Pl dio un mayor crecimiento y supervivencia (261,67 ± 9,64 pm y 31,50 ± 0,87%) que todas las dietas probadas en ambos experimentos y, por lo tanto, se recomienda para las larvas de A. brasiliana.

Los escómbridos comprenden una familia de peces pelágicos con un gran potencial para la acuicultura debido a su rápido crecimiento y alto valor comercial. Con la excepción del Atún rojo del pacífico (Thunnus orientalis), especie en la que se ha completado el ciclo vital, la acuicultura integral de las especies pertenecientes a la familia de los escómbridos o es inexistente o se basa en la captura de especímenes adultos. Esta tesis pretende establecer las bases de la reproducción y cultivo larvario de dos especies de escómbridos: el atún rojo del Mediterráneo y el bonito Atlántico. Los objetivos a alcanzar pueden resumirse en tres: a) Desarrollar una tecnología de cultivo que permita capturar adultos, establecer las condiciones adecuadas para su mantenimiento y maduración en cautividad, recolectar huevos fertilizados de buena calidad y finalmente llegar a cerrar su ciclo en cautividad. b) Describir el desarrollo embrionario del Bonito Atlántico y el Atún rojo del Atlántico y evaluar el efecto de la temperatura sobre el mismo. c) Determinar la composición lipídica de huevos y larvas y estudiar su composición lipídica (con especial referencia a PUFAs) a lo largo del desarrollo, ensayando diversos alimentos y cuantificando los resultados obtenidos La tecnología para capturar y mover a jaulas atunes rojos está bien desarrollada, así que se ha focalizado en capturar, manipular, mover a tanques y adaptar a la cautividad en condiciones controladas escómbridos pequeños como el AB. Se ha logrado la maduración y puesta de AB y ABFT durante cuatro años, exponiéndose los resultados de número de huevos obtenidos, extensión de la época de puesta y datos biométricos como diámetro del huevo, número de gotas de grasa y tasa de eclosión. Cuando ha sido posible se ha determinado la fecundidad relativa de las hembras, y se ha conseguido cerrar el ciclo del bonito en cautividad. En el caso del ABFT estamos próximos a lograrlo, ya que actualmente existen en Murcia adultos de más de 20 kg (clase de edad 3+) nacidos en el Instituto Español de Oceanografía y engordados primero en las instalaciones del grupo Ricardo Fuentes y posteriormente en las jaulas de Fortuna Mare. Se ha descrito el desarrollo embrionario de los huevos de AB y ABFT y se ha estudiado el efecto de la temperatura sobre los mismos, estableciendo las más propicias para el cultivo. Además se ha establecido la composición lipídica de los huevos fecundados y su evolución a lo largo del desarrollo embrionario y la etapa de alimentación endógena de las larvas. Con relación al cultivo larvario, se han comparado los resultados obtenidos en ABFT con dos presas diferentes en cuanto a crecimiento, supervivencia y composición lipídica, con especial referencia a los ácidos grasos poliinsaturados y dentro de estos ácido docosahexaenoico y a la relación docosahexaenoico/eicosapentaenoico, considerada esencial para el éxito del cultivo. Asimismo se ha estudiado el comienzo de la fase piscívora de ambas especies, determinando el momento más adecuado para su inicio. Por último se incluye un proyecto biológico realizado para la construcción de una instalación en tierra de ABFT. Este proyecto es pionero en Europa y alberga el mayor tanque de cultivo de atún. El mantenimiento de reproductores en tierra es fundamental para desarrollar una acuicultura integral de ABFT, ya que permitirá independizarse totalmente de las condiciones meteorológicas y alargar su época de reproducción mediante el control del foto y termoperiodo. Esta tesis pretende contribuir a desarrollar la acuicultura de estas especies, sentando algunas bases para la reproducción y cultivo larvario. Aún queda camino por recorrer, pero la acuicultura integral comercial del AB, y especialmente del ABFT, será una realidad en poco tiempo., Scombridae comprise a family of pelagic fish species with a great potential for aquaculture due to fast growth rates and high commercial values. In the last years, it has been complete the life cycle in captivity of Pacific bluefin tuna (Thunnus orientalis), but with this exception, integral Aquaculture of species belonging to Scombriae does not exist or is capture-based. This thesis pretends to determine the basis for reproduction and larval rearing of two species of scombrids: Atlantic bluefin tuna (ABFT), Thunnus thynnus, and Atlantic bonito (AB), Sarda sarda. Objectives can be summarized in three targets: a) To develop a culture technology that allow us to capture adult fishes, establish adequate conditions to maintenance and reproduce them in confinement, collect fine quality eggs and finally to complete their cycle in controlled conditions in captivity b) To describe embryonic development of AB and ABFT and to determine the effect of temperature on it. c) To determine lipid composition of eggs and larvii (with special reference to PUFAs) and to study their evolution throughout larvae development, feeding with different live preys diets and to quantify obtained results. Technology to capture and move to the cages bluefin tunas is well developed, so this thesis focused on capturing, handling,moving to tanks and adapting to confinement in controlled conditions smaller scombrids as AB. Maturation and spontaneous spawning of AB and ABFT have been achieved during four years, and number of fertilized collected eggs, spawning season extension and some biometrics as egg diameter, number of oil globules and hatching rate are reported. When possible, relative fecundity had also been determined. Finally it had possible to complete the life cycle of bonito in confinement in controlled conditions. With regards to ABFT, completion of life cycle is close to be achieved so that nowadays there are adults averaging more than 20 kg belonging to age class 3+, born in IEO facilities and fattened during two years in Ricardo Fuentes and then in Fortuna mare cages. Embryonic development of AB and ABFT has been described and the effect of temperature has been studied, determining more adequate temperatures to culture. Lipid composition of fertilized eggs and their evolution throughout embryonic development and endogenous feeding stage have also been determined. With regards to larval rearing obtained results with two different live preys diets used as food to ABFT were compared, not only in growth and survival rates but also in lipid composition with special reference to polyunsaturated fatty acids, mainly docosahexanoic acid and docosahexanoic/eicosapentanoic acids rate, which is considered to be crucial for success in larval rearing. Moreover onset of piscivorous stage has been studied in both species, and the better moment to begin yolk sac larvae feeding has been established. In addition, a biological project to build a land based facility to ABFT is included. This project is pioneer in Europe, and it includes greater existing tank to culture tunas in the world. Maintenance of broodstocks in land based facilities is basic to develop integral aquaculture of ABFT, so it will allow us to be fully independent of weather conditions and to extend spawning season by control of photo and thermoperiod. Research showed in this thesis pretend to contribute to develop aquaculture of these species, setting some basis to reproduction and larval rearing. In spite further research must be done, integral commercial aquaculture of AB and mainly ABFT will become a reality shortly.

Se ha analizado la incorporación de isótopos estables y ácidos grasos en larvas de atún rojo (Thunnus thynnus) alimentadas con rotíferos enriquecidos con Algamac® y Origreen®. Los factores de enriquecimiento larva-rotífero para el isótopo de nitrógeno (15N/14N, δ15N) y de carbono (13C/12C, δ13C) mostraron valores diferentes en función de la dieta suministrada. Asimismo, se encontraron diferencias en los perfiles de ácidos grasos de las larvas, debidas a la dieta, salvo para el 18:1n-9 y el DHA. No se encontraron diferencias significativas en el crecimiento., Incorporation of nitrogen/carbon stable isotopes and total lipid fatty acids was analysed in Atlantic Bluefin tuna (Thunnus thynnus) larvae fed with rotifers enriched with Algamac® and Origreen®, respectively. Larvae-rotifer enrichment factors for nitrogen (15N/14N, δ15N) and carbon (13C/12C, δ13C) showed significant different values according to diet composition. Moreover, significant differences were also observed in larvae total lipid fatty acid profiles with the exceptions of 18:1n-9 and DHA. No growth significant differences were found.

Es necesario desarrollar metodos de conservacion de huevos de copepodos para garantizar su disponibilidad para su uso en la acuicultura. En este estudio, huevos de Acartia tonsa han sido tratados con formaldehido, bronopol y peroxido de hidrogeno, y posteriormente conservados en agua a distinta salinidad. Tambien se ha comprobado la eficacia de la glicerina liquida como conservante al garantizar unas condiciones anaerobias. Durante el primer mes de conservacion el bronopol fue el mejor tratamiento siendo significativamente superior al grupo control. El empleo de peroxido de hidrogeno es ineficaz, ya que su empleo impide una tasa de eclosion superior al 5%. A partir del primer mes, el uso de la glicerina es significativamente mejor que el resto de tratamientos ya que garantiza una tasa de eclosion de aproximadamente el 25% durante al menos 120 dias. No se han encontrado diferencias significativas con el empleo de agua de distinta salinidad. Developing methods to preserve copepod eggs is necessary to ensure their availability for use in aquaculture. In this study, Acartia tonsa eggs have been treated with formaldehyde, bronopol and hydrogen peroxide, and then stored in water at different salinities. We have also tried the efficacy of liquid glycerin as a preservative because it ensures anaerobic conditions. During the first month of conservation, the use of bronopol was the best treatment, being significantly higher than the control group. The use of hydrogen peroxide is useless because its use prevents a hatching rate above 5%. From the first month, the use of glycerin was significantly better than other treatments and it ensures a hatching rate about 25% for at least 120 days. No significant differences were found with the use of water at different salinities.

Se ha estudiado la influencia de la alimentación con nauplios del copépodo Acartia tonsa (COP), con rotífero Brachionus plicatilis (ROT) enriquecido en ácidos grasos y una mezcla de ambos (MIX), sobre el crecimiento y la supervivencia de larvas de atún rojo, Thunnus thynnus. Los resultados muestran que la presencia de nauplios de Acartia en la dieta (COP y MIX) favorece tanto el crecimiento como la supervivencia de las larvas de atún rojo, en comparación con la dieta compuesta exclusivamente por rotífero enriquecido (ROT) The influence of the feeding with nauplii of the copepod Acartia tonsa (COP), the rotifer Brachionus plicatilis (ROT) enriched on fatty acids, and a mixture of both (MIX) on the growing and survival of the bluefin tuna larvae have been studied. The results show that the presence of the Acartia nauplii in the feeding (COP and MIX) improves significantly the growth and the survival in comparison with the feeding based exclusively on rotifers (ROT). Proyecto ATAME

Los escómbridos comprenden una familia de peces pelágicos con un gran potencial para la acuicultura debido a su rápido crecimiento y alto valor comercial. Con la excepción del Atún rojo del pacífico (Thunnus orientalis), especie en la que se ha completado el ciclo vital, la acuicultura integral de las especies pertenecientes a la familia de los escómbridos o es inexistente o se basa en la captura de especímenes adultos. Esta tesis pretende establecer las bases de la reproducción y cultivo larvario de dos especies de escómbridos: el atún rojo del Mediterráneo y el bonito Atlántico. Los objetivos a alcanzar pueden resumirse en tres: a) Desarrollar una tecnología de cultivo que permita capturar adultos, establecer las condiciones adecuadas para su mantenimiento y maduración en cautividad, recolectar huevos fertilizados de buena calidad y finalmente llegar a cerrar su ciclo en cautividad. b) Describir el desarrollo embrionario del Bonito Atlántico y el Atún rojo del Atlántico y evaluar el efecto de la temperatura sobre el mismo. c) Determinar la composición lipídica de huevos y larvas y estudiar su composición lipídica (con especial referencia a PUFAs) a lo largo del desarrollo, ensayando diversos alimentos y cuantificando los resultados obtenidos La tecnología para capturar y mover a jaulas atunes rojos está bien desarrollada, así que se ha focalizado en capturar, manipular, mover a tanques y adaptar a la cautividad en condiciones controladas escómbridos pequeños como el AB. Se ha logrado la maduración y puesta de AB y ABFT durante cuatro años, exponiéndose los resultados de número de huevos obtenidos, extensión de la época de puesta y datos biométricos como diámetro del huevo, número de gotas de grasa y tasa de eclosión. Cuando ha sido posible se ha determinado la fecundidad relativa de las hembras, y se ha conseguido cerrar el ciclo del bonito en cautividad. En el caso del ABFT estamos próximos a lograrlo, ya que actualmente existen en Murcia adultos de más de 20 kg (clase de edad 3+) nacidos en el Instituto Español de Oceanografía y engordados primero en las instalaciones del grupo Ricardo Fuentes y posteriormente en las jaulas de Fortuna Mare. Se ha descrito el desarrollo embrionario de los huevos de AB y ABFT y se ha estudiado el efecto de la temperatura sobre los mismos, estableciendo las más propicias para el cultivo. Además se ha establecido la composición lipídica de los huevos fecundados y su evolución a lo largo del desarrollo embrionario y la etapa de alimentación endógena de las larvas. Con relación al cultivo larvario, se han comparado los resultados obtenidos en ABFT con dos presas diferentes en cuanto a crecimiento, supervivencia y composición lipídica, con especial referencia a los ácidos grasos poliinsaturados y dentro de estos ácido docosahexaenoico y a la relación docosahexaenoico/eicosapentaenoico, considerada esencial para el éxito del cultivo. Asimismo se ha estudiado el comienzo de la fase piscívora de ambas especies, determinando el momento más adecuado para su inicio. Por último se incluye un proyecto biológico realizado para la construcción de una instalación en tierra de ABFT. Este proyecto es pionero en Europa y alberga el mayor tanque de cultivo de atún. El mantenimiento de reproductores en tierra es fundamental para desarrollar una acuicultura integral de ABFT, ya que permitirá independizarse totalmente de las condiciones meteorológicas y alargar su época de reproducción mediante el control del foto y termoperiodo. Esta tesis pretende contribuir a desarrollar la acuicultura de estas especies, sentando algunas bases para la reproducción y cultivo larvario. Aún queda camino por recorrer, pero la acuicultura integral comercial del AB, y especialmente del ABFT, será una realidad en poco tiempo., Scombridae comprise a family of pelagic fish species with a great potential for aquaculture due to fast growth rates and high commercial values. In the last years, it has been completed the life cycle in captivity of Pacific bluefin tuna (Thunnus orientalis), but with this exception, integral Aquaculture of species belonging to Scombriae does not exist or is capture-based. This thesis pretends to determine the basis for reproduction and larval rearing of two species of scombrids: Atlantic bluefin tuna (ABFT), Thunnus thynnus, and Atlantic bonito (AB), Sarda sarda. Objectives can be summarized in three targets: a) To develop a culture technology that allow us to capture adult fishes, establish adequate conditions to maintenance and reproduce them in confinement, collect fine quality eggs and finally to complete their cycle in controlled conditions in captivity b) To describe embryonic development of AB and ABFT and to determine the effect of temperature on it. c) To determine lipid composition of eggs and larvii (with special reference to PUFAs) and to study their evolution throughout larvae development, feeding with different live preys diets and to quantify obtained results. Technology to capture and move to the cages bluefin tunas is well developed, so this thesis focused on capturing, handling, moving to tanks and adapting to confinement in controlled conditions smaller scombrids as AB. Maturation and spontaneous spawning of AB and ABFT have been achieved during four years, and number of fertilized collected eggs, spawning season extension and some biometrics as egg diameter, number of oil globules and hatching rate are reported. When possible, relative fecundity had also been determined. Finally it had possible to complete the life cycle of bonito in confinement in controlled conditions. With regards to ABFT, completion of life cycle is close to be achieved so that nowadays there are adults averaging more than 20 kg belonging to age class 3+, born in IEO facilities and fattened during two years in Ricardo Fuentes and then in Fortuna mare cages. Embryonic development of AB and ABFT has been described and the effect of temperature has been studied, determining more adequate temperatures to culture. Lipid composition of fertilized eggs and their evolution throughout embryonic development and endogenous feeding stage have also been determined. With regards to larval rearing obtained results with two different live preys diets used as food to ABFT were compared, not only in growth and survival rates but also in lipid composition with special reference to polyunsaturated fatty acids, mainly docosahexanoic acid and docosahexanoic/eicosapentanoic acids rate, which is considered to be crucial for success in larval rearing. Moreover onset of piscivorous stage has been studied in both species, and the better moment to begin yolk sac larvae feeding has been established. In addition, a biological project to build a land based facility to ABFT is included. This project is pioneer in Europe, and it includes greater existing tank to culture tunas in the world. Maintenance of broodstock in land based facilities is basic to develop integral aquaculture of ABFT, so it will allow us to be fully independent of weather conditions and to extend spawning season by control of photo and thermoperiod.

Se facilita información sobre captura, traslado y adaptación a la cautividad de ejemplares vivos de bocarte (Engraulis encrasicolus) en el Cantábrico, así como composición corporal según diversas alimentaciones en comparación con ejemplares salvajes y en salazón. Así mismo se facilitan datos de reproducción y cría larvaria., Se presentan los resultados obtenidos sobre captura, adaptación a la cautividad, nutrición, reproducción, cría larvaria, patologías y supervivencia referentes al presente estudio sobre la viabilidad de cultivo del bocarte (Engraulis encrasicolus) del Cantábrico. El estudio se plantea con la finalidad de disponer de una técnica de cultivo utilizable en posibles periodos de nulas o bajas capturas así como la posibilidad de disponer de alevines como cebo vivo para la pesca de túnidos, evitando tanto el recorrer grandes distancias para su captura como la presión que éstas puedan ejercer sobre la población natural. Se utilizan diferentes dietas en la alimentación referidas a su composición proteínica y proporción de ácidos grasos presentando los resultados de los análisis de éstas como de la composición muscular de los ejemplares alimentados en cautividad en comparación con ejemplares salvajes coincidentes siempre en las mismas épocas del año. Se hace especial referencia a las proporciones y relaciones de ácidos con potencial aterogénico (laúrico, mirístico y palmítico) que resultan menores siempre con la alimentación empleada en cautividad. De los monoenoicos el oléico tiene mayor proporción en los ejemplares de cautividad igualmente en los n-3HUFA (EPA y DHA) en cualquier época del año siendo menor el araquidónico (ARA) savo en el contenido del bocarte de otoño-invierno. Se realizan comparaciones así mismo en las proporciones de n-3/n-6; y cantidades de ácidos saturados y monoenoicos, tanto con ejemplares salvajes como en salazón. La cantidda de grasa bruta es mayor en ejemplares alimentados en cautividad con cualquiera de las dietas, teniendo por tanto un mayor contenido calórico incluso que aquellos de salazón. En cuanto a la cantidad de proteína sólo es similar entre orígenes cuando el pienso contiene alrededor de un 50 % de la misma. El aminograma es similar entre orígenes. En los ejemplares en salazón el contenido en ácidos saturados es mayor y la relación n3/n6 resulta la mejor. Se presentan datos biométricos y de supervivencia donde no se encuentran diferencias entre dietas. Así como del factor de condición (K) y grasa intraperitoneal. Se describe la puesta, incubación y desarrollo larvario y su alimentaciónhasta día 15 de cultivo., Instituto Español de Oceanografía; Gobierno de Cantabria (España).

En el marco del proyecto SELFDOTT, el IEO han desarrollado técnicas para el cultivo larvario y la producción de juveniles de atún rojo (Thunnus thynnus). Uno de los mayores problemas encontrados es la alta mortalidad (>98%) de las larvas y los juveniles. Para evidenciar las causas potenciales de dicha mortalidad, se ha estudiado la aparición de malformaciones post-craneales durante la esqueletogénesis del desarrollo de larvas y juveniles de atún rojo entre 0 y 90 días después de la eclosión (DDE). Las malformaciones esqueléticas pudieran ser las responsables de parte de la mortalidad. En las primeras fases del desarrollo son frecuentes las malformaciones generales (lordosis, escoliosis, cifosis…) y puntuales (fusiones, compresiones…). Las malformaciones esqueléticas de la columna vertebral afectan al 70% de los peces: 32% con malformaciones puntuales en los centra, 36% con malformaciones en los arcos y 74% con malformaciones generales. Se han identificado dos periodos principales en los que aparecen las malformaciones: el primero, caracterizado por la aparición significativa de malformaciones puntuales en los arcos que se corresponden con el principio de la condrificación (alrededor de 11 DDE) y un segundo periodo caracterizado por la presencia sustancial de malformaciones generales al inicio de la osificación (alrededor de 23 DDE). In the framework of the SELFDOTT project, the IEO has developed a technique for the larval rearing and the juvenile production of the bluefin tuna (Thunnus thynnus). One of the major problems encountered is a high mortality (>98%) of larvae and juveniles. In order to address potential causes of mortality, we studied the appearance of postcranial skeletal malformations during skeletogenesis of farmed Bluefin Tuna from 0 to 90 days post-hatching (dph). The skeletal malformations could be responsible for part of the mortality. General (i.e., lordosis, scoliosis and kyphosis) and punctual (e.g., fusion, compression) postcranial malformations are frequent in early life stages. Skeletal malformations of the vertebral column affect 70% of fishes: 32% of specimens with punctual centra malformations, 36% specimens with punctual arches malformations, and 74% specimens with general malformations. Two major period of malformation appearance have been identified. The first period is characterized by the significant appearance of punctual arches malformations corresponding to the beginning of chondrification (ca. 11 dph). The second period is characterized by the substantial presence of general malformations at the beginning of ossification (ca. 23 dph). Ricardo Fuentes e Hijos, S.A.

Se ha estudiado el desarrollo ontogénico de las larvas de atún rojo, Thunnus thynnus, especialmente el momento de la flexión de la notocorda y su relación con la temperatura. El cultivo larvario se ha realizado en tanques replicados en un medio controlado. Los resultados contribuyen a mejorar el conocimiento existente sobre el desarrollo larvario del atún rojo en la naturaleza., Este trabajo se ha realizado en el marco del proyecto ATAME-IEO (Plan Nacional de I+D+i 2008-2011).

Una secuencia ontogénica de larvas y juveniles de atún rojo (Thunnus thynnus) cultivados mediante técnicas de acuicultura en 2012, fue transparentado y teñido para determinar la condrogénesis craneal normal. (y el inicio de la osificación) en individuos de entre 0 y 90 días después de la eclosión (DDE). Entre 0 y 20 DDE la longitud estándar aumenta lentamente mientras que la longitud de la cabeza aumenta de forma más rápida, entre 0 y 7 DDE. El inicio de la condrogénesis se produce tan pronto como a 1 DDE y todos los cartílagos craneales están presentes a 16 DDE. Asociadas a la temprana condrogénesis de seis de esos cartílagos, se han identificado diez tipos de malformaciones craneales. Tales malformaciones podrían potencialmente ser las responsables de más del 34% de la mortalidad antes de 24 DDE. An ontogenetic sequence of the Atlantic Bluefin tuna (Thunnus thynnus) larvae and juveniles reared in aquaculture conditions in 2012, was cleared and stained to determine normal cranial chondrification (and onset of ossification) for specimens ranging from 0 to 90 days post-hatching (dph). From 0 to 20 dph, standard length increases slowly while head length increases most rapidly between 0 and 7 dph. The onset of chondrification is initiated as early as 1 dph, and all cranial cartilages are present by 16 dph. Associated with the early chondrification of six of these cartilages, ten types of cranial malformations have been identified. These malformations potentially account for more than 34% of the mortality before 24 dph. NSERC Research grant (RC)

En el marco del proyecto SELFDOTT, el IEO han desarrollado técnicas para el cultivo larvario y la producción de juveniles de atún rojo (Thunnus thynnus). Uno de los mayores problemas encontrados es la alta mortalidad (>98%) de las larvas y los juveniles. Para evidenciar las causas potenciales de dicha mortalidad, se ha estudiado la aparición de malformaciones post-craneales durante la esqueletogénesis del desarrollo de larvas y juveniles de atún rojo entre 0 y 90 días después de la eclosión (DDE). Las malformaciones esqueléticas pudieran ser las responsables de parte de la mortalidad. En las primeras fases del desarrollo son frecuentes las malformaciones generales (lordosis, escoliosis, cifosis…) y puntuales (fusiones, compresiones…). Las malformaciones esqueléticas de la columna vertebral afectan al 70% de los peces: 32% con malformaciones puntuales en los centra, 36% con malformaciones en los arcos y 74% con malformaciones generales. Se han identificado dos periodos principales en los que aparecen las malformaciones: el primero, caracterizado por la aparición significativa de malformaciones puntuales en los arcos que se corresponden con el principio de la condrificación (alrededor de 11 DDE) y un segundo periodo caracterizado por la presencia sustancial de malformaciones generales al inicio de la osificación (alrededor de 23 DDE)., In the framework of the SELFDOTT project, the IEO has developed a technique for the larval rearing and the juvenile production of the bluefin tuna (Thunnus thynnus). One of the major problems encountered is a high mortality (>98%) of larvae and juveniles. In order to address potential causes of mortality, we studied the appearance of postcranial skeletal malformations during skeletogenesis of farmed Bluefin Tuna from 0 to 90 days post-hatching (dph). The skeletal malformations could be responsible for part of the mortality. General (i.e., lordosis, scoliosis and kyphosis) and punctual (e.g., fusion, compression) postcranial malformations are frequent in early life stages. Skeletal malformations of the vertebral column affect 70% of fishes: 32% of specimens with punctual centra malformations, 36% specimens with punctual arches malformations, and 74% specimens with general malformations. Two major period of malformation appearance have been identified. The first period is characterized by the significant appearance of punctual arches malformations corresponding to the beginning of chondrification (ca. 11 dph). The second period is characterized by the substantial presence of general malformations at the beginning of ossification (ca. 23 dph)., Ricardo Fuentes e Hijos, S.A.

El atún rojo Thunnus thynnus (L., 1758) y el bonito atlántico, Sarda sarda (Bloch, 1793) son dos teleósteos pertenecientes a la familia Scombridae. Se trata de dos especies con pesquerías importantes que se capturan desde la antigüedad. Mientras que el bonito se encuentra en fase de investigación y no existen empresas que lo cultiven en la actualidad, el caso del atún rojo es diferente. A partir de los años 90 se inicia en el Mediterráneo el llamado engrase, que consiste en capturar ejemplares vivos mediante arte de cerco en las zonas de puesta, trasladarlos a granjas cercanas a la costa, alimentarlos durante varios meses con pequeños peces pelágicos ricos en materia grasa, y una vez sacrificados de forma rápida para evitar la formación de lactato, enviarlos al mercado, especialmente al japonés. Pero la sobreexplotación de las poblaciones naturales ocasionó que el Consejo Internacional para la Conservación del Atún Atlántico (ICCAT) estableciera en 1999 un sistema de cuotas para limitar ... Versión del editor

Este trabajo de tesis se realizó sobre larvas de lenguado senegalés (Solea senegalensis) con tres objetivos principales. El primero fue valorar la viabilidad de introducir los nauplios de Artemia como única fuente de alimento durante el periodo larvario. El segundo conocer los requerimientos nutricionales respecto a los ácidos grasos considerados esenciales para especies marinas (20:4n-6, 22:6n-3 y 20:5n-3) y evaluar la posible introducción de un aceite vegetal, proveniente de las semillas de Echium platagineum, en la alimentación de estas larvas. El último objetivo fue estudiar el desarrollo, tanto morfológico como histológico de la larva hasta su transformación en juvenil. Para alcanzar el primer objetivo se comparó la pauta alimentaria utilizada habitualmente en el cultivo larvario del lenguado, basada en el uso de rotíferos y nauplios de Artemia, con el uso de nauplios de Artemia como única fuente de alimento. Para el segundo objetivo se llevaron a cabo diversos estudios dosis-respuesta que permitieron establecer las relaciones entre los contenidos en la dieta de 20:4n-6,22:6n-3,20:5n-3 y 20:4n-6/20:5n-3 y el efecto de los mism os sobre las larvas, tanto a nivel de crecimiento com o tasa de metamorfosis, supervivencia, pigmentación y concentración de estos ácidos grasos en distintos tejidos. En el último trabajo realizado dentro de este bloque también se evaluó el efecto del aceite Echium sobre las larvas y se estudió el efecto de la congelación sobre la composición en ácidos grasos de los nauplios de Artemia. Para el último objetivo las larvas fueron individualizadas y clasificadas, según sus características morfológicas, en distintos estadios de desarrollo, que sirvieron como base para establecer las pautas de desarrollo de los distintos órganos y tejidos mediante técnicas histológicas, tanto en parafina como en m etacrilato. De esta tesis se puede concluir, por un lado que las larvas de lenguado senegalés son capaces de alimentarse de nauplios de Artemia desde el momento de la apertura de la boca. Por otro, que contenidos elevados de 20:4n-6 en la dieta provocan retrasos en la metamorfosis e inducen mala pigmentación en las larvas. Respecto al 22:6n-3, las larvas de esta especie tienen un nulo o muy bajo requerimiento nutricional por este ácido graso. El 20:5n-3 no afecta al crecimiento de las larvas, pero si la cantidad ingerida no es suficiente provocará anomalías pigmentarias. Del último capítulo se puede concluir que el rápido desarrollo de los órganos de los sentidos provoca la temprana iniciación de la alimentación exógena y esta a su vez, un adelanto de la metamorfosis y un inicio de la vida bentónica muy precoz en el desarrollo., The Senegal sole (Solea senegalensis) is a flatfish found along the Mediterranean and South Atlantic coast, and is a prime candidate for aquaculture in Spain and Portugal. The rearing methods for Senegal sole have been well documented but little is known about the larval nutritional requirem ents and histological development. This study was designed with three main objectives.The first was to evaluate the use of Artemia nauplii as the only food source during the larval period. The second was designed to investigate the role ofthe dietary essential fatty acids (20:4n6, 22:6n-3, and 20:5n-3) on larval development, and to study the use of a new vegetable oil, extracted from the seeds of Echium plantagineum, for live preyenrichment and its effects on flatfish pigmentation. The last objective was to study the main morphological and histological events that take place during the larval development. To achieve the first objective, the technique usually em ployed in larval culture with rotifers and Artemia as live prey was compared w ith the use of Artemia naupliias the only food source. To reach the second objective dose-response designs was carried out to try to identify the correlations between 20:4n-6, 22:6n-3, 20:5n-3 and 20:4n-6/20:5n-3 dietary content w ith the growth, survival, pigmentation and tissue com position of Senegal sole larvae. In addition, the Echium oil effect on larvae was also evaluated. For the last objective, larvae were individually classified and the developmental stage was determined on the basis of the main external morphological features, which serve as the basis for the ontogenical events description. The results of the first work showed that Senegal sole larvae were able to capture Artemia nauplii after mouth opening. For the second objective we can conclude that increasing dietary 20:4n-6 slow ed the metamorphic events and generated abnormally pigmented larvae. W ith regard to 22:6n-3, the results indicate a low or negligible requirement for this fatty acid. Larval growth was not affected by dietary 20:5n-3 amount, but abnormal pigmentation can be produced by a deficient ingest. For the last work it's possible to conclude that the early larval stages are characterized by a rapid development of senses and organs in charge of feeding or use ofendogenous reserves in orderto accelerate at maximum the larval grow th and initiates as soon as possible metamorphosis.

En este trabajo se muestran los datos preliminares obtenidos a lo largo de los años 2001 y 2002 en el IEO de Vigo, referidos a la reproducción, cultivo larvario y engorde de juveniles de centolla (Maja squinado, Herbst 1788). Se obtuvieron de 3 a 5 puestas de cada hembra estabulada. El cultivo larvario se realizó en dos sistemas: intensivo y semiextensivo; la supervivencia larvaria en el primero osciló entre 8 y 13% al mes de vida. A partir de los 50 días de edad, los juveniles procedentes del cultivo semiextensivo presentaron un crecimiento elevado, alcanzando a los 9,5 meses una longitud de caparazón de 65,48±7,53 mm y una supervivencia del 66%. Sin embargo, los del cultivo intensivo alcanzan solamente 32,13±7,86 mm y una mortalidad del 100% a la misma edad. En el año 2002 se consiguieron supervivencias del 30% en el cultivo intensivo. Preliminary data on reproduction, larviculture and growth of spider crab (Maja squinado, Herbst 1788) from juveniles are given. Data were obtained from culture trials realized during 2001 and 2002 at the Spanish Institute of Oceanography in Vigo. Each female spawned 3 to 5 times. Larvae culture was made in intensive and semiextensive systems; in first case larvae survival rate ranged between 8% and 13% in their first month of life. Growth rate of 50 days old juveniles from semiextensive system was high, reaching a carapace length of 65,48 ± 7,53 mm, and a survival of 66% at 9,5 months. In contrast, those from the intensive system reached 32,13±7,86 mm and mortality was 100% at the same age. Survival rate of 30% were attained with larvae intensive system in the year 2002.

En este trabajo se muestran los datos preliminares obtenidos en el Centro Oceanográfico de Vigo, del Instituto Español de Oceanografía (IEO), referidos a la reproducción, cultivo larvario y engorde de juveniles de centolla Maja squinado Herbst, 1788 a lo largo de los años 2000 y 2001. Se obtuvieron de 3 a 5 puestas de cada hembra estabulada. El cultivo larvario se realizó en dos sistemas: intensivo y semiextensivo; la supervivencia larvaria en el primero osciló entre 8 y 13% al mes de vida. A partir de los 50 días de edad, los juveniles procedentes del cultivo semiextensivo presentaron un crecimiento elevado alcanzando, a los 9,5 meses, una longitud de caparazón de 65,48 ± 7,53 mm y una supervivencia del 66 %. Sin embargo, los del cultivo intensivo alcanzaron solamente 32,13 ± 7,86 mm y una mortalidad del 100 % a la misma edad., Preliminary data on reproduction, larval culture and growth of juveniles of spider crab Maja squinado , Herbst 1788 are given. Data were obtained from culture trials carried out during 2000 and 2001 at the Instituto Español de Oceanografía (IEO) in Vigo (northwest Spain). Each female spawned 3 to 5 times. Larval culture was carried out using intensive and semi-extensive systems; in the case of the former, the lar- vae survival rate ranged from 8-13 % during the first month of life. As to the semi-extensive system, the growth rate of 50-day-old juveniles was high, reaching a carapace length of 65.48 ± 7.53 mm, with a sur- vival rate of 66 % at 9.5 months. However, at the same age, those from the intensive system had reached on- ly 32.13 ± 7.86 mm, with a mortality of 100 %.

El rendimiento económico de la producción en acuicultura depende en gran parte del suministro de grandes cantidades de huevos de buena calidad que permitan conseguir altas tasas de supervivencia y crecimiento en el cultivo larvario. Para conseguir este objetivo es necesario disponer de un stock de reproductores suficiente en número de individuos y mantenido en las condiciones óptimas de alimentación y de control de los factores ambientales. La nutrición de los reproductores se está revelando, gracias a los estudios realizados en salmónidos, carpa, y dorada japonesa, como un factor muy importante que afecta al desarrollo gonadal y a la fecundidad. Aunque falta información precisa sobre los requerimientos nutritivos para la maduración gonadal de los reproductores, se ha comprobado, en general, que la cantidad, calidad y régimen alimentarios influyen en la cantidad y calidad de las puestas. Los estudios realizados en este campo relacionan los niveles de nutrientes en la alimentación de los reproductores con las tasas de fecundidad y fertilidad del huevo, porcentajes de eclosión, tasas de supervivencia y crecimiento de larvas, y tasas de incorporación al huevo de sustancias principalmente liposolubles. Se ha estudiado el efecto del tipo de fuente proteica y las interferencias de las proteínas con otros componentes de la dieta como minerales, micronutrientes, ácidos grasos, vitaminas y carotinoides. En los últimos años la máxima atención se ha centrado en las sustancias liposolubles; los resultados indican que los requerimientos en estas sustancias son sensiblemente diferentes en los reproductores y en las distintas etapas del cultivo. En esta línea de investigación que pretende mejorar los rendimientos de las puestas y el cultivo larvario en dorada, se llevaron a cabo en la Planta de Cultivos de Mazarrón en 1992, 1993 y 1994 tres experimentos de alimentación de reproductores centrados en la influencia de los lípidos, y especialmente los ácidos grasos, en la reproducción.