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A citogenética humana conta com um conjunto de técnicas que permitem identificar os cromossomos e detectar anomalias como alterações numéricas, translocações, deleções, entre outras. A detecção dessas alterações pode levar ao diagnóstico de diversas doenças genéticas, descobrindo a causa de malformações congênitas, retardo mental, infertilidade, entre outros. Apesar de ser um exame essencial para o diagnóstico de diversas doenças, não há, na região de Maringá, qualquer estabelecimento que realize o procedimento via SUS. Dessa forma, este trabalho padronizou a técnica para obtenção de cariótipo para oferecimento gratuito através de um projeto de extensão. A técnica contou com um cultivo em meio RPMI 1640 enriquecido com soro bovino fetal e fitohemaglutinina. A obtenção de cromossomos metafásicos foi facilitada pela aplicação de colchicina, e os cromossomos foram corados por bandeamento G. O protocolo padronizado apresentou bons resultados, com alto número de células, várias delas em metáfase, e cromossomos bem corados, facilitando a análise microscópica.

Hematological and hematopoietic cells malignancies of the genes and hematopoietic cells are associated with the genetic mutation, often at the chromosomal level. The standard cytogenetic study is widely accepted as one of the main diagnostics and prognostic determinants in patients. Therefore, the current descriptive and cross-sectional study sought to determine the cytogenetic analysis of frequent hematological malignancies in Pakistan. A total of 202 peripheral bone marrow or blood samples from patients with benign and malignant hematological malignancy were taken using a conventional G-banding technique. Among enrolled patients, the mean age was 21.5 years ± 23.4, and gender-wise distribution showed a marked predominance of the male 147 (73%) population compared to the female 55 (27%). Patients in the age group (2-10 years) had the highest frequency, 48 (24%), of hematological neoplasms, followed by age (11-20 years) with 40 (20%). Normal karyotypes (46, XX/46, XY) was found in 51% (n=103) patients. Furthermore, the frequency of complex karyotype was 30 (15%), while normal was seen in 171 (85%) patients. Pre-B Acute Lymphoblastic Leukemia (Pre-B ALL) was the most prevalent malignancy of 66 (33%), followed by Chronic Myelogenous Leukemia (CML) of 41 (20%) and Acute Lymphocytic Leukemia of 29 (14%). Translocation was the most prevalent 50 (25%), followed by hypotriploidy 14 (7%) and monosomy 8 (4%) on chromosome aberration analysis. In addition, t(9:22) translocation was found to be 20 (10%) in CML, with the majority in the age group (31-40 years). This study recommends that karyotyping should be tested frequently in hematological conditions because it may provide insight into the relative chromosomal changes associated with particular malignancies. Resumo As neoplasias hematológicas e de células hematopoiéticas dos genes e as células hematopoiéticas estão associadas à mutação genética, geralmente em nível cromossômico. O estudo citogenético padrão é amplamente aceito como um dos principais determinantes diagnósticos e prognósticos em pacientes. Portanto, o presente estudo descritivo e transversal buscou determinar a análise citogenética de neoplasias hematológicas frequentes no Paquistão. Um total de 202 amostras de medula óssea periférica ou sangue de pacientes com malignidade hematológica benigna e maligna foi coletado usando uma técnica convencional de banda G. Entre os pacientes inscritos, a média de idade foi de 21,5 anos ± 23,4, e a distribuição por gênero mostrou uma marcada predominância da população masculina de 147 (73%) em comparação com a feminina de 55 (27%). Pacientes na faixa etária (2-10 anos) tiveram a maior frequência, 48 (24%), de neoplasias hematológicas, seguida da idade (11-20 anos) com 40 (20%). Cariótipos normais (46, XX / 46, XY) foram encontrados em 51% (n = 103) dos pacientes. Além disso, a frequência de cariótipo complexo foi de 30 (15%), enquanto normal foi observada em 171 (85%) pacientes. Leucemia linfoblástica aguda pré-B (LLA Pré-B) foi a doença maligna mais prevalente de 66 (33%), seguida por leucemia mieloide crônica (LMC) de 41 (20%) e leucemia linfocítica aguda de 29 (14%). A translocação foi o 50 mais prevalente (25%), seguido por hipotriploidia 14 (7%) e monossomia 8 (4%) na análise de aberração cromossômica. Além disso, a translocação t (9:22) encontrada foi de 20 (10%) na LMC, com a maioria na faixa etária (31-40 anos). Este estudo recomenda que o cariótipo deve ser testado com frequência em condições hematológicas porque pode fornecer informações sobre as alterações cromossômicas relativas associadas a doenças malignas específicas.

A principal fonte de estudo da citogenética é o cromossomo, cujo é uma estrutura celular composta por material genético e proteínas. Os cromossomos podem ser divididos em holocêntricos que são cromossomos que não apresentam centrômeros localizados ao longo da sua estrutura, diferentemente dos cromossomos monocêntricos, os quais possuem o centrômero localizado, o qual é o tipo de cromossomo mais comum nas espécies em geral. O presente estudo buscou em revisar bibliograficamente estudos acerca dos cromossomos holocêntricos afim de acompanhar a evolução das pesquisas dessa temática. A revisão de literatura foi feita a partir dados bibliográficos em sites de busca como o Google Acadêmico, Scielo, PubMed e Lilacs. Foram achados ao todo 5.024 artigos científicos, onde apenas dez deles foram dispostos numa tabela de acordo com os critérios da metodologia. Ainda que existam bastante estudos acerca dos cromossomos holocêntricos, mais pesquisas são necessárias para esclarecer algumas dúvidas evolutivas, de especiação das espécies e de comparações taxonômicas entre as espécies do mesmo gênero. The main source of study of cytogenetics is the chromosome, which is a cellular structure composed of genetic material and proteins. Chromosomes can be divided into holocentric chromosomes, which are chromosomes that do not have centromeres located along their structure, unlike monocentric chromosomes, which have a localized centromere, which is the most common type of chromosome in species in general. The present study sought to bibliographically review studies about holocentric chromosomes in order to follow the evolution of research on this topic. The literature review was carried out from bibliographic data on search engines such as Google Scholar, Scielo, PubMed and Lilacs. A total of 5,024 scientific articles were found, of which only ten were arranged in a table according to the criteria of the methodology. Although there are a lot of studies about holocentric chromosomes, more research is needed to clarify some evolutionary doubts, speciation of species and taxonomic comparisons between species of the same genus. La principal fuente de estudio de la citogenética es el cromosoma, que es una estructura celular compuesta por material genético y proteínas. Los cromosomas se pueden dividir en cromosomas holocéntricos, que son cromosomas que no tienen centrómeros ubicados a lo largo de su estructura, a diferencia de los cromosomas monocéntricos, que tienen un centrómero localizado, que es el tipo de cromosoma más común en las especies en general. El presente estudio buscó revisar bibliográficamente estudios sobre cromosomas holocéntricos con el fin de seguir la evolución de las investigaciones sobre este tema. La revisión bibliográfica se realizó a partir de datos bibliográficos en buscadores como Google Scholar, Scielo, PubMed y Lilacs. Se encontraron un total de 5.024 artículos científicos, de los cuales solo diez se ordenaron en una tabla según los criterios de la metodología. Aunque hay muchos estudios sobre cromosomas holocéntricos, se necesita más investigación para aclarar algunas dudas evolutivas, especiación de especies y comparaciones taxonómicas entre especies del mismo género.

Classical Genetics and Molecular Biology are disciplines of great importance within the curriculum of Higher Education courses linked to Biological Sciences. Because it contains many abstract terms and mechanisms, most students report some difficulty in effectively understanding the topics covered. In this way, many authors highlight the importance of using didactic models to facilitate the learning of complex themes, making classes more attractive, in addition to promoting the inclusion of students with special needs, such as those with visual impairments and deficits in Warning. The didactic model created uses simple and low-cost materials (such as styrofoam balls, biscuit dough, cords and ropes), which allows the teacher to work on the topic of Compaction levels of eukaryotic genetic material, in addition to the approach of the theme of Epigenetics (chromatin remodeling mechanisms), which is much discussed nowadays. We believe that the use of the proposed didactic model can positively impact students learning, enabling a better contextualization and visualization of the aforementioned topics, applied in the disciplines of Classical Genetics and Molecular Biology, in Higher Education. La Genética Clásica y la Biología Molecular son asignaturas de gran importancia dentro del plan de estudios de las carreras de Educación Superior relacionadas con las Ciencias Biológicas. Debido a que contienen muchos términos y mecanismos abstractos, la mayoría de los estudiantes afirman tener cierta dificultad para comprender efectivamente los temas tratados. De esta manera, muchos autores destacan la importancia del uso de modelos didácticos con el fin de facilitar el aprendizaje de temas complejos, haciendo las clases más atractivas, además de promover la inclusión de alumnos con necesidades especiales como deficiencias visuales y déficit de atención. El modelo didáctico creado, utiliza materiales sencillos y de bajo coste (como bolas de poliestireno, masa de galletas, cuerdas y cordeles), lo que permite al profesor trabajar el tema de los Niveles de compactación del material genético eucariota, además del abordaje del tema de la Epigenética (mecanismos de remodelación de la cromatina), siendo éste, muy discutido en la actualidad. Creemos que el uso del modelo didáctico propuesto puede impactar positivamente en el aprendizaje de los estudiantes, permitiendo una mejor contextualización y visualización de los temas antes mencionados, aplicados en las disciplinas de Genética Clásica y Biología Molecular en la Educación Superior. A Genética Clássica e a Biologia Molecular, são disciplinas de grande importância dentro do currículo de cursos de Ensino Superior ligados a Ciências Biológicas. Por conter muitos termos e mecanismos abstratos, grande parte dos discentes relatam certa dificuldade para a efetiva compreensão dos tópicos abordados. Dessa maneira, muitos autores destacam a importância do uso de modelos didáticos com a finalidade de facilitar a aprendizagem de temas complexos, tornando as aulas mais atrativas, além de promover a inclusão de alunos com necessidades especiais como portadores de deficiências visuais e déficit de atenção. O modelo didático criado, utiliza-se de materiais simples e de baixo custo (como bolas de isopor, massa de biscuit, cordões e cordas), que permite ao docente trabalhar o tópico dos Niveis de compactação do material genético eucariótico, além da abordagem do tema de Epigenética (mecanismos de remodelamento da cromatina), sendo este, muito discutido nos dias atuais. Acreditamos que, o uso do modelo didático proposto poderá impactar positivamente a aprendizagem dos discentes, possibilitando uma melhor contextualização e visualização dos tópicos supra-citados, aplicado nas disciplinas de Genética Clássica e Biologia Molecular, no Ensino Superior.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Cattleya is one of the genera of tropical orchids with great importance for the flower market due to the size and color of its flowers. However, problems such as its long vegetative and juvenile period, as well as the short shelf life of its flowers, make it difficult for its commercial insertion, when compared to other orchid genera of greater commercial importance. The artificial induction of polyploids can result in the incorporation of agronomic and ornamental characteristics of interest in Cattleya hybrids, such as Brassolaeliocattleya. Colchicine is the most commonly used alkaloid to generate polyploidy in plants due to its antimitotic properties, but at the same time it produces phytotoxic effects on plant material, requiring specific studies for different plant genotypes. Thus, the present work aimed to develop an efficient protocol for the production of polyploid plants from the progeny of Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle "LC" having as factors the types of explants, concentrations and exposure times to colchicine. In addition, we also studied the effects of colchicine exposure on different types of explants in Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle "LC" progeny. Colchicine produced several effects on the in vitro development of seeds, protocorms and seedlings of the progeny of Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC”, where the different responses of explants to the alkaloid depended on concentrations, exposure times and interactions between both factors. Seeds, protocorms and seedlings of the progeny of Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC” resulted in a polyploidization efficiency of 3.21%; 13.46% and 22.08%, respectively, analyzed by flow cytometry. Regarding the frequencies of polyploidy in seeds, the treatments 6 h/0.08%, 18 h/0.04% and 18 h/0.06% had polyploidy frequencies of 13%, 25% and 25% respectively. For the protocorms, treatments 6 h/0.04% and 18 h/0.08% resulted in the highest frequencies of polyploids of 46% and 44%, respectively. For seedlings, treatments 6 h/0.04%, 12 h/0.04%, 24 h/0.02% and 24 h/0.08% generated frequencies equal to or greater than 50%. Chromosomal analysis estimates showed that Blc. Haw Yuan Beauty and Blc. Goldenzelle “LC” and the progeny of Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle "LC" had 70 chromosomes, while the progeny of Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC” polyploidized had 140 chromosomes. According to the results, colchicine had effects on the in vitro development and growth of seeds, protocorms and seedlings of the progeny of Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC” and allowed the production of polyploidized plants. Cattleya é um dos gêneros de orquídeas tropicais com grande importância para o mercado de flores pelo tamanho e cores de suas flores. No entanto, problemas como seu longo período vegetativo e juvenil, assim como também o reduzido tempo de prateleira de suas flores dificultam sua inserção comercial, quando comparado a outros gêneros de orquídeas de maior importância comercial. A indução artificial de poliploides pode resultar na incorporação de características agronômicas e ornamentais de interesse em híbridos de Cattleya, à exemplo de Brassolaeliocattleya. A colchicina é o alcaloide mais comumente utilizado para gerar poliploidias em plantas devido a suas propriedades antimitóticas, mas ao mesmo tempo produz efeitos fitotóxicos no material vegetal, requerendo estudos específicos para diferentes genótipos de plantas. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo eficiente para a produção de plantas poliploides da progênie de Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC” tendo como fatores os tipos de explantes, as concentrações e os tempos de exposição à colchicina. Além disso, também estudamos os efeitos da exposição à colchicina nos diferentes tipos de explantes na progênie de Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC”. A colchicina produziu diversos efeitos no desenvolvimento in vitro de sementes, protocormos e plântulas da progênie de Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC”, onde as diferentes respostas dos explantes frente ao alcaloide dependeram das concentrações, tempos de exposição e das interações entre ambos os fatores. Sementes, protocormos e plântulas da progênie de Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC” resultaram em eficiência de poliploidização de 3,21%; 13,46% e 22,08%, respectivamente, analisado por citometria de fluxo. Em relação as frequências de poliploidia em sementes os tratamentos 6 h/0,08%, 18h/0,04% e 18 h/0,06% tiveram frequências de poliploidias de 13%, 25% e 25% respectivamente. Para os protocormos os tratamentos 6 h/0,04% e 18 h/0,08% resultaram nas maiores frequências de poliploides de 46% e 44%, respectivamente. Além disso, foram obtidos poliploides em protocormos sem tratamento com colchicina, com frequências de 8% à 20%. Para as plântulas os tratamentos 6 h/ 0,04%, 12 h/ 0,04%, 24 h/0,02% e 24 h/0,08% geraram frequências iguais ou superiores a 50%. As estimativas de análise cromossômica mostraram que as cultivares Blc. Haw Yuan Beauty e Blc. Goldenzelle “LC” e a progênie de Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle "LC" tinham 70 cromossomos, enquanto a progênie de Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC” poliploidizada tinha 140 cromossomos. De acordo com os resultados a colchicina teve efeitos sobre o desenvolvimento e crescimento in vitro das sementes, protocormos e plântulas da progênie de Blc. Haw Yuan Beauty x Blc. Goldenzelle “LC” e permitiu a produção de plantas poliploidizadas. Código de Financiamento 001

Submitted by Pauline Ruth de Lima (pauline.lima@unesp.br) on 2022-06-06T19:55:11Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final.pdf: 866994 bytes, checksum: cbea614d39cb58e77c5a6780d69837fb (MD5) Rejected by Laudicélia Martins Arantes (lm.arantes@unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 1 - Segundo a CAPES (Portaria nº 206, de 4 de setembro de 2018), o agradecimento deve conter exatamente a seguinte redação: O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001. 2 - As palavras-chave da sua ficha catalográfica devem ser adicionadas com a inicial maiúscula, com exceção de palavra composta, onde somente a primeira letra da primeira palavra deve ser grafada em cx alta. 3 - Na submissão, Colocar o nome do programa de pós-graduação que vc cursou Qualquer dúvida, entre em contato com Laudicélia 016 3209 7474. Agradecemos a compreensão. on 2022-06-07T12:44:06Z (GMT) Submitted by Pauline Ruth de Lima (pauline.lima@unesp.br) on 2022-06-07T19:24:55Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final.docx: 581727 bytes, checksum: 986efa42de47d93ebaf4145700b08ba5 (MD5) Rejected by Laudicélia Martins Arantes (lm.arantes@unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 1 - As palavras-chave da sua ficha catalográfica devem ser adicionadas com a inicial maiúscula, com exceção de palavra composta, onde somente a primeira letra da primeira palavra deve ser grafada em cx alta. 2 - O arquivo inserido está em docx. Você deve fazer novo arquivo "em PDF" e enviar. Qualquer dúvida, entre em contato com Laudicélia 016 3209 7474. Agradecemos a compreensão. on 2022-06-07T19:51:07Z (GMT) Submitted by Pauline Ruth de Lima (pauline.lima@unesp.br) on 2022-07-04T12:34:16Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final.pdf: 976153 bytes, checksum: f659b1d144354b97c532f55d4635cb0f (MD5) Approved for entry into archive by Laudicélia Martins Arantes (lm.arantes@unesp.br) on 2022-07-04T13:29:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lima_pr_me_jabo.pdf: 976153 bytes, checksum: f659b1d144354b97c532f55d4635cb0f (MD5) Made available in DSpace on 2022-07-04T13:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lima_pr_me_jabo.pdf: 976153 bytes, checksum: f659b1d144354b97c532f55d4635cb0f (MD5) Previous issue date: 2022-03-09 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Carcinógenos ambientais, como os pesticidas aos quais cães e humanos estão expostos, podem levar a danos cromossômicos predispondo a tumores, tais como o linfoma. Neste contexto, o biomonitoramento como forma de prevenção e o diagnóstico precoce são essenciais para o sucesso na abordagem do paciente. O teste do micronúcleo obtido por meio da coleta de células da mucosa oral, é um teste de baixo custo capaz de detectar aberrações cromossômicas. Este teste é de uso rotineiro na medicina humana, se mostrando confiável, seguro e de facil execução. Com esse estudo, objetivamos avaliar as possíveis alterações citogenéticas em cães portadores de linfoma, comparativamente a outros sem neoplasias, utilizando o teste de micronúcleo. Para tanto, foram instrumentos da pesquisa cães atendidos pelo Setor de Oncologia do Hospital Veterinário “Governador Laudo Natel",no período de janeiro de 2020 a janeiro de 2021. Os animais foram alocados em dois grupos: Grupo linfoma (GL; n = 14), composto por animais que receberam o diagnóstico do tumor, e no Grupo controle (GC, n = 8), estes livres de neoplasia detectável e de outros problemas de saúde. Todos os animais foram submetidos à coleta de células da mucosa por meio de “cytobrush”. Foram observadas as seguintes alterações celulares: micronúcleo, células com botão nuclear, cariólise, cariorrexe, células binucleadas, picnose, cromatina frouxa e cromatina condensada. Para comparação das médias, foi utilizado o “One sample t test”, fixando-se os valores médios de GC para comparação com GL. Os animais do GL apresentaram maior número de micronúcleos, células com botão nuclear e células binucleadas (p < 0,1), demonstrando que o teste do micronúcleo foi capaz de detectar alterações citogenéticas em cães e sua aplicatibilidade na Medicina Veterinária, o que possibilita novos estudos na área Environmental carcinogens such as pesticides to which dogs and humans are exposed can lead to chromosomal damage predisposing to tumors such as lymphoma. In this context, biomonitoring as a form of prevention and early diagnosis are essential for a successful approach to the patient. The micronucleus test obtained by collecting cells from the oral mucosa is a low-cost test capable of detecting chromosomal aberrations. This test is routinely used in human medicine, proving to be reliable, safe and easy to perform. With this study, we aimed to evaluate the possible cytogenetic alterations in dogs with lymphoma and others without neoplasms, using the micronucleus test. Therefore, the research instruments were dogs treated by the Oncology Sector of the Veterinary Hospital "Governador Laudo Natel", from January 2020 to January 2021. The animals were allocated into two groups: Lymphoma group (GL; n = 14), composed of animals that received the diagnosis of the tumor, and in the control group (CG, n = 8), these were free of detectable neoplasia and other health problems. All animals were submitted to the collection of mucosal cells through “cytobrush”. The following cellular changes were observed: micronucleus, cells with nuclear button, karyolysis, karyorrhexis, binucleated cells, pyknosis, loose chromatin and condensed chromatin. To compare the means, the “One sample t test” was used, fixing the mean values of GC for comparison with GL. The GL animals had a greater number of micronuclei, ce squids with nuclear button and binucleated cells (p < 0.1), demonstrating that the micronucleus test was able to detect cytogenetic alterations in dogs and its applicability in Veterinary Medicine, which allows new studies in the area .

Orientador: Hernandes Faustino de Carvalho Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A construção de ferramentas de ensino-aprendizagem, auxiliam no processo de compreensão dos conceitos estudados, estimulando a reflexão e a participação na aula. Essa pesquisa apresenta duas ferramentas de ensino-aprendizagem. A primeira é denominada de Cromossomos-permuta e tem como objetivo passar por um processo de melhorias e avaliação de qualidade, explorando o assunto meiose com uma estratégia que requer a presencialidade do aluno, e o manuseio físico de peças impressas em impressora 3D, com uma metodologia voltada a integração e discussão dos fatos em sala de aula, permitindo ao aluno momentos de discussão e resolução de problemas envolvendo o conteúdo estudado. Permite ainda que o aluno simule fases da meiose e a duplicação do DNA, com essas particularidades pode ser uma ferramenta útil ainda para outros conteúdos de genética, e não se restringindo apenas ao ensino superior, sendo adaptável ao ensino médio, com a alteração da complexidade das questões de aplicação. A segunda ferramenta explora a construção do Game Meiose, que traz uma versão digital da ferramenta Cromossomos-permuta, explorando a grande afinidade da geração atual com a tecnologia digital. Utilizando recursos que possibilitaram um produto com aspectos de jogabilidade, feedbacks instantâneos e desafios associados as fases do jogo, bem como coleta de dados dos acertos, erros, tempo de jogo e satisfação, foi possível desenvolver e oferecer aos alunos um produto inovador que está alinhado com o atual momento vivido pela sociedade, que busca desenvolver estratégias de ensino remoto. As estratégias de ensino-aprendizagem desenvolvidas com essa pesquisa, possibilitou a geração de quatro indicadores de performance, que permitiu comprovar a eficácia da estratégia, e retroalimentar o produto a partir da performance dos alunos Abstract: The construction of teaching-learning tools helps in the process of understanding the concepts studied, stimulating reflection and participation in class. This research presents two teaching-learning tools. The first is called Chromosomes-exchange and aims to go through a process of quality improvement and evaluation, exploring the subject of meiosis with a strategy that requires the student's presence, and the physical handling of 3D printed parts, with a methodology aimed at the integration and discussion of facts in the classroom, allowing the student moments of discussion and problem solving involving the content studied. It also allows the student to simulate phases of meiosis and DNA duplication, with these particularities it can be a useful tool for other genetics content, and not restricted to higher education, being adaptable to high school, with the change in complexity. of application issues. The second tool explores the construction of Game Meiosis, which brings a digital version of the Chromosomes-exchange tool, exploring the great affinity of the current generation with digital technology. Using resources that enabled a product with gameplay aspects, instant feedbacks and challenges associated with the phases of the game, as well as data collection of successes, errors, game time and satisfaction, it was possible to develop and offer students an innovative product that is aligned with the current moment experienced by society, which seeks to develop remote teaching strategies. The teaching-learning strategies developed with this research made it possible to generate four performance indicators, which allowed to prove the effectiveness of the strategy, and to feed back the product from the performance of the students Doutorado Biologia Celular Doutora em Biologia Celular e Estrutural

We compared the anatomy, density, chemical contents, and bioenergy values of Eucalyptus grandis and hybrids of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla wood originating from diploids, triploids and tetraploids. We hypothesize that Eucalyptus grandis and hybrids of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla with different degrees of ploidy have variations as a result of different sets of chromosomes producing different phenotypic expressions and chemical constituents, such as variation in cell size and frequency, which would directly influence wood quality. Twenty-year-old trees were cut, eight for each ploidy: diploids and tetraploids are E. grandis; triploids are E. grandis x E. urophylla. We use standardized techniques. Our hypothesis was confirmed. Triploid and tetraploid trees presented wider trunks, taller trees with longer stems and wider crowns compared to diploid trees. Wood density showed significant radial variation only in diploids, while triploid and tetraploid trees were more homogeneous. In polyploid trees, the anatomical features did not clearly present a radial pattern. Triploid and tetraploid trees presented higher density wood than diploid trees. The chemical constituents varied from pith to bark in the three ploidies, but no differences between ploidies were found. For energy generation purposes, diploid and triploid trees are more desirable than tetraploid trees. Comparamos la anatomía, densidad, contenido químico y valores de bioenergía de Eucalyptus grandis e híbridos de madera de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla provenientes de diploides, triploides y tetraploides. Planteamos la hipótesis de que Eucalyptus grandis e híbridos de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla con diferentes grados de ploidía tienen variaciones como resultado de diferentes conjuntos de cromosomas que producen diferentes expresiones fenotípicas y constituyentes químicos, como la variación en el tamaño y la frecuencia de las células, lo que influiría directamente en la calidad de la madera. Se cortaron árboles de veinte años, ocho por cada ploidía: diploides y tetraploides son E. grandis; los triploides son E. grandis x E. urophylla. Usamos técnicas estandarizadas. Nuestra hipótesis fue confirmada. Los árboles triploides y tetraploides presentaron troncos más anchos, árboles más altas con tallos más largas y copas más anchas en comparación con los árboles diploides. La densidad de la madera mostró una variación radial significativo solo en diploides, mientras que los árboles triploides y tetraploides fueron más homogéneos. En árboles poliploides, las características anatómicas no presentaban claramente un patrón radial. Los árboles triploides y tetraploides presentaron madera de mayor densidad que los árboles diploides. Los componentes químicos variaron de la médula a la corteza en las tres ploidías, pero no se encontraron diferencias entre las ploidías. Para la generación de energía, los árboles diploides y triploides son más deseables que los tetraploides. Comparamos a anatomia, densidade, conteúdo químico e valores de bioenergia de Eucalyptus grandis e híbridos de madeira de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla originários de diplóides, triploides e tetraploides. Nossa hipótese é que Eucalyptus grandis e híbridos de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla com diferentes graus de ploidia têm variações como resultado de diferentes conjuntos de cromossomos produzindo diferentes expressões fenotípicas e constituintes químicos, como variação no tamanho e frequência das células, o que influenciaria diretamente a madeira qualidade. Foram cortadas árvores com 20 anos, oito para cada ploidia: diplóides e tetraplóides são E. grandis; triplóides são E. grandis x E. urophylla. Usamos técnicas padronizadas. Nossa hipótese foi confirmada. Árvores triplóides e tetraplóides apresentaram troncos mais largos, árvores mais altas com troncos mais longos e copas mais largas em comparação com árvores diplóides. A densidade da madeira apresentou variação radial significativa apenas nos diplóides, enquanto árvores triplóides e tetraplóides foram mais homogêneas. Nas árvores poliplóides, as características anatômicas não apresentaram claramente um padrão radial. Árvores triplóides e tetraplóides apresentaram maior densidade de madeira do que a das árvores diplóides. Os constituintes químicos variaram da medula a casca nas três ploidias, mas não foram encontradas diferenças entre as ploidias. Para fins de bioenergia, árvores diplóides e triplóides são mais adequadas do que árvores tetraplóides.

Orientador: Christine Hackel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A região de Passo Fundo no Planalto Médio do Rio Grande do Sul caracteriza-se pela produção de grãos (trigo, soja) e também hortigranjeiros. No combate as pragas destas culturas, os agricultores fazem uso de grandes quantidades de agroquímicos (fungicidas, inseticidas e herbicidas). Para testar a possível atividade genotóxica destes produtos, utilizou-se a técnica de micronúcleos, que consiste na identificação de pequenos núcleos visíveis em células binucleadas, resultantes da perda de parte ou de cromossomos inteiros pela célula, durante a divisão celular. Para a análise dos micronúcleos, foram coletados 2 mL de sangue periférico heparinizado de trinta trabalhadores expostos, relacionados diretamente com a aplicação e manuseio destes produtos e trinta indivíduos não expostos. Dados relativos ao hábito de fumar, consumo de bebida alcoólica, sexo, idade e tempo de exposição foram também identificados. Culturas de linfócitos de sangue periférico foram tratadas com citocalasina B por um período de 24 horas antes de completar o tempo total de cultura. Após a contagem de 1000 células binucleadas a freqüência de micronúcleos de ambos os grupos foi avaliada e aplicado o teste de "t" Student, indicando diferença altamente significativa entre expostos (14,4/1000) e não expostos (7,211000). Outros fatores relacionados com a instabilidade cromossômica como tabagismo, sexo, idade e tempo de exposição, não influenciaram de modo significativo em ambos os grupos. Finalmente, podemos concluir que o teste do micronúcleo mostrou-se eficiente como ensaio biológico para monitorar populações expostas a misturas de agroquímicos Abstract: Much of grain cultivation (wheat and soybean) in the Rio Grande do Sul state is carried out in the region of Passo Fundo. For crop pest control, great amounts of agrochemicals (fungicides, insecticides, herbicides ) are used. To evaluate the genotoxicity of these products, the micronucleus test was applied in the study of rural workers directly exposed to these chemicals. The micronuclei are small nuclei resulting from the loss of whole chromosomes or a centric fragments during cell division that can be identified in binucleated cells. Heparinized blood samples were drawn by venepuncture from 30 exposed workers and 30 non-exposed controls. To perform micronuclei analysis on Lymphocyte cultures , Cytochalasin B was added to block cytokines is after 44h incubation at 3-,0 C, resulting in t!1e formation of multinucleated cells. Data about smoking and drinking habits, sex, age and exposure duration were also identified. Micronuclei frequency was evaluated by counting 1000 binucleated cells in both groups. Statistical analysis showed significantly higher mean number levels of binucleated cells with micronuclei in exposed individuals (14,4/1000) than in controls (7,2/1000). Other factors related to chromosome instability, such as smoking habits, age and exposure duration, showed no effect on the frequency of micronuclei in both groups. Finally, we can conclude that the micronuclei test is an efficient biological assay for monitoring population exposure to mixtures of agrochemicals Mestrado Biologia Celular Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Christine Hackel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Mestrado

Orientador : Shirlei Maria Recco-Pimentel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Mestrado

Orientador: Shirlei Maria Recco-Pimentel Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: No presente estudo caracterizamos e comparamos citogeneticamente populações de sete espécies de Dendropsophus (Hylinae) proximamente relacionadas e que apresentam morfologia externa semelhante: D. nanus (Botucatu, SP; Bodoquena, MS; Telêmaco Borba, PR; Bacabal, MA), D. walfordi (entre Rio Madeira e Pacaás, RO), D. sanborni (Torres, RS), D. jimi (Uberlândia, MG), D. rubicundulus (Uberlândia, MG), D. elianeae (Botucatu, SP; Nova Itapirema, SP; Bodoquena, MS) e D. minutus (Vitória Brasil, SP; Bodoquena, MG). As metáfases foram obtidas a partir de suspensões de células do epitélio intestinal e de testículo. As lâminas foram coradas com solução de Giemsa 10% ou submetidas às técnicas de banda C e de impregnação por prata (Ag-NOR) e hibridação in situ fluorescente. Os dados citogenéticos revelaram a presença de 2n=30 cromossomos em todas espécies, exceto em alguns indivíduos de D. nanus, que apresentaram até três cromossomos B pequenos, todos telocêntricos e univalentes na meiose. Todas as espécies apresentaram pequena quantidade de heterocromatina, localizada somente na região centromérica. No entanto, alguns indivíduos de D. nanus de Telêmaco Borba (PR) e de D. rubicundulus de Uberlândia (MG) apresentaram um pequeno bloco de heterocromatina intersticial no par 3 e no par 12, respectivamente, caracterizando uma variação intrapopulacional. A região organizadora do nucléolo (NOR) foi detectada em um único par cromossômico nas diferentes espécies. Um indivíduo de D. sanborni apresentou um heteromorfismo no par 12 devido a uma duplicação da NOR em um dos homólogos. As populações de D. nanus provenientes de Telêmaco Borba (PR), Bacabal (MA) e Serra da Bodoquena (MS) e a de D. walfordi coletada entre os rios Madeira e Pacaás (RO) apresentaram cariótipos idênticos, com 2n=30 e NF=52. Um espécime de D. nanus da Serra da Bodoquena, apresentou NF=51 devido a um heteromorfismo no par 6, em que um dos homólogos é metacêntrico e o outro telocêntrico, provavelmente devido a uma inversão do tipo pericêntrica. Em todos os espécimes, a NOR foi localizada no par metacêntrico 13. Dendropsophus sanborni proveniente de Botucatu (SP) e Torres (RS) e D. jimi de Uberlândia (MG) também apresentaram cariótipos idênticos, com 2n=30 e NF=50, diferindo das outras duas espécies pela presença de cinco telocêntricos em vez de quatro, com a NOR localizada no par telocêntrico 12. Não foram observadas diferenças citogenéticas entre as populações de D. nanus e entre as de D. sanborni, e nem destas com as outras populações já descritas na literatura. Os cromossomos B presentes em duas populações de D. nanus não apresentaram heterocromatina e nem genes ribossomais. Dendropsophus elianeae apresentou três pares de telocêntricos e a NOR no par 11, enquanto D. rubicundulus apresentou apenas dois telocêntricos e a NOR no par 5. As duas populações de D. minutus apresentaram o mesmo cariótipo já descrito para outras populações, com ausência de cromossomo do tipo telocêntrico. A NOR nessa espécie foi detectada no par 9. Os dados citogenéticos do presente trabalho não permitiram distinguir D. nanus de D. walfordi, nem D. sanborni de D. jimi, sugerindo que são espécies muito intimamente relacionadas. Dendropsophus elianeae e D. rubicundulus foram até pouco tempo consideradas como uma única espécie e D. rubicundulus foi por muito tempo erroneamente denominada de D. elongata. Essas espécies foram facilmente diferenciadas pelo número de telocêntricos e pela localização da NOR. Diferem também de D. elongata, descrita na literatura, que possui apenas um par de telocêntricos. Nenhuma diferença siginificativa foi detectada entre os cariótipos das três populações de D. elianeae. Portanto, os dados citogenéticos corroboraram o status taxonômico atual de D. elianeae e D. rubicundulus. Rearranjos do tipo inversão e translocação devem ter ocorrido durante a diferenciação das espécies de Dendropsophus, levando a modificação na morfologia dos cromossomos e à migração da NOR no genoma, sem alterar o número de cromossomos Abstract: In the present study we characterized and compared cytogenetically populations of seven closely related Dendropsophus (Hylinae), a group of 30 chromosomes species, that show similar external morphology: D. nanus (Botucatu, SP; Bodoquena, MS; Telêmaco Borba, PR; Bacabal, MA), D. walfordi (between Rio Madeira and Pacaás, RO), D. sanborni (Torres, RS), D. jimi (Uberlândia, MG), D. rubicundulus (Uberlândia, MG), D. elianeae (Botucatu, SP; Nova Itapirema, SP; Bodoquena, MS) e D. minutus (Vitória Brasil, SP; Bodoquena, MG). The metaphases were obtained from intestinal epithelium and testis cell suspensions. The slides were stained with 10% Giemsa solution or submitted to the C-band (King, 1980), silver staining (Ag-NOR) and in situ fluorescence hybridization techniques. All species had 2n=30 chromosomes, except some individuals of D. nanus, which showed up to three little B-chromosomes, all telocentrics. These chromosomes were univalent in meiosis. All the species presented a little amount of heterochromatin, located only in the centromeric region. However, some individuals of D. nanus from Telêmaco Borba (PR) and of D. rubicundulus from Uberlândia (MG) had a little block of interstitial heterochromatin in the pair 3 (D. nanus) and in the pair 12 (D. rubicundulus), characterizing an intra-populational variation. The nucleolar organizing region (NOR) was detected in only one chromosomal pair in all species. An individual of D. sanborni had one heteromorphism due to a duplication of the NOR in one of the homologues of the pair 12. Dendropsophus nanus from Telêmaco Borba (PR), Bacabal (MA) and Serra da Bodoquena (MS) and of D. walfordi collected between the Madeira and Pacaás rivers (RO) showed identical karyotypes, with 2n=30 and NF=52. A specimen of D. nanus from Serra da Bodoquena presented NF=51 due to an heteromorphism in the pair 6, in which one of the homologues is metacentric and the other is telocentric, probably because of a pericentric inversion. In all the specimens, the NOR was located in the metacentric pair 13. Dendropsophus sanborni from Botucatu (SP) and Torres (RS), and D. jimi from Uberlândia (MG) also had identical karyotypes, with 2n=30 e NF=50, differing from the other two species by the presence of five telocentrics instead of four, with the NOR located in the telocentric pair 12. We did not observe citogenetic differences between the populations of D. nanus and of D. sanborni, neither differences among these populations and others already described in the literature. The B-chromosomes found in two populations of D. nanus did not showed heterochromatin neither ribosomal genes. Dendropsophus elianeae had three pairs of telocentric and the NOR in the pair 11. In contrast, D. rubicundulus presented only two telocentrics and the NOR in the pair 5. The two populations of D. minutus had the same karyotype already described for other populations, with absence of telocentric chromosome. The NOR was detected in the pair 9. The cytogenetic data presented here did not permit to distinguish D. nanus from D. walfordi, neither D. sanborni from D. jimi, suggesting that these species are very closely related. Dendropsophus elianeae and D. rubicundulus were until recently considered as a unique species, and for a long time D. rubicundulus was erroneously denominated as D. elongata. These species were easily distinguished from each other by the number of telocentrics and location of the NOR. They also differ from the D. elongata, described in the literature, which has only one pair of telocentric. No significant difference was detected among the karyotypes of the three populations of D. elianeae. Hence, the cytogenetic data confirm the current taxonomic status of D. elianeae and of D. rubicundulus. Rearrangements, such as inversion and translocation, should have occurred during the differentiation of these species, driving the changes in the chromosome morphology and the migration of the NOR in the genome, without modifying the chromosomal number Doutorado Biologia Celular Doutora em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Shirlei Maria Recco-Pimentel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Mestrado

Orientador : Eliana Regina Forni-Martins Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A família Alismataceae, ordem Alismatales, é composta por plantas aquáticas ou semi aquáticas de folhas eretas ou flutuantes, que crescem em brejos ou solos encharcados. Dois dos 11 gêneros que compõem a família estão presentes nos neotrópicos. O gênero Echinodorus (26 espécies) possui cerca de 17 espécies no Brasil, sendo que nove ocorrem no estado de São Paulo. O gênero Sagittaria (25 espécies) possui cerca de seis espécies presentes no Brasil, com apenas três no estado de São Paulo. As plantas aquáticas apresentam uma série de problemas para a sistemática, pois muitas características morfológicas apresentam uma extensa plasticidade fenotípica, sendo muitas destas convergentes ou baseadas em aspectos não genéticos/hereditários. Com o objetivo de traçar tendências evolutivas/cariotípicas para o grupo e incorporar dados moleculares/citogenéticos para a família Alismataceae, foram investigadas nove espécies da família (incluindo uma ou mais populações de cada), através das técnicas convencional com Giemsa, bandamento C, bandamento CMA/DAPI e hibridação fluorescente in situ para a seqüência 45S do DNAr. As espécies apresentaram cariótipos com 2n=22 cromossomos, os quais variaram em comprimento (2,3 a 9, 1 _m) mostrando-se altamente assimétricos (TF% entre 12,9 e 20,5).Os números cromossômicos reforçam x=11 como o provável número básico para o grupo. Foram documentadas duas populações triplóides (2n=33) para a espécie Echinodorus tennellus, ambas apresentando anormalidades meióticas e alta inviabilidade de pólen, indicando a existência de citótipos para a espécie. Os procedimentos de bandamento cromossômico foram bastante eficientes para a caracterização de cada uma das espécies, indicando possível proximidade entre elas. Do mesmo modo, a hibridação in situ foi eficaz para demonstrar diferenças inter-populacionais nos sítios de hibridação em Sagittaria rhombifolia Abstract: Alismataceae, order Alismatales, is composed of aquatic and semi-aquatic herbs, with emerged, submerged or floating leaves, growing in muddy and water-Iogged substrates. The family has 11 genera, two of which occur on the neotropical region. In Brazil, there are 17 species of Echinodorus (26 species) with nine in São Paulo state. In Sagittaria (25 species), there are six species in Brazil with only three in São Paulo state. Aquatic plants usually represent great problems for traditional systematics because a lot of morphological features exhibit extensive phenotypic plasticity and many characters are convergent or non-genetically based. In order to detect trends in the karyotypic evolution of this group as a whole, and incorporate molecular/cytogenetic data for the study of Alismataceae family, nine species (including one or more populations) of Alismataceae were investigated cytologically, with Giemsa staining, C-banding, CMA/DAPI banding and in situ hibridization with 45S rDNA sequence. Ali species presented 2n=22 chromosomes, showing a basic number x=11 for both genera, with chromosome size varying from 2.3 to 9.11lm and a high asymmetry index (TF% between 12.9 to 20.5). Two triploid (2n=33) populations of Echinodorus tennellus were observed, both presenting meiotic abnormalities and significative polen inviability. Banding procedures were efficient for species identification and detection of species similarity, oghether with in situ hibridization. In only one species, Sagittaria rhombifolia, inter-populational differences in the number and position of hibridization sites were found Mestrado Biologia Vegetal Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Shirlei Maria Recco-Pimentel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Foram analisados citogeneticamente sessenta e um espécimes de Physalaemus petersi e sete de Edalorhina perezi (Leptodactylidae, Anura), provenientes do Estado do Acre, Brasil, com o intuito de contribuir para as investigações sobre possíveis relações filogenéticas entre esses dois gêneros neotropicais. As preparações cromossômicas foram obtidas de suspensões de células intestinais e de testículo e foram coradas convencionalmente com Giemsa ou submetidas aos métodos Ag-NOR e de bandamento C. A análise morfométrica dos cromossomos de vinte e nove metáfases mitóticas, obtidas dos sete espécimes de Edalorhina perezi coletados (duas fêmeas e cinco machos), mostrou que todos esses indivíduos apresentam 2n=22. Os onze pares cromossômicos são homomórficos, sendo seis metacêntricos (pares 1, 5, 6, 9, 10 e 11), quatro submetacêntricos (pares 2, 4, 7 e 8) e um subacrocêntrico (par 3). Foi detectado apenas um par de NOR por genoma diplóide, localizado no braço longo dos cromossomos do par 8, nas preparações cromossômicas de seis indivíduos, tratadas pelo método Ag-NOR. A técnica de bandamento C, aplicada ao material referente a dois desses indivíduos, evidenciou que essa NOR é circundada por blocos de heterocromatina constitutiva, também presentes no centrômero de todos os cromossomos. Bandas heterocromáticas menos nítidas foram detectadas no braço curto dos cromossomos do par 1 e no braço longo dos cromossomos do par 2. A análise da meiose de dois machos detectou cadeias de bivalentes interligados em espermatócitos I, aparentemente formadas por três grandes pares cromossômicos, sugerindo a presença de translocações heterozigotas múltiplas. Embora todos os espécimes de Physalaemus petersi estudados apresentem 2n=22, dois cariótipos distintos foram encontrados dentre eles, o que sugere uma reavaliação desse táxon. O cariótipo mais comum é formado por quatro pares cromossômicos metacêntricos (1, 5, 6 e 10), quatro submetacêntricos (2, 4, 7 e 9), dois subacrocêntricos (3 e 8) e um par de cromossomos sexuais XXIXY, como mostrou a análise morfométrica de vinte e seis metáfases de dez indivíduos. Dentre o grupo de indivíduos portadores desse cariótipo foi observada grande variabilidade interindividual no padrão de distribuição de NOR e de segmentos heterocromáticos. A análise de bivalentes de espermatócitos na primeira divisão da meiose mostrou que pares cromossômicos heterozigotos para segmentos heterocromáticos nãocentroméricos não apresentam quiasma nessas regiões cromossômicas. O outro cariótipo foi observado em apenas 3 machos da Reserva Extrativista do Alto Juruá, cujo canto também difere daquele apresentado pelos demais exemplares de Physalaemus petersi. Esse cariótipo é composto por seis pares cromossômicos metacêntricos (2, 3, 4, 7, 8 e 10), dois submetacêntricos (5 e 9), dois subacrocêntricos (1 e 6) e um par heteromórfico, formado por um cromossomo submetacêntrico e um metacêntrico. A relação desse par heteromórfico com a determinação do sexo não pode ser elucidado, visto que nenhuma fêmea com esse cariótipo foi analisada. O método Ag-NOR permitiu observar dois padrões de distribuição de NOR, que envolvem dois pares cromossômicos (8 e 9). O bandamento C realizado no material obtido de um desses espécimes evidenciou a presença de heterocromatina constitutiva em todos os centrômeros desse cariótipo e nos telômeros dos cromossomos dos pares 4 e 8 e em um dos telômeros de um cromossomo 9. Configurações meióticas multivalentes foram observadas em exemplares de P. petersi dos dois grupos cariotípicos encontrados, sugerindo a participação de translocações na evolução desses cariótipos. Esse tipo de rearranjo pode estar envolvido, inclusive, na formação dos diferentes padrões de distribuição de NORs e bandas heterocromáticas Abstract: Sixty one specimens of Physalaemus petersi and seven of Edalorhina perezi (Leptodactylidae, Anura) from Acre State, Brazil, were studied, to contribute to phylogenetic relationship studies between these two neotropical genera. Chromosome preparations were obtained from cellular suspensions of testis and intestinal epithelium. These cytological preparations were conventionally stained by Giemsa or submitted to Ag-NOR and C-banding techniques. Morphometric analyses of twenty nine mitotic metaphases chromosomes from the specimens of E. perezi (two females and five males), showed that ali these individuais present 2n=22. The eleven chromosome pairs of this karyotype are homomorphic, being six metacentric (pairs 1, 5, 6, 9, 10 and 11), four submetacentric (pairs 2, 4, 7 and 8) and one subacrocentric (pair 3). Only one pair of NOR per diploid genome of chromosome preparations obtained from six specimens was detected and this was located interstitially in the long arm of pair 8. The C-banding techniques, applied to cells from two of these specimens, showed that this NOR is surrounded by constitutive heterochromatin blocks, also present at the centromere of ali the chromosomes. Gray heterochromatic bands were detected in the short arm of chromosome pair 1 and in the long arm of pair 2. Analyses of meiotic chromosomes of two males detected multivalent chains in spermatocytes I, apparently formed by three long chromosome pairs, indicating the ocurrence of heterozygous translocations in this karyotype. Ali the specimens of P. petersi studied present 2n=22, but two distinct karyotypes were detected among them. These findings suggest a re-evaluation of the taxon P. petersi. The most commom karyotype presents four metacentric (1, 5, 6 and 10), four submetacentric (2, 4, 7 and 9), two subacrocentric chromosome pair (3 and 8) and one pair of sex chromosomes xx/XY. Among the groups of specimens with this kind of karyotype, a big interindividual variability of NOR and heterochromatic band patterns was observed. The analysis of spermatocytes I bivalents showed that chromosome pairs which are heterozygous to non-centromeric heterochromatic bands do not present chiasma at these chromosome regions. The other karyotype was observed in only three males, whose call also differs from that of most commom specimens of P. petersi. This karyotype is formed by six metacentric (2, 3, 4, 7, 8 and 10), two submetacentric (5 and 9), two subacrocentric (1 and 6) and one heteromorphic chromosome pairo The relation of this pair with sex determination could not be elucidated, because no female with this karyotype was found. The Ag-NOR method showed two patterns of NOR distribution, which involve two chromosome pairs (8 and 9). The Cbanding technique applied to material obtained from one of these specimens showed the presence of constitutive heterochromatin at ali the centromeres of this karyotype, in the telomeres of the chromosomes of the pairs 4 and 8 and at one of the telomeres of one pair 9 chromosomes. Multivalent configurations were observed in meiotic prophase I of both karyological groups of P. petersi, suggesting the involvement of translocations in the evolution of these karyotypes. This kind of rearrangement can be involved in the origin of different NOR patterns and heterochromatic band distribution Mestrado Biologia Celular Mestre em Ciências Biológicas

Orientadores: Ricardo Barini, Walter Pinto Junior Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A literatura mostra uma associação entre diversos marcadores ultrasonográficos e riscos de cromossomopatias. Dentre os marcadores ultrasonográficos, a medida da translucência nucal tem sido apontada como um método de rastreamento de aneuploidias, sendo a trissomia do cromossomo 21 a mais investigada. Realizou-se, em dois serviços privados de medicina tetal, Centrus - Centro de Ultra-sonografia e Medicina Fetal de Campinas e Gennus - Núcleo de Medicina Fetal de Belo Horizonte, um trabalho retrospectivo do tipo validação de teste diagnóstico, em 230 mulheres, entre 10 e 14 semanas de gestação, medindo-se a translucência nucal e utilizando o cariótipo fetal como padrão-ouro. Os resultados foram submetidos à análise univariada, teste de tendência e análise de regressão logística, no intuito de estudar as variáveis: translucência nucal, idade materna e idade gestacional (medida pelo comprimento cabeça-nádega), como possíveis preditoras de cromossomopatias. Construiu-se uma curva receíver operator characterístíc, para a definição do melhor ponto de corte da medida da translucência nucal. Conclui-se que a idade gestacional e a idade materna não foram preditoras de risco para aneuploidias. A medida da translucência nucal apresentou uma acurácia semelhante à descrita na literatura. O ponto de corte fixo, com melhor equilíbrio entre sensibilidade e especificidade, foi a translucência nucal maior ou igual a 2,5mm. Abstract: The literature shows an association among several ultrasound markers and chromosome abnormalities¿ risk. Among these markers, the nuchal translucency is postulated as a screening method for aneuploidies and trisomy 21 is the most investigated. A validation diagnostic test was performed retrospectively in 230 women from two private services, among 10 and 14 weeks of pregnancy measuring the nuchal translucency and using fetal karyotype as a gold standard. The results were evaluated by a univariate analysis, tendency test and logistic regression analysis to study the variables: nuchal translucency, maternal age and gestational age (evaluated by the crown rump length) as predictors of chromosome abnormalities. A receive operator characteristic curve was used to define the best cut-off point of the nuchal translucency. The maternal age and the gestational age did not predict the risk of chromosome abnormalities. The nuchal translucency showed accuracy similar to the literature descriptions. The cut-off point with the best balance between sensitivity and specificity, was 2,5mm or greater. Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Natural products with biological activity, such as essential oils, can be used in the search for and development of ecological herbicides as an alternative to reduce the damage caused by synthetic herbicides. This work to aimed to determine the chemical composition and phytotoxic properties of the essential oils, at concentrations of 3000, 1500, 750, 375 and 187.5 µg/mL, of four cultivars of Psidium guajava (guava) evaluated on germination and root growth of plant models Lactuca sativa and Sorghum bicolor, as well as in the L. sativa cell cycle. Exposure to essential oils reduced germination and root growth in bioassays, especially at the highest concentration (3000 µg/mL). The essential oils interfered in the normal dynamics of the cell cycle of L. sativa at most concentrations, causing a decrease in the mitotic index and increasing of chromosomal alterations, evidencing aneugenic and clastogenic action. The biological activity of the oils was associated with the presence of sesquiterpenes and monoterpenes found here, such as caryophyllene oxide, (E) -caryophyllene, and limonene. Thus, the essential oils of cultivars of guava demonstrated the promising potential for use as natural herbicides. Los productos naturales con actividad biológica, como los aceites esenciales, pueden utilizarse en la búsqueda y desarrollo de herbicidas ecológicos como alternativa para reducir el daño causado por los herbicidas sintéticos. Este trabajo tuvo como objetivo determinar la composición química y propiedades fitotóxicas de los aceites esenciales, a concentraciones de 3000, 1500, 750, 375 y 187.5 µg/mL, de cuatro cultivares de Psidium guajava (guayaba) evaluados en la germinación y crecimiento radicular de modelos vegetales Lactuca sativa y Sorghum bicolor, así como en el ciclo celular de L. sativa. La exposición a los aceites esenciales redujo la germinación y el crecimiento de las raíces en los bioensayos, especialmente a la concentración más alta (3000 µg/mL). Los aceites esenciales interfirieron en la dinámica normal del ciclo celular de L. sativa en la mayoría de concentraciones, provocando disminución del índice mitótico y aumento de alteraciones cromosómicas, evidenciando acción aneugénica y clastogénica. La actividad biológica de los aceites se asoció con la presencia de sesquiterpenos y monoterpenos que se encuentran aquí, como el óxido de cariofileno, (E) -cariofileno y limoneno. Así, los aceites esenciales de cultivares de guayaba demostraron el potencial prometedor para su uso como herbicidas naturales. Produtos naturais com atividade biológica, como os óleos essenciais, podem ser utilizados na busca e desenvolvimento de herbicidas ecológicos como alternativa para reduzir os danos causados pelos herbicidas sintéticos. Este trabalho teve como objetivo determinar a composição química e propriedades fitotóxicas de óleos essenciais, nas concentrações de 3000, 1500, 750, 375 e 187,5 µg/mL, de quatro cultivares de Psidium guajava (goiaba) avaliadas na germinação e crescimento radicular das plantas modelos Lactuca sativa e Sorghum bicolor, bem como no ciclo celular de L. sativa. A exposição aos óleos essenciais reduziu a germinação e o crescimento radicular nos bioensaios, especialmente na concentração mais elevada (3000 µg/mL). Os óleos essenciais interferiram na dinâmica normal do ciclo celular de L. sativa na maioria das concentrações, causando diminuição do índice mitótico e aumento das alterações cromossômicas, evidenciando ação aneugênica e clastogênica. A atividade biológica dos óleos foi associada à presença de sesquiterpenos e monoterpenos aqui encontrados, como óxido de cariofileno, (E) -cariofileno e limoneno. Assim, os óleos essenciais de cultivares de goiaba demonstraram potencial promissor para uso como herbicidas naturais.

Submitted by GLÊYCE DE OLIVEIRA FERREIRA (gleyce.bio@hotmail.com) on 2021-09-02T22:42:09Z No. of bitstreams: 1 Tese - Glêyce de Oliveira Ferreira.pdf: 1787843 bytes, checksum: 1c6e8874f8342836c7d7019945926da9 (MD5) Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2021-09-08T19:20:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ferreira_go_dr_jabo_par.pdf: 576019 bytes, checksum: 66c7d76718edb6b8c24836d16cf27d5c (MD5) Made available in DSpace on 2021-09-08T19:20:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ferreira_go_dr_jabo_par.pdf: 576019 bytes, checksum: 66c7d76718edb6b8c24836d16cf27d5c (MD5) Previous issue date: 2021-07-06 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A cana-de-açúcar é uma cultura amplamente cultivada em regiões tropicais e subtropicais, de grande importância econômica, principalmente, na produção de açúcar e etanol. O bagaço resultante da moagem da cana é uma importante fonte de energia renovável utilizada na produção de energia elétrica pelas indústrias canavieiras brasileiras com excedente comercializado para complementar a geração hídrica no país. A cana energia é uma cultivar rica em biomassa, obtida de cruzamentos com S. spontaneum, uma espécie selvagem com alta diversidade genética e adaptável com número variável de citótipos na faixa de 2n = 40 – 128. O Programa de Melhoramento Genético de Cana-de-Açúcar do Instituto Agronômico (IAC/APTA) possui Banco Ativo Germoplasma (BAG) de cana-de-açúcar composto por diversos acessos do Complexo Saccharum. O estudo visou à caracterização via marcadores moleculares do tipo microssatélites (SSR) de acessos do germoplasma básico de cana-de-açúcar e avaliação do número cromossômico de acessos de S. spontaneum. Doze pares de primers de SSR foram utilizados para estabelecer o perfil molecular e avaliar a estrutura populacional e a diversidade genética entre 64 acessos de cana-de-açúcar. Os dados obtidos foram avaliados por meio de metodologias baseadas em distâncias genéticas e modelos probabilísticos, índices de diversidade genética obtidos pelo programa POPGENE versão 1.32, além das estimativas de similaridade genética entre os acessos, a análise de estrutura populacional obtidas pelos programas Structure v.2.3.4 e Structure Harvester. Raízes com aproximadamente 1cm de comprimento foram coletadas para confecção de lâminas citológicas aplicando o método de coloração de Feulgen para contagem de cromossomos em metáfases e investigar a presença de citótipos de quatro acessos de S. spontaneum. Os dados obtidos da contagem dos cromossomos foram avaliados por meio dos parâmetros: média, moda, desvio padrão, coeficiente de variação e gráfico Boxplot usado para avaliar a dispersão da contagem do número de cromossomos dos acessos de S. spontaneum. Todos os marcadores foram considerados informativos de acordo com seu valor de PIC, a análise estrutural da população e de similaridade revelou a formação de dois grupos e a contagem de cromossomos revelou a presença de três citótipos. Os resultados obtidos contribuirão para o manejo, conservação e utilização do germoplasma em programas de melhoramento genético de cana-de-açúcar para o desenvolvimento de cultivares melhoradas que atendam à necessidade do produtor e do consumidor, a exemplo da cana energia. Sugarcane crop is widely grown in tropical and subtropical regions, and has a great economic importance, mainly in sugar and ethanol production. The bagasse resulting from the sugarcane crushing is an important source of renewable energy used in the production of electric energy by the Brazilian sugarcane industries with surplus commercialized to complement the hydro generation in the country. Energy cane is a cultivar rich in biomass, obtained from crosses with S. spontaneum, a highly diverse and adaptable wild species with a variable number of cytotypes ranging from 2n = 40 – 128. The Sugarcane Genetic Breeding Program of the Agronomic Institute (IAC/APTA) has an Active Germplasm Bank (BAG) of sugarcane composed of several accessions of the Saccharum Complex. The study aimed the characterization of basic sugarcane germplasm accessions via microsatellite molecular markers (SSR) and the evaluation of the chromosome number of S. spontaneum accessions. Twelve SSR primer pairs were used to establish the molecular profile, genetic diversity and population structure among 64 sugarcane accessions. The data were evaluated using methodologies based on genetic distances and probabilistic models, genetic diversity indexes obtained by using the POPGENE version 1.32 software in addition to the genetic similarity estimates between accessions, analysis of population structure obtained by the Structure v.2.3.4 and Structure Harvester software. Roots of approximately 1cm length were collected for cytological slides confection using the Feulgen staining method for chromosome counting in metaphase and cytotype definition of four S. spontaneum accessions. The data from the chromosome count was evaluated using the parameters: mean, mode, standard deviation, coefficient of variation and Boxplot graphics applied to evaluate the dispersion of the chromosome number couting of S. spontaneum accessions. All markers were considered informative according to their PIC value, the population structure analysis and similarity revealed the formation of two groups and the chromosome count the presence of three cytotypes. The results will contribute to the management, conservation and use of germplasm in sugarcane genetic breeding programs for the development of improved cultivars that meet the needs of producers and consumers, such as energy cane. CAPES: 001

Orientador : Shirlei Maria Recco-Pimentel Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Populações polimórficas de Hyla semiguttata e espécies relacionadas, pertencentes ao grupo de Hyla pulchella, foram analisadas citogeneticamente e através das seqüências de segmentos do gene citocromo b e da região controle do DNA mitocondrial. Todas as populações do táxon H semiguttata apresentam polimorfismo no padrão de coloração, tamanho corpóreo e diferenças na vocalização de anúncio. A análise cito genética mostrou cariótipos com 2n = 24 cromossomos com morfologia muito conservada em todas as espécies e o mesmo padrão de banda C. A região organizadora do nuc1éolo (NOR) foi detectada no braço longo do par 10 em H marginata e no braço curto do par 1 nas populações de H semiguttata de São Francisco de Paula e Cambará do Sul, RS e de Piraquara, PR, H marginata e Hyla sp. (aff semiguttata) de Misiones, Argentina. Este foi o único caráter que as diferenciaram do ponto de vista citogenético, contrariando a sugestão de alguns autores de sinonimização de H semiguttata e H joaquini à H marginata. A análise filo genética baseada em 361 pb do gene citocromo b e 744 pb da região controle mostraram que a população de H semiguttata de São Francisco de Paula é muito próxima de H joaquini, contrariando a hipótese filo genética baseada em caracteres morfológicos e biológicos, que indicam uma proximidade maior com a população de Cambará do Sul. As populações de H semiguttata de Palmeira e Piraquara são muito próximas entre si e distantes das demais. Apesar de H marginata apresentar diferenças morfológicas e biológicas em relação às espécies Hyla sp. (aff polytaenia), H bishoffi e H guentheri, geneticamente parece ser muito próxima. A presença de Hyla sp. (aff polytaenia) (grupo de H polytaenia) neste mesmo c1ado indica que o grupo de H pulchella pode ser parafilético. Hibridação natural entre H bischoffi e Hyla sp. n. sugere que eventos cladogênicos possam estar ocorrendo entre estes taxa em simpatria e que o padrão de canto semelhante facilitou este processo. Como já sugerido por outros autores, muitos eventos cladogênicos estariam relacionados com a especiação de hilídeos neotropicais o que dificulta um estudo envolvendo populações polimórficas, principalmente quando o polimorfismo está relacionado com o padrão de coloração Abstract: Polymorphic populations of Hyla semiguttata and related species in the Hyla pulchella group were analyzed cytogenetically and by comparing the sequences of the cytochrome b gene and the control region of mitochondrial DNA. All H semiguttata populations showed polymorphism in color pattern, body size and acoustics. The cytogenetic analysis showed a karyotype with 2n = 24 chromosomes and a very conserved chromosomal morphology in all of the species. H semiguttata from São Francisco de Paula and Cambará do Sul, RS and Piraquara, PR, H marginata, and Hyla sp. (aff. semiguttata) from Misiones, Argentina had the same C-banding pattern. The nucleolar organizer region (NOR) located in the long arm of pair 10 in H marginata and in the short arm of pair 1 in the other specie the on1y character that differentiated these species cytogenetically. These results do not support the suggestion of some authors for the synonymization of H semiguttata and H joaquini with H marginata. The phylogenetic analysis based on 361 bp of the cytochromo b gene and 744 bp of the control region of mitochonsdrial DNA showed that the H semiguttata population at São Francisco de Paula was very close to H joaquini, in contrast to the phylogenetic conclusions based on morphological and biological characters, which indicated a greater proximity with the population at Cambará do Sul. The populations of H semiguttata at Palmeira and Piraquara were very close to each other and distant form the other populations. Although H marginata differs morphologically and biologically from Hyla aff. polytaenia, H bishoffi and H guentheri, our analysis showed them to be very closely related. The presence of Hyla sp. (aff. polytaenia) (H polytaenia group) in this clado indicates that the H pulchella group may be paraphyletic. Natural hybridization between H bischoffi and Hyla sp. n. demonstrates that cladogenic events may occurr between sympatric taxa and that the similar vocalization patterns of the two species facilitates this process. As already suggested by other many cladogenic events have been involved in the speciation of neotropical hylids, which makes it difficult a study polymorphic populations, especially when the polymorphism is related to the pattern of coloration Doutorado Biologia Celular Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Luciana Bolsoni Lourenço Morandini Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Dentre as espécies do gênero Engystomops, somente as três espécies do clado Edentulus (E. freibergi, E. petersi e E. pustulosus) e duas das seis espécies do clado Duovox (E. pustulatus e E. puyango) tinham o número diploide descrito, e a localização cariotípica das NORs (regiões organizadores de nucléolo) e das regiões heterocromáticas era conhecida apenas para E. freibergi, E. petersi e E. puyango. Os dados disponíveis mostravam que as espécies do clado Duovox já cariotipadas apresentavam 2n=20, enquanto o número cromossômico diploide de todas as espécies do clado Edentulus era 2n=22, assim como o das espécies de Physalaemus e Edalorhina, gêneros mais proximamente relacionados a Engystomops. Dessa forma, uma redução do número diploide de 2n=22 para 2n=20 era considerada na história de Engystomops, mas não era possível inferir se essa era uma sinapomorfia de E. puyango e E. pustulatus ou de todo o clado Duovox. Em relação ao clado Edentulus, algumas dúvidas também persistiam. Recentes estudos propunham a presença de um complexo de espécies amazônicas sendo confundidas com E. petersi. Citogeneticamente puderam ser reconhecidos três grupos nesse complexo, que corresponderam a populações de Puyo (Equador), Yasuní (Equador) e La Selva (Equador), diferentes ainda daquele de E. freibergi (Brasil). Nem sempre é possível a identificação de homeologias cromossômicas entre esses grupos, o que dificulta o reconhecimento dos possíveis rearranjos cromossômicos envolvidos na divergência cariotípica no gênero em questão. Também permanecia pouco explorada a diferenciação entre os cromossomos sexuais heteromórficos reconhecidos em populações de E. petersi e em E. freibergi. Os objetivos do presente trabalho foram estudar citogeneticamente as espécies de Engystomops do clado Duovox, melhor caracterizar os cromossomos sexuais de E. freibergi por meio de pintura cromossômica e buscar novos marcadores citogenéticos para auxiliar na identificação de homeologias cromossômicas nesse gênero. A análise cariotípica mostrou que as espécies E. randi, E. guayaco, E. montubio, E. pustulatus e E. coloradorum apresentaram 2n=20, assim como as espécies E. puyango e E. pustulatus, previamente cariotipadas, corroborando a hipótese de essa característica provavelmente seja uma sinapomorfia do grupo Duovox. Em E. coloradorum, foi encontrada uma fêmea triploide, que consistiu no primeiro relato de poliploidia para Engystomops. Em todas e somente nas fêmeas dessa espécie foi encontrado um heteromorfismo referente à presença de NOR dentre os cromossomos 10 homólogos o que sugere que esses sejam cromossomos sexuais e que o sistema de determinação do sexo em E. coloradorum seja ZZ/ZW. Quanto à análise dos cromossomos sexuais de E. freibergi, foi possível isolar por microdissecção os cromossomos X e Y e produzir sondas a partir da amplificação de segmentos desses cromossomos. A utilização da técnica de pintura cromossômica com tais sondas permitiu inferir que as regiões proximais do cromossomo X e do cromossomo Y de E. freibergi apresentam similaridade molecular, o que sugere a possibilidade de se tratarem de regiões pseudo-autossômicas. As sondas dos cromossomos sexuais de E. freibergi não detectaram os cromossomos X e Y de E. petersi de Puyo nem os cromossomos do par 11 homomórfico de E. petersi de Yasuní, não evidenciando, portanto, grande similaridade entre eles. O isolamento, a caracterização e a localização cariotípica do DNAr 5S das espécies pertencentes ao grupo Duovox permitiram inferir a possível homeologia do par cromossômico 6 dessas espécies entre si e com o par 6 das espécies do grupo Edentulus. Ainda, o uso de sondas PcP190EcoRI, referentes a uma família de DNA repetitivo derivada de DNAr 5S, permitiu identificar os cromossomos 5 de E. randi, E. guayaco e E. coloradorum e diferenciá-los dos cromossomos 6 dessas espécies, portadores do sítio de DNAr 5S do tipo II. Além disso, essa mesma sonda identificou a região pericentromérica do braço curto do cromossomo 3 (e do cromossomo 5 de E. petersi de Yasuní) de todas as espécies do gênero, com excessão de E. coloradorum, sugerindo outra possível homeologia entre esses cromossomos. Dessa forma, com o emprego de técnicas citogenéticas clássicas e moleculares foi possível fornecer importante contribuição para o estudo da evolução do gênero Engystomops Abstract: Of the species in the genus Engystomops, only three species of the Edentulus clade (E. freibergi, E. petersi and E. pustulosus) and two species of the Duovox clade (E. pustulatus and E. puyango) have had their diploid number described, while the NOR (nucleolus organizer region) and the heterochromatic sites were known only for E. freibergi, E. petersi and E. puyango karyotypes. The species of Duovox clade had 2n=20, while the diploid chromosome number of all species of Edentulus clade was 2n=22, which is the same diploid number of species of Physalaemus and Edalohina, genera closely related to Engystomops. Thus, the diploid number reduction from 2n=22 to 2n=20 was supposed, but it was not possible to infer if this was a synapomorphy of E. puyango and E. pustulatus or a synapomorphy of the entire Duovox clade. With regards to the Edentulus clade, some doubts also persisted. Recent studies proposed a complex of Amazonian species misidentified as E. petersi and it was possible to cytogenetically recognize three groups in this complex that corresponded to populations from Puyo (Ecuador), Yasuní (Ecuador) and La Selva (Ecuador). All of these karyotypes also differed from the E. freibergi (Brazil) karyotype. Chromosome homologies are not easily recognized between these groups, a fact that makes difficult the identification of chromosome rearrangements involved in karyotypic divergence in this genus. Additionally, the differentiation of the heteromorphic sex chromosomes found in the E. petersi and E. freibergi karyotypes remained unexplored. The goals of the present work are (1) to cytogenetically study the species of Duovox clade, (2) to better characterize the sex chromosomes of E. freibergi by means of chromosome painting and (3) to find new cytogenetic markers to identify potential chromosome homologies in this genus. The karyotypic analysis showed that the species E. randi, E. guayaco, E. montubio, E. pustulatus and E. coloradorum had 2n=20, as previously described in E. pustulatus and E. puyango. This corroborates the hypothesis that the diploid number 2n=20 is likely a synapomorphy of the Duovox clade. Among the specimens of E. coloradorum, a triploid female was found, which is the first report of polyploidy for the genus Engystomops. In all the females of this species, there was a NOR heteromorphism in the homologous chromosomes 10, suggesting that these may be ZZ/ZW sex chromosomes. Regarding the sex chromosomes of E. freibergi, it was possible to isolate the X and Y chromosomes by microdissection and to produce probes by amplifying segments of the microdissected chromosomes. The hybridization of these probes in E. freibergi metaphases showed that the proximal regions of the X and Y chromosomes of this species had molecular similarity, thus suggesting that they may be pseudoautosomal regions. The sex chromosome probes from E. freibergi detected neither the X nor the Y chromosome of E. petersi from Puyo nor the chromosomes of homomorphic pair 11 of E. petersi from Yasuní. This implies no significant similarity between them and the E. freibergi sex chromosomes. The isolation, characterization and karyotypic localization of the rDNA 5S from the species of the Duovox clade made it possible to infer the homeology of chromosome pair 6 of those species, as well as their homeology with chromosome pair 6 of the species of the Edentulus clade. Further, the probes PcP190EcoRI, which are related to a family of satellite DNA derived from rDNA 5S, made it possible to identify chromosome 5 of E. randi, E. guayaco and E. coloradorum and to differentiate them from chromosome 6, which carry type II rDNA 5S. In conclusion, both classical and molecular cytogenetic techniques provided important contributions for the study of the evolution of the genus Engystomops Doutorado Biologia Celular Doutora em Biologia Celular e Estrutural

Os mamíferos possuem conjunto cromossômico diploide, em que metade corresponde ao material genético herdado do pai, e a outra metade da mãe. Gatos domésticos (Felis catus) possuem número diploide de 38 cromossomos, sendo dois deles os cromossomos sexuais, responsáveis pela determinação do sexo, e que são representados por X e Y. As fêmeas possuem cromossomos sexuais XX, e os machos XY. As pelagens tortoiseshell e cálico podem estar presentes em gatos e são determinadas pela presença das cores preto e laranja em um mesmo animal, só que distribuídas de formas diferentes ao longo do corpo. Fisiologicamente, essas duas pelagens só podem ser observadas em fêmeas. Laranja e preto são cores determinadas pelo cromossomo X, portanto, conclui-se que essas duas cores só podem ser expressas em um mesmo animal, quando se trata de fêmeas, pois as mesmas possuem dois cromossomos X. Alguns machos nascem tortoiseshell ou cálico devido à ocorrência de anomalias cromossômicas, sendo a mais comum a anomalia semelhante à Síndrome de Klinefelter em humanos (47,XXY), que em gatos é 39,XXY. Essa condição é rara em machos, e para diagnóstico definitivo, o cariótipo é o exame citogenético mais utilizado. O trabalho teve por objetivo destacar as alterações genéticas envolvidas na presença das colorações das pelagens tortoiseshell e cálico em gatos domésticos machos, e o estudo tem importância na clínica veterinária de pequenos animais, já que essas desordens genéticas, em sua maioria, provocam distúrbios reprodutivos. A revisão tem significativa relevância na atuação do Médico Veterinário na área de citogenética clínica em pequenos animais, bem como no desenvolvimento de estudos voltados à área, que são consideravelmente escassos.

Submitted by Liz Jiannine Fuentes Rojas (lj.rojas@unesp.br) on 2021-07-01T02:31:44Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado. Liz J. Fuentes Rojas.pdf: 4775729 bytes, checksum: 6d3ebf1cf94ab854b6173038ff93f0e2 (MD5) Rejected by Adriana Cristina Damato (adriana.damato@unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 1- Na página de agradecimentos, os agradecimentos a CAPES e a FAPESP precisaam ser colocados em linhas separadas. Segundo a CAPES (Portaria nº 206, de 4 de setembro de 2018), o agradecimento deve conter exatamente a seguinte redação: -O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001. -À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo – FAPESP, pelo auxílio financeiro para desenvolvimento desta pesquisa - NUMERO DO PROCESSO. 2- Faltou colocar o CERTIFICADO DO CEUA Agradecemos a compreensão. on 2021-07-02T20:25:29Z (GMT) Submitted by Liz Jiannine Fuentes Rojas (lj.rojas@unesp.br) on 2021-07-07T03:31:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado. Liz J. Fuentes Rojas.pdf: 4984332 bytes, checksum: cd5afe437a31694a07f2737ecd96edbf (MD5) Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2021-07-07T13:32:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fuentesrojas_lj_me_jabo.pdf: 4984332 bytes, checksum: cd5afe437a31694a07f2737ecd96edbf (MD5) Made available in DSpace on 2021-07-07T13:32:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fuentesrojas_lj_me_jabo.pdf: 4984332 bytes, checksum: cd5afe437a31694a07f2737ecd96edbf (MD5) Previous issue date: 2021-05-21 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) RESUMO - O gênero Mazama está cercado de incertezas taxônomicas devido à alta diversidade cariotípica inter e intra-específica, origem polifilética e convergência morfológica, sendo que o número de espécies descritas em diferentes revisões varia entre quatro e dezoito. Dentro da espécie Mazama americana é sugerida a existência de novas espécies, já que além das diferenças moleculares e citogenéticas, existem evidências de isolamento reprodutivo pós-zigótico entre populações de veado-mateiro. Na Bolívia, até o momento foram descritas duas formas do gênero Mazama. A primeira delas é M. sarae Thomas, 1925; uma forma de veado vermelho descrito na região sul da Bolívia. Atualmente é considerado sinônimo de M. americana, com base nas características morfológicas daquele único exemplar descrito por Thomas (1925), sem nenhum tipo de abordagem genética. A segunda é M. chunyi Hershkovitz, 1959; uma forma de veado marrom de tamanho pequeno, que habita gradientes altitudinais de Puna-Yungas, no noroeste da Bolívia. Apesar de ser aceita como espécie única, as análises moleculares tem sido escassas e ainda não foi descrita cromossomicamente. Portanto, o presente estudo objetivou a caracterização de um topótipo de Mazama sarae e um topotipo de Mazama chunyi, sob aspectos morfológicos (biometria corporal, padrões de coloração da pele, craniometria), citogenéticos (coloração convencional Giemsa, biometria cromossômica, bandamento C, bandamento G, coloração Ag-NOR), e moleculares (análises filogenéticas do genoma mitocondrial, no caso de M. sarae, e de 3 genes mitocondriais para M. chunyi). Os resultados morfológicos posicionam ambas as espécies no clado dos pequenos Mazama (M. temama, M. nana, M. nemorivaga e M. gouazoubira). Segundo os padrões citogenéticos, os topótipos de ambas as espécies não se enquadram em nenhuma variante das espécies de Mazama atualmente conhecidas. As árvores filogenéticas geradas para o topótipo de M. sarae, permite evidenciar a espécie dentro da subtribo Odocoileina, mostrando uma distância considerável em relação ao M. americana e ao resto das espécies incluídas na subtribo. Por sua vez, o topótipo de M. chunyi, posiciona-se dentro da subtribo Blastocerina, próximo ao haplogrupo monofilético formado pelos espécimes de M. gouazoubira. Assim, propõe-se a caracterização de um topótipo para cada espécie estudada, o qual é o ponto de partida para a descrição de novas espécies e possível mudança completa na nomenclatura do gênero Mazama. ABSTRACT - Mazama genus' taxonomic uncertainties are due to high inter and intraspecific karyotypic diversity, polyphyletic origin, and morphological convergence. The number of species described in different reviews ranges from four to eighteen. Within the Mazama americana species, new species' existence is suggested since, in addition to molecular and cytogenetic differences, there is evidence of post-zygotic reproductive isolation between red brocket deer populations. In Bolivia, two forms of the genus Mazama have been described to date. The first of these is M. sarae Thomas, 1925; a form of red deer described in the southern region of Bolivia. It is currently considered a synonym of M. americana, based on the morphological characteristics of that single specimen described by Thomas (1925), without having any genetic approach. The second is M. chunyi Hershkovitz, 1959, a small-sized brown deer that inhabits altitudinal gradients of Puna-Yungas in northwestern Bolivia. Although accepted as a unique species, molecular analyses have been scarce and have not yet been described chromosomally.Therefore, the present study aimed at the characterization of a topotype of Mazama sarae and of a topotype of Mazama chunyi, under morphological aspects (body biometrics, skin color patterns, craniometry), cytogenetic (Giemsa conventional coloration, chromosomal biometry, C banding, G banding, Ag-NOR coloration) and molecular (phylogenetic analyses of the mitochondrial genome, in the case of M. sarae, and of 3 mitochondrial genes for M. chunyi). The morphological results position both species in the clade of the small Mazama (M. temama, M. nana, M. nemorivaga e M. gouazoubira). According to cytogenetic patterns, both species' topotypes do not fit any variant of the Mazama species known until now. The phylogenetic trees generated for the topotype of M. sarae, allow us to evidence the species within the subtribe Odocoileina, showing a considerable distance from M. americana and the rest of the species subtribe. In this way, M. chunyi topotype is positioned within subtribe Blastocerina, close to the monophyletic haplogroup formed by specimens of M. gouazoubira. Thus, we propose the characterization of a topotype for each species studied, which is the starting point for the description of new species and possible complete change in the nomenclature of the genus Mazama. CAPES: 001

Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq, Proc. PDE 204792/2018-5 ), Funda??o de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul (FAPERGS, 16/2551-000485-7 and the Biotechnology and Biological Sciences Research Council UK (BB/K008226/1. University of Kent. School of Biosciences. Canterbury, NJ, UK / Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Departamento de Gen?tica. Porto Alegre, RS, Brazil. Universidade Federal do Pampa. Laborat?rio de Diversidade Gen?tica Animal. S?o Gabriel, RS, Brazil. Universidade Federal Rural da Amaz?nia. Laborat?rio de Reprodu??o Animal. Parauapebas, PA, Brazil. University of Kent. School of Biosciences. Canterbury, NJ, UK. Universidade Federal do Pampa. Laborat?rio de Diversidade Gen?tica Animal. S?o Gabriel, RS, Brazil. Universidade Federal do Pampa. Laborat?rio de Diversidade Gen?tica Animal. S?o Gabriel, RS, Brazil. Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Departamento de Gen?tica. Porto Alegre, RS, Brazil. Minist?rio da Sa?de. Secretaria de Vigil?ncia em Sa?de. Instituto Evandro Chagas. Laborat?rio de Cultura de Tecidos e Citogen?tica. Ananindeua, PA, Brasil / Universidade Federal do Par?. Instituto de Ci?ncias Exatas e Naturais. Bel?m, PA, Brazil. University of Kent. School of Biosciences. Canterbury, NJ, UK. University of Kent. School of Biosciences. Canterbury, NJ, UK. Interchromosomal rearrangements involving microchromosomes are rare events in birds. To date, they have been found mostly in Psittaciformes, Falconiformes, and Cuculiformes, although only a few orders have been analyzed. Hence, cytogenomic studies focusing on microchromosomes in species belonging to different bird orders are essential to shed more light on the avian chromosome and karyotype evolution. Based on this, we performed a comparative chromosome mapping for chicken microchromosomes 10 to 28 using interspecies BAC-based FISH hybridization in five species, representing four Neoaves orders (Caprimulgiformes, Piciformes, Suliformes, and Trogoniformes). Our results suggest that the ancestral microchromosomal syntenies are conserved in Pteroglossus inscriptus (Piciformes), Ramphastos tucanus tucanus (Piciformes), and Trogon surrucura surrucura (Trogoniformes). On the other hand, chromosome reorganization in Phalacrocorax brasilianus (Suliformes) and Hydropsalis torquata (Caprimulgiformes) included fusions involving both macro- and microchromosomes. Fissions in macrochromosomes were observed in P. brasilianus and H. torquata. Relevant hypothetical Neognathae and Neoaves ancestral karyotypes were reconstructed to trace these rearrangements. We found no interchromosomal rearrangement involving microchromosomes to be shared between avian orders where rearrangements were detected. Our findings suggest that convergent evolution involving microchromosomal change is a rare event in birds and may be appropriate in cytotaxonomic inferences in orders where these rearrangements occurred.