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T cell recognition of foreign Ag/MHC class II complexes is sensitive down to approximately 100 complexes per cell or approximately 0.2 complexes/micron2. To better understand the physical basis of the recognition stage of Ag presentation, we examined adhesion of the lysozyme- specific T cell hybridoma, 3A9, to artificial bilayers containing covalent MHC class II/peptide complexes or adhesion molecules. Adhesion of 3A9 cells required a superphysiologic density of the MHC class II/peptide complex and was partly dependent on CD4; cells adhered but did not crawl. No adhesion was observed to bilayers containing MHC class II molecules without the lysozyme peptide. Activated 3A9 cells adhered and crawled on bilayers containing ICAM-1. The physical strength of contacts was tested with fluid shear. 3A9 cells adherent to bilayers containing MHC class II/peptide complexes shed their contact, which remained on the substrate and contained TCR. In contrast, 3A9 cells peeled from the ICAM-1 bilayer, and held firmly on LFA-1 bilayers; in a manner dependent on filamentous actin. When ICAM-1 and the MHC/peptide complexes were combined, the 3A9 cells adhered tightly and spread, but did not crawl, on the bilayers and TCR clustered at the center of the contact area. Physiologically, the TCR is unlikely to directly initiate adhesion. TCR clusters formed with the assistance of adhesion mechanisms may have to be shed to allow de-adhesion, and this may contribute to TCR down-regulation.

Class II MHC molecules on the surface of an APC present immunogenic peptides derived mainly from exogenous proteins to CD4+ T cells. During its transport to the cell surface, class II molecules intersect the endocytic pathway where they acquire peptides derived from endocytosed proteins. However, class II-restricted presentation of endogenously derived peptides can also occur. The current studies were undertaken to examine the ability of different types of APC to generate and present four different T cell determinants derived from an endogenous, nonsecreted, truncated form of hen-egg white lysozyme (HEL[1-80]-Kk). This was compared with the ability of these APC to generate the same determinants from exogenous HEL. All the peptides derived from endogenous HEL[1-80]-Kk tested, were presented by B cells to HEL-specific T cell hybridomas with an efficiency similar to presentation of the same determinants from exogenous HEL. In contrast, an I-Ak-bearing rat fibroblast was unable to generate the HEL peptide 25-43 from exogenous HEL, but could efficiently produce it from endogenous HEL[1-80]-Kk. The results indicate first, that peptides derived from an endogenous Ag can be presented by MHC class II molecules with an efficiency comparable to that of the presentation of the exogenous Ag. Second, that Ag-presenting B cells can generate the same repertoire of antigenic peptides from endogenous Ag as those generated from the exogenous protein. And third, that in contrast to B cells, certain "nonprofessional" APC can generate, from an endogenous protein, T cell determinants distinct from those generated after endocytosis of the exogenous protein. These results suggest that processing of exogenous and endogenous Ag by different APC take place in different intracellular compartments.

Starch-elicited murine peritoneal macrophages were able to kill schistosomula in vitro in the presence of a variety of immune sera. Dose response experiments revealed the superior "quality" of serum from mice vaccinated four times with highly irradiated cercariae (4xVMS) in mediating killing at titers comparable to the other sera tested. B3A, a partially protective mAb (IgG3) that recognizes a Mr 16,000 schistosomular surface Ag, mediated higher levels of killing than any of the sera at comparable titers. In contrast, H12, a partially protective mAb (IgG2a; anti-Mr 32,000), and C1C9, a nonprotective McAb (IgG3; anti-Mr 38,000) failed to mediate killing. Two anti-Mac-1 alpha-chain mAb (5C6 and M1/70) mediated substantial dose-dependent blocking of 4xVMS and B3A-mediated macrophage killing. In contrast, a mAb to the Mac-1-associated beta-chain was less effective, whereas the mAb F4/80 did not significantly block killing despite being present on this macrophage population. Although whole 5C6 Ig was the most efficient at inhibiting B3A-mediated killing, 5C6 Fab fragments were still effective at concentrations as low as 0.5 microgram/ml (10 nM). On a molar basis 5C6 appeared to be more effective at blocking 4xVMS-mediated killing than M1/70, while only M1/70 was capable of inhibiting macrophage adherence to schistosomula. These findings, together with the observation that anti-alpha chain mAb were far more effective at blocking killing than the anti-beta-chain mAb, rules out the possibility that 5C6 is nonspecifically inhibiting B3A-FcR interaction. The data also imply a functional relationship between Mac-1 and FcRIII, the receptor for B3A, in macrophage killing.

SCHEDA G.10 - Gli Accordi per la sicurezza offshore: Istituzioni, Enti di Ricerca e Università Ai sensi del Codice dell’Ambiente, come modificato dall’art. 35 del Decreto Legge n. 83/2012, l’aumento del 3% delle royalties per la produzione di olio e gas versate dagli operatori sono destinate ad apposito capi - tolo del Ministero dello sviluppo economico per assicurare il pieno svolgimento delle attività di vigilanza e controllo della sicurezza anche ambientale degli impianti di ricerca e coltivazione in mare. A questo scopo e per rispondere alle prescrizioni della Direttiva 2013/30/UE la DGS-UNMIG ha avviato nel 2014 collaborazioni con Forze Armate, Centri di Ricerca ed Università per il conseguimento di obiettivi finalizzati a: - definizione di un indicatore di sicurezza e sostenibilità - miglioramento del monitoraggio e innovazione tecnologica - definizione di regolamentazione e best practices - dialogo e trasparenza con gli stakeholders. Questi obiettivi di progetto si pongono a supporto delle attività istituzionali legate alla sicurezza mineraria ed energetica portate avanti dalla Direzione. Gli accordi hanno in primo luogo permesso alla DGS-UNMIG di usufruire di una rete di conoscenze specifiche multidisciplinari applicate al settore della sicurezza con il coinvolgimento di professori, ricercatori, assegnisti di ricerca sia presso gli enti che in distacco presso la Direzione al fine di cooperare giornalmente su questi temi. Attraverso il network, così come ad oggi è ribattezzato l’insieme delle partnership sulla sicurezza, la Direzione ha la possibilità di studiare e produrre nuove conoscenze relativamente a temi di frontiera, pervenendo a risultati tecnici e rigorosi trattati con metodo scientifico e sperimentale: attraverso la misurazione, l’analisi, l’elaborazione e quando necessario ripartendo da nuove assunzioni. I primi risultati significativi sono emersi nel 2015 nell’ambito dei monitoraggi. Dopo un anno di attività infatti la Marina Militare e le Capitanerie di Porto avevano significativamente aumentato i controlli e i pattugliamenti in mare nelle aree di interesse minerario attraverso l’utilizzo di mezzi aeronavali dedicati. Tali controlli hanno portato alla individuazione di infrazioni delle aree di sicurezza delle piattaforme e al controllo delle attività svolte in mare dalle navi oceanografiche di ricerca nonché allo sviluppo di software altamente tecnologici per il loro monitoraggio. Solo nel 2016 sono emersi i primi risultati relativi alla definizione di un prototipo di indicatore per la sicurezza e sostenibilità. L’indicatore ha l’ambizioso obiettivo di raffigurare sinteticamente lo stato di sicurezza delle attività minerarie in mare. Il prototipo ideato si basa momentaneamente su 3 Key Performance Indicators (pattugliamenti, ispezioni e infortuni) da testare e convalidare nel corso del 2017. Ad oggi, questi valori hanno dato la possibilità di registrare e comunicare un trend in miglioramento della sicurezza offshore. Altri importanti studi sono stati condotti relativamente all’Analisi Multirischio per gli impianti in un’area nel Mare Adriatico centrale “ Progetto ARGO”, in particolare per gli aspetti di eventi meteo marini estremi, alla sismicità naturale e indotta e alla subsidenza. Inoltre sempre nel monitoraggio stanno perseguendo va lutazioni per il controllo in continuo di parametri significativi per la prevenzione di eventuali impatti delle attività offshore, a partire da una prima mappatura della pericolosità dei fondali e alla realizzazione di un database per l’ottimizzazione energetica degli impianti. Attraverso gli accordi è partito anche un importante progetto di comunicazione che proprio a dicembre 2016 ha visto il primo evento di rilevanza ed impatto mediatico dedicato al tema del network.

SCHEDA E.4 - La Legge del 2 dicembre 1994, n. 689 “Ratifica della Convenzione delle Nazioni Unite sul diritto del mare stipulata a Montego Bay, il 10 dicembre 1982” Con la Legge n. 689/1994 l’Italia ha ratificato La Convenzione delle Nazioni Unite sul Diritto del Mare, ad oggi firmata da 157 Stati e ratificata da 167. In un contesto storico mondiale in cui il mare oltre la fascia delle 3 miglia nautiche antistanti i litorali era considerato “acque internazionali”, ossia di proprietà di nessuno Stato e quindi di libero accesso, l’introduzione di questa Legge rappresenta una novità assoluta volta a creare ordine giuridico ed economico (con particolare riguardo ai Paesi in via di sviluppo anche privi di litorale1). Il Documento si basa sui principi di uso equo e pacifico delle risorse e della conservazione e protezione dell’ambiente marino in accordo con quanto espresso dalla Risoluzione n. 2749 (XXV) del 17 dicembre 1970, in cui l’Assemblea generale delle Nazioni Unite dichiarò solennemente, che «l’area del fondo marino e degli oceani ed il loro sottosuolo, oltre i limiti della giurisdizione nazionale, così come le sue risorse, sono da considerarsi patrimonio comune dell’umanità» (Introduzione al Compendio dei documenti base “The Law of the Sea”, 2001). L’UNCLOS è composto quindi da diverse Parti volte a disciplinare: - la definizione e regolamentazione degli spazi marini con l’introduzione dell’esercizio della Piattaforma Continentale, della Zona Economica Esclusiva (ZEE), della Zona di Protezione Ecologica (ZPE), della Zona Contigua, dell’alto mare e dell’“Area” relativa alle acque internazionali (PART II, PART IV - VIII, PART IX-XI); - la navigazione internazionale (PART III); - la conservazione e protezione dell’ambiente marino (cooperazione internazionale e regionale, monitoraggi e valutazione ambientale) (PART XII); - le ricerche scientifiche (PART XII); - lo sviluppo e il trasferimento di tecnologia marina. La necessità di adottare un regolamento internazionale comune è fondamentalmente legata quindi alla possibilità di uno sviluppo equo e sostenibile delle risorse marine locali e internazionali: idrocarburi, minerali, noduli polimetallici (di manganese, di zolfo e crosta ricca in cobalto) e gas idrati. Entro i mari ritenuti di giurisdizione dello Stato Membro, ovvero entro la propria piattaforma continentale, lo Stato definisce la normativa e i regolamenti per lo sviluppo delle proprie risorse nel rispetto dei principi espressi dalla UNCLOS. Nelle acque di giurisdizione internazionale, nella cosiddetta “Area” (cfr. art. 136 PART XI), l’UNCLOS ha istituito, ai sensi dell’art. 136, l’Autorità internazionale per i fondali marini (“International Seabed Authority, ISA”). La funzione principale dell’Autorità è quindi quella di regolare le risorse in acque profonde e assicurare la protezione dell’ambiente marino da qualsiasi effetto pericoloso che può derivare dalle attività umane. 1 L’UNLCOS assicura l’adozione da parte di tutti gli Stati e dell’Autorità competente di principi finalizzati a garantire meccanismi di partecipazione alle decisioni per i Paesi in via di sviluppo o privi di litorale tramite la presenza di rappresentanti permanenti negli organi decisionali, i meccanismi di site banking, per riservare parte delle zone concesse oltre che agli investitori anche ai paesi in via di sviluppo, e politiche di istituzione e gestione di un fondo dedicato di assistenza economica che grava direttamente sul fondo dell’Autorità. Con questo scopo, l’Autorità gestisce e definisce le procedure di coltivazione ed estrazione delle risorse minerarie (solide, liquide o gassose in situ o sotto il fondale marino, incluso i noduli polimetallici) attraverso 3 livelli decisionali e di controllo, che in ordine di importanza sono: - l’Assemblea, composta da tutti gli Stati ratificatori e di cui l’African, Caribbean and Pacific Group of States (ACP) è il principale organo decisionale. Assume le decisioni, generali e finali, sulla base di un consenso o dell’espressione di voto di maggioranza, avvalendosi dei pareri derivanti dal Consiglio (art. 159, par. 8); - il Consiglio, composto da 36 membri eletti dall’Assemblea, tra i quali i rappresentanti di consumatori, investitori ed esportatori degli Stati in via di sviluppo o con interessi particolari e rappresentanti regionali di diversi Stati. È l’organo esecutivo dell’Autorità e stabilisce politiche specifiche in conformità ai principi fissati dall’Assemblea, supervisionando e coordinando i lavori per quanto di competenza dell’Autorità, approvando quanto deliberato dalle Commissioni tecnico legale e finanziaria; - la Commissione legale-tecnica (Legal and Techinical Commission, LTC) e la Commissione finanziaria (Economic Planning Commission, EPC), sono formate entrambe da 15 membri eletti dal Consiglio. La prima formula le procedure e i regolamenti per le attività di prospezione, esplorazione e produzione e aggiorna il Consiglio circa i provvedimenti per la protezione del mare in base alle principali criticità di impatto ambientale del progetto individuate. La seconda si occupa di effettuare un’accurata analisi delle capacità tecniche ed economiche per verificare la fattibilità di progetto. A livello internazionale l’Autorità ha definito:2 - Norme per la prospezione e l’esplorazione di noduli polimetallici nell’Area; - Norme per la prospezione e l’esplorazione dei noduli di zolfo nell’Area; - Norme per la prospezione e l’esplorazione della crosta ferromanganese ricca in cobalto. Nel corso degli ultimi anni la DGS-UNMIG è stata coinvolta e ha partecipato attivamente alla ventunesima Sessione dell’International Seabed Authority a Kingston, Giamaica (atto ISBA 21/A/INF/6), e ha seguito i lavori per la stesura della prima bozza di “Codice di produzione Mineraria nell’Area”.3 A luglio 2016, la Commissione ha sottoposto la prima bozza di Codice a consultazione di tutti gli stati Membri e gli stakeholder per ricevere, entro il 2 novembre 2016, osservazioni al riguardo (Developing a Regulatory Framework for Mineral Exploitation in the Area). La bozza fornisce gli elementi base per i processi di presentazione delle istanze da parte degli operatori e le successive attività amministrative, i diritti e i doveri degli operatori anche dettati da specifiche “Linee Guida” e “Raccomandazioni”. Il draft fornirà inoltre indicazioni in relazione ai principi di sicurezza e razionale gestione delle risorse, in accordo con l’adozione delle migliori pratiche industriali per la produzione e il monitoraggio delle attività, nonché in relazione alla redazione di uno studio dettagliato di analisi e gestione del rischio e di intervento in caso di danno ambientale. Di pari passo alla stesura del Codice procederà lo sviluppo di uno specifico “Regolamento Ambientale” e del “Regolamento Direttoriale per il Seabed Mining” rispettivamente relativi, 2 www.isa.org.jm/mineral-resources/553; www.isa.org.jm/files/documents/EN/Regs/DraftExpl/Draft_ExplReg_SCT.pdf ) il primo alla stesura di un “piano di gestione ambientale strategico” che include le misure di intervento collegate ai principali impatti individuati, e il secondo alla definizione dei processi funzionali giornalieri (amministrativi, di reporting, e di miglioramento) collegati alle procedure dell’Autorità per attività di ispezione e controllo. Il Codice e i due documenti ambientali saranno successivamente confrontati per verificare eventuali conflittualità o sovrapposizioni delle normative. La Commissione Legale - Tecnica (LTC) si è incontrata a febbraio del 2017 discutendo il draft di regolamento per la produzione mineraria nell’Area. Il Documento è stato poi posto in consultazione dal Segretariato dell’ISA ad agosto 2017 per commenti da parte di tutti gli stakeholder. La deadline per la proposta di osservazioni al Documento è il 20 dicembre 2017.