Search

The aim of plant gene banks is to preserve genetic resources selected based on their phenotypic, agronomic, historical or other cultural values for future utilization. In the present study the modified PVS2 droplet vitrification technique was tested and optimized for cryopreservation of a large diversity of blackcurrant (R. nigrum L.) accessions propagated in vitro and selected into a national gene bank core collection. Out of four accessions tested to optimize the method, three recovered and regenerated by 89–97% on average, but one recalcitrant in vitro line only by 25%. The tested post-cryopreservation recovery media with different macronutrient and growth regulator levels showed no generalized effect on regenerated shoots, but the effect of recovery media was different between cultivars. When the whole regeneration chain from cryopreservation via micropropagation to greenhouse conditions was tested, shoots at least 1 cm in length were found necessary for successful transfer ex vitro. The long-term cryopreservation of 22 blackcurrant accessions was finally conducted, with practices slightly modified from the tested protocol. The estimated recovery of shoot tips after 9 weeks in vitro was 17–94% with at least 75% recovery in seven accessions and at least 40% recovery in 19 out of 22 accessions. Only one accession had no cryopreservation success. The results demonstrated that the modified droplet vitrification technique is appropriate for a large diversity of blackcurrant accessions. However, cultivar-related differences and recovery procedures are to be considered for success in regeneration and ex vitro adaptation.

Tiivistelmä. Syventävässä tutkielmassa syvennyttiin oppimiseen, kartoittaen sitä tukevaa ohjausta vuorovaikutuksellisena ilmiönä. Oppimiskäsityksistä keskityttiin erityisesti transformatiiviseen oppimiseen. Tämän lisäksi tutkielmassa avattiin dialogisen ohjauksen käsitteitä näyttäen, miten ne voisivat jäsentää ammatillista kasvua tukevan ohjauksen vuorovaikutusta. Tutkielma on laadullinen tutkimus, joka toteutettiin tapaustutkimuksena. Tapauksena on ohjaajakoulutuksessa näytelty ohjaustilanne ja siitä tehty tekstimuotoinen transkriptio. Aineiston analyysimenetelmänä on laadullisen tutkimuksen sisällön analyysi sekä dialoginen sekvenssianalyysi soveltuvin osin. Transformatiivisessa oppimisessa oppimisen ydin on kokemusten merkitysten tarkastelu ja sen myötä tapahtuva kehittyminen. Aiempia kokemuksia ja tulkintoja reflektoiden muodostetaan uusi korjattu tulkinta ja muiden kanssa keskusteltaessa testataan, pitääkö uusi korjattu tulkinta paikkansa. Transformatiivisen oppimisen viimeisessä vaiheessa uusi käsitys sisäistetään ja oppija integroi sen muiden käsitysten joukkoon. Ohjausta tehdään pääasiassa olemalla vuorovaikutuksessa, keskustelemalla. Ohjaaja on asiantuntijana prosessissa, jossa ohjattava oppii käsittelemään kokemuksiaan, tekemään itsereflektiota, suuntaamaan oppimistaan ja ratkaisemaan ongelmiaan. Ohjaajan tärkeimpiä taitoja ovat näin ollen vuorovaikutustaidot. Dialogisin periaattein tapahtuvassa ohjaustilanteessa merkittävimpiä ohjaajan periaatteita ovat kuunteleminen, toisen kunnioittaminen ja myönteinen suhtautuminen asioihin ja ihmisiin. Sama periaate ohjaajasta hyvänä kuuntelijana tulee esiin myös teoriassa transformatiivisen oppimisen teoriassa. Kuuntelemisen lisäksi ohjaajan on keskeistä pitäytyä ohjattavan näkökulmassa. Ohjaajan tulisi olla kiinnostunut ohjattavan tavoista hahmottaa ongelmaa ja etsiä ohjattavan ilmaisusta vihjeitä, jotka kertovat hänen suhtautumistavoistaan itseen ja kohteena olevaan asiaan. Tutkimus tukee käsitystä, että dialoginen ohjaus mahdollistaisi transformatiivisen oppimisen.

Cryopreservation of dormant buds can be a feasible method for long term preservation of clonally propagated woody plants. In the present study, dormant buds of blackcurrant (Ribes nigrum L) cultivar Mortti were cryopreserved. Twig segments from greenhouse and field grown plants were cooled at their natural moisture content at the rate of 0.17 °C min⁻¹ from zero to −38 °C, immersed in liquid nitrogen and stored in liquid nitrogen vapor. The post-cryopreservation regrowth of buds was evaluated in vitro and viability of recovered plants was tested in vivo. The estimated recovery rate for buds thawed after 1–6 days in cryostorage was 86% and 66% for outdoor and greenhouse grown buds, respectively. Microplants adequate in size and quality grew successfully in vivo and plants produced berries in field. After 4 years in cryostorage, the estimated recovery rate for outdoor buds was 58%. According to results from 1 to 6 days cryostorage, the tested dormant bud protocol turned to be applicable for cryopreservation of the blackcurrant cultivar Mortti. However, concerning the long-term preservation the decline of recovery is important to consider in the future experiments.