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Background: Ziziphus obtusifolia is a spiny shrub found in Northwest Mexico desert, with traditional medicinal use to treat several diseases including cancer. Objective: The aims of the present study were to evaluate the antiproliferative and apoptotic activities of the aerial parts of this plant. Materials and Methods: The methanol extract and its fractions were prepared using several solvents. The antiproliferative activity was evaluated by the (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium) (MTT) assay on HeLa, A549, RAW 264.7, M12.C3.F6, and L-929 cell lines, and the apoptotic activity using Annexin V and (5,50,6,60-tetra-chloro-1,10,3,30-tetra-ethylbenzimidazol-carbocyanine iodide) staining. The most active fraction was further separated by column chromatography. Results: The most active fraction was hexane with an IC50 of 90.4 μg/mL against RAW 264.7, 94 μg/mL against M12.C3.F6, 165.5 μg/mL against HeLa and 187.7 μg/mL against A549 cell lines. In apoptotic activity assays the methanol extract and its n-hexane fraction were found to induce mitochondrial depolarization in HeLa cells (83 and 87% respectively), and both induced the externalization of the phosphatidylserine increasing the percentage of cells in early apoptosis from 1.4% in untreated control cells, to 1.9% and 3.5% for methanol extract and n-hexane fraction-treated cells, respectively, statistically different for the total percentage of apoptotic cells (P < 0.05). Conclusions: These results show that Z. obtusifolia has antiproliferative and apoptotic activities in vitro and confirms its use in traditional medicine. SUMMARY The methanol extract and its fractions using several solvents were evaluated in the antiproliferative activity by the MTT assay on HeLa, A549, RAW 264.7, M12.C3.F6, and L-929 cell lines, and the apoptotic activity using Annexin V and (5,50,6,60-tetra-chloro-1,10,3,30-tetra-ethylbenzimidazol-carbocyanine iodide) staining. The most active fraction against cell lines was hexane. In apoptotic activity assays, the methanol extract and its n-hexane fraction were found to induce mitochondrial depolarization. This results we showed that Ziziphus obtusifolia has antiproliferative and apoptotic activities in vitro. Abbreviations Used: DMEM: Dulbecco's modified eagle's medium, DMSO: Dimethyl sulfoxide, MTT: (3-4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium), JC-1: (5,50,6,60-tetra-chloro-1,10,3,30-tetra-ethylbenzimidazol-carbocyanine iodide), FBS: Fetal bovine serum, CAPE: Caffeic acid phenethyl ester, PBS: Phosphate-buffered saline.

Tesis de maestría en ciencias de la salud Cryptosporidium es un parásito patógeno emergente que afecta a una gran variedad de animales incluyendo al hombre. A la enfermedad ocasionada por este parásito se le conoce como criptosporidiosis, provoca síntomas como diarrea, dolor y distensión abdominal, vómito entre otros. Las personas más susceptibles a padecerla son niños y pacientes inmunodeficientes. En una investigación sobre los casos de criptosporidiosis detectados entre 1989 y 2008 realizado en Inglaterra y Gales se encontró que la edad en el paciente es un factor principal en la epidemiología de la infección; los niños de 0 a 4 años tienen un riesgo mayor de padecer criptosporidiosis, debido a la inmadurez del sistema inmune asociado a mucosas, como la células dendríticas encargadas de presentar antígenos de Cryptosporidium a linfocitos T cooperadores y así eliminar la infección. Cryptosporidium parvum y Cryptosporidium hominis son las especies responsables del 90% de las infecciones en humanos. En los últimos años se han realizado importantes revisiones del género Cryptosporidium con la identificación de nuevas especies/genotipos y recientemente “subtipos”, usando genes como la pequeña subunidad del ribosoma (SSU rRNA) y la glicoproteína de 60 kDa (GP60). La identificación de las especies del parásito es de suma importancia para los estudios epidemiológicos, también lo es la identificación de los subtipos pues nos permite conocer la variabilidad genética del parásito. Para la identificación de los subtipos, el gen de la GP60 es el más utilizado debido a que contiene múltiples regiones que muestran altas tasas de mutación, incluyendo una región hipervariable de microsatélite con repeticiones en tándem de tres nucleótidos que codifican para el nucleótido serina. Estas repeticiones son las que permiten nombrar a los subtipos de C. parvum y C. hominis. El análisis de la secuencia del gen de la GP60 ha permitido la clasificación en diferentes subtipos. Existen 11 subtipos de familia para C. parvum (IIa, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIg, IIh, IIi, IIk y IIl) y 6 para C. hominis (Ia, Ib, Id, Ie, If y Ig). En México solamente se ha publicado un artículo que incluye la caracterización molecular de Cryptosporidium en heces humanas; sin embargo, son pocos los casos que se analizaron. Por lo que la presente investigación identificó la variabilidad genética en un mayor número de casos. Se analizaron 18 muestras positivas a Crpyotposridium spp., los pacientes procedían del Hospital Infantil del Estado de Sonora y del Centro Médico Dr. Ignacio Chávez, en total se obtuvo que 61% eran niños (11/18) y 39% eran niñas (7/18) y todos los infantes tenían una edad menor a 9 años. De esa forma se hace notar que el menor de edad, principalmente menores de 5 años tiene un riesgo mayor de padecer la enfermedad al conjuntarse una serie de variables como el sistema inmune asociado a mucosas inmaduro del niño, los pocos hábitos de higiene y variables externas como la falta de agua potable. La manifestación clínica más frecuente entre estos pacientes fue diarrea seguido de la desnutrición. Los subtipos de familia encontrados dentro de C. hominis fueron: Ia (1/9), Ib (3/9) y Ie (5/9); mientras que en C. parvum: IIa (7/8) y IIc (1/8). Dentro del subtipo de familia Ia de C. hominis se identificó un solo subtipo: IaA15G1R1 (1/9). Para Ib se encontraron 3 subtipos IbA12G3R2 (3/9) y para Ie dos subtipos: IeA11G3T3 (2/9). En C. parvum se identificó dentro del subtipo de familia IIa a 5 subtipos: IIaA15G2R1 (5/8) y un solo subtipo IIcA5G3 (1/8) dentro del subtipo de familia IIc. También se identificó el primer caso de Cryptosporidium canis en México, reconociendo que la transmisión zoonótica no carece de importancia en la región a pesar de que la transmisión antroponótica fue más predominante, además, se identificaron los subtipos IIcA5G3, IaA15G1R1 y IbA12G3R2 que no han sido reportado en México. Universidad de Sonora. División de Ciencias Biólogicas y de la Salud. Programa de Maestría en Ciencias de la Salud, 2015.

Tesis de maestría en ciencias de la salud Cryptosporidium es el agente causante de criptosporidiosis, una infección diarreica que puede conducir a la deshidratación severa y muerte en pacientes inmunocomprometidos. Este parásito tiene una distribución mundial, se han descrito 20 especies, así como un gran número de nuevas variantes de Cryptosporidium. Los síntomas más comunes de la criptosporidiosis incluyen diarrea, náusea, vómitos, dolor abdominal y malestar general. La forma infectante y diagnóstica es el ooquiste. La introducción de la tecnología de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) proporcionó un diagnóstico específico a nivel de especie con alta sensibilidad, permitiendo un examen rápido, repetible y de alta precisión, con la capacidad de analizar gran número de muestras. Las herramientas moleculares han sido aplicadas generalmente para la identificación de los aislados de Cryptosporidium en los seres humanos y animales a nivel de especie y genotipo. En la actualidad, no existen estudios llevados a cabo en México para la identificación de las especies y genotipos circulantes de este parásito. El presente estudio está dirigido a caracterizar molecularmente mediante PCR-RFLP el gen SSU rRNA de Cryptosporidium aislado de heces de pacientes en Hermosillo y la Cd. de México para la identificación de las especies y genotipos circulantes de este parásito, permitiendo así el avance en el diagnóstico etiológico certero. En este trabajo se analizaron 17 casos positivos: se identificaron tres especies de Cryptosporidium: seis casos fueron C. parvum (genotipo bovino), diez casos C. hominis (genotipo humano) y un caso C. felis. Estos resultados se confirmaron mediante secuenciación de los productos de PCR anidados y su análisis. Este trabajo representa el primer reporte publicado de Cryptosporidium en muestras de heces humanas en México. Universidad de Sonora. División de Ciencias Biológicas y de la Salud. Programa de Maestría en Ciencias de la Salud 2014.

Tesis de maestría en ciencias de la salud La amibiasis es una infección común y potencialmente letal, considerada la segunda enfermedad asociada a mortalidad sólo después de la malaria en términos de protozoarios. El protozoario parásito intestinal Entamoeba histolytica causa colitis amibina y enfermedad extraintestinal, que incluye el absceso hepático amebiano. (Haque y col., 2003; Stanley, 3002). Los países en vías de desarrollo son los más frecuentemente afectados, como los de América Latina, Asía y África. El estado de Sonora, presenta una alta incidencia de AHA (12.57/100000 habitantes). Con el fin de explorar una posible asociación entre el MHC y la susceptibilidad al AHA se analizaron los genes asociados a la respuesta inmune adquirida HLA-DQBI y HLA-DRBI en 30 pacientes con AHA del estado de Sonora comparados con 61 individuos de un grupo control. En este trabajo se determinó la presencia del haplotipo heterocigoto DQBI*92DRBI+03. Solamente en el grupo control (9.2%), lo que sustenta de manera preliminar la idea de su posible participación en la resistencia al AHA. El 15.0% de los pacientes con AHA presentan el alelo DQBI+02 en comparación con el 26.7% observado en el grupo control. Otro hallazgo importante en el presente trabajo es el aumento de la frecuencia del genotipo DQBI+03/06 en los pacientes con AHA (16.7%), comparado con lo encontrado en controles (3.3%); lo cual posiblemente estaría relacionado a la susceptibilidad a la amibiasis extraintestinal. Si bien se requiere aumentar el tamaño de muestra para concluir contundentemente el estudio, los resultados obtenidos en el presente trabajo proveen indicios de que existe participación del HLA-DQBI en la resistencia y predisposición al AHA en población del Estado de Sonora. Universidad de Sonora. División de Ciencias Biológicas y de la Salud. Programa de Maestría en Ciencias de la Salud, 2013.

Tesis de maestría en ciencias de la salud En abril de 2009 se hizo público a nivel nacional la presencia de un virus de influenza en humanos nunca antes descrito denominado virus de influenza (A/H1N1). Dada la tasa de transmisión del virus y su rápida dispersión a todos los continentes del mundo, la Organización Mundial de la Salud declaró el estatus de pandemia. El estado de Yucatán, no fue la excepción, al reportar casos de infección humana con el virus pandémico; ocupó el segundo l ugar en el país en casos reportados. Se sabe que el virus de la influenza ha desarrollado resistencia a algunos antivirales, entre ellos el oseltamivir. Esta resistencia se ha asociado con la mutación H275Y en la proteína neuraminidasa. Es importante el monitoreo del surgimiento de virus resistentes, ya que esto permite generar terapias alternas. Por lo anterior, el objetivo de este estudio es analizar genéticamente el virus A/H1N1 resistente a oseltamivir para detectar esta mutación. Para la realización de este trabajo se utilizaron virus obtenidos de aislados clínicos resistentes a oseltamivir. Se amplificó un segmenteo de aproximadamente 670 pb del gen de la neuraminidasa de 5 muestras por RT-PCR. Posteriormente, se secuenciaron para su análisis y la búsqueda de la mutación. Las secuencias obtenidas se compraron con la del virus de la influeza A virus (A/Mexico/InDRE797/2010(H1N1)) que la presenta. Al alinearlas y comprarlas se observó que ninguna de las secuencias obtenidas de los virus analizados presentó la mutación H275Y. Sin embargo, se encontraron otras mutaciones cercanas al sitio activo de la enzima, los cuales podrían explicar la disminución de su susceptibilidad a oseltamivir. Universidad de Sonora. División de Ciencias Biológicas y de la Salud, 2011