Search

Введение. Одна из главнейших проблем современной трансплантологии – иммунологическая дисфункция трансплантата, частота развития которой достигает 40%. Пункционная биопсия в 2,2% случаев сопряжена с развитием осложнений и может привести к летальному исходу. Цель исследования – разработка методики неинвазивной диагностики отторжения трансплантата печени в отдаленном периоде после операции с использованием терминально-дифференцированных эффекторных CD8+Т-лимфоцитов. Материал и методы. Проведено пилотное одноцентровое обсервационное ретроспективное случай-контроль исследование, включающее 45 реципиентов после ортотопической трансплантации печени. По клиническому течению послеоперационного периода пациенты стратифицировались на 2 группы в зависимости от наличия эпизодов отторжения в трансплантате. Все пациенты после трансплантации получали иммуносупрессивную терапию. Иммунофенотипы реципиентов определялись методом проточной цитофлоуметрии. Всем пациентам была выполнена пункционная биопсия трансплантата. Результаты. Результаты исследования биоптатов трансплантатов печени показали, что 14 пациентов (31%) из 45 имели морфологические признаки отторжения. У пациентов с отторжением был достоверно более высокий уровень абсолютного количества СD8+ Тemra-клеток, что составило 0,23 (0,14; 0,38) ×109/л по сравнению с пациентами без отторжения – 0,09 (0,034; 0,16)×109/л (р=0,034). Результаты ROC- анализа показали, что наиболее оптимальный порог отсечения уровня СD8+ Тemra-лимфоцитов при диагностике иммунологической дисфункции трансплантата печени в отдаленном периоде составил 0,1882×109/л, чувствительность и специфичность при данном пороге отсечения составила 73,33 (95% ДИ: 44,9-92,0) и 96,55 (95% ДИ: 82,2-99,4,) соответственно. Выводы. Увеличение абсолютной численности терминально-дифференцированных эффекторных CD8+ Т-лимфоцитов является диагностическим критерием у пациентов с иммунологической дисфункцией трансплантата в позднем посттрансплантационном периоде. Высокая чувствительность и специфичность порога отсечения абсолютного количества CD8+ Тemra-лимфоцитов у пациентов после трансплантации печени и достоверная разница между количеством клеток у пациентов с нормальным послеоперационным течением, имеющих иммунологическую дисфункцию трансплантата, позволяет рассматривать субпопуляцию Т-лимфоцитов как прогностический биомаркер отторжения в позднем посттрансплантационном периоде. Корреляция этого показателя с результатами морфологического исследования делает его альтернативным и, главное, безопасным неинвазивным способом ранней диагностики отторжения.

Background. Immune-mediated graft dysfunction with the prevalence of 40% is one of the main problems of modern transplantology. Although percutaneous liver graft biopsy is associated with the development of different complications occurring in 2,2% of cases and can also lead to fatal outcome Objective – to develop a noninvasive method of graft dysfunction diagnostics in the late post-transplant period using terminally differentiated effector CD8+ T-lymphocytes. Material and methods. There was carried out a single center observational retrospective case-control pilot study, including 45 recipients after orthotopic liver transplantation. According to the postoperative clinical course the patients were stratified into 2 groups depending on the presence of graft rejection episodes. All patients got immunosuppressive therapy after liver transplantation. Immunophenotypes of the recipients were determined by flow cytometry method. Percutaneous liver graft biopsy was performed in all patients, the results of histological examination were evaluated according to the international Banff schema for grading liver allograft rejection. Results. The results of liver biopsies showed that 14 (31%) out of 45 patients had morphological signs of rejection. The patients with rejection had a reliably higher level of CD8+ Temra cells absolute number (0,23 (0,14;0,38) x 109/l) in comparison to those without rejection (0,09 (0,034;0,16) x 109/l (p=0,034)). The results of ROC-analysis have shown that the most optimal cut-off threshold of CD8+ T-lymphocytes level in immune-mediated graft dysfunction diagnostics in the late post-transplant period is 0,1882x109/l; sensitivity and specificity in this case being 73,33 (95%; 44,9-92,0) and 96,55 (95%; 82,2-99,4) respectively. Conclusions. The increase of terminally differentiated effector CD8+ T-lymphocytes absolute number has diagnostic importance in patients with immune-mediated graft dysfunction in the late post-transplant period. High sensitivity and specificity of cut-off threshold of CD8+ Temra lymphocytes absolute number in patients after liver transplantation as well as reliable difference between cell number in patients with normal postoperative period and in patients with immune-mediated graft dysfunction allow considering T-lymphocyte subpopulation as a rejection predictor in the late post-transplant period. The correlation between CD8+ T-lymphocyte absolute number and the results of histological examination makes the former an alternative and, what is more, safe noninvasive method in early diagnostics of liver graft rejection.